藤茶中二氫楊梅素的研究概況

楊志堅袁弟順陳凌華程租鋅許 明岳文杰2,

(1農(nóng)業(yè)部海峽兩岸農(nóng)業(yè)技術(shù)合作中心 2福建農(nóng)林大學(xué)中國白茶研究所 3福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院 福建福州 350002)

藤茶中二氫楊梅素的研究概況

楊志堅1,2,3袁弟順1,2*陳凌華3程租鋅1許 明1岳文杰2,3

(1農(nóng)業(yè)部海峽兩岸農(nóng)業(yè)技術(shù)合作中心 2福建農(nóng)林大學(xué)中國白茶研究所 3福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院 福建福州 350002)

藤茶是我國民間飲用較廣的一種代用茶，因其具有重要的生理保健功能而廣受歡迎。二氫楊梅素是藤茶中的主要功能性成分，本文對藤茶中二氫楊梅素的理化性質(zhì)、提取純化方法、測定方法以及主要生理保健功能展開了闡述。并對開展高二氫楊梅素含量的藤茶方面的研究作了展望。

藤茶 二氫楊梅素 保健功能

藤茶（Ampelopsis grossedentata）為葡萄科蛇葡萄屬植物的嫩莖葉，又名甜藤茶。藤茶主要分布于廣東、廣西、云南、貴州、湖南、江西、福建等省區(qū)[1]。藤茶中主要的有效成分為黃酮類化合物，以二氫楊梅素的含量最高[2]。藤茶中的二氫楊梅素又名雙氫楊梅樹皮素、福建茶素、白蘞素、蛇葡萄素等。藤茶中的二氫楊梅素具有抗氧化、抑菌、提高免疫力、降血脂、清除自由基、抗血栓、抗腫瘤、消炎等重要生理保健功能。

1 藤茶中二氫楊梅素的理化性質(zhì)

二氫楊梅素 （3，5，7，3′，4′，5′-六羥基-2，3-雙氫黃酮醇，dihydromyricetin,DMY）是一種多酚羥基雙氫黃酮醇，又稱蛇葡萄素，屬黃酮類化合物。二氫楊梅素的結(jié)構(gòu)式如下：

何桂霞等[3]研究發(fā)現(xiàn)藤茶春夏幼嫩莖葉中二氫楊梅素的含量達到樣品干重的20%以上,幼葉中的心葉可達40%以上。林淑英等[4]對二氫楊梅素的穩(wěn)定性及其影響因素開展研究，發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素溶液易發(fā)生氧化，穩(wěn)定性較差，在溫度不超過100℃，加熱時間不超過30min以及酸性和中性條件下可保持其化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，而過渡態(tài)金屬離子Al3+、Fe3+、Cu2+等對二氫楊梅素的氧化則起到誘導(dǎo)催化作用。

2 藤茶二氫楊梅素提取和純化方法

二氫楊梅素在25℃水中溶解度為4%，熱水中溶解度更大；易溶于乙醇及丙酮，極微溶于醋酸乙酯。目前，對二氫楊梅素的提取方法研究比較多，主要根據(jù)二氫楊梅素的理化性質(zhì)采用相應(yīng)的提取方法。如張友勝等[5，6]利用“增溫溶解，保溫過柱，溫水解吸”的方法研究得出，在適宜溫度范圍50～70℃內(nèi)，60℃效果最好，該方法能很好地將70%左右的二氫楊梅素提純到80%;提純二氫楊梅素時，單位數(shù)量的D-16大孔吸附樹脂處理料液的數(shù)量，主要取決于料液中二氫楊梅素的純度。過柱時上柱料液濃度、過柱速度以及解吸時水的流速對二氫楊梅素的提取均有影響。選擇的適宜條件分別為5mg/mL的上柱料液濃度、2BV/h的過柱速度、6～10BV/h的水解吸速度。

利用重結(jié)晶可以制備高純度的二氫楊梅素。楊鈴等[7]通過微波法對藤茶中二氫楊梅素的萃取工藝進行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在提取溫度95℃，微波輻射時間為15min，料液比為1:20時二氫楊梅素的提取率最高。姚茂君等[8]進一步對超聲波輔助溶劑提取二氫楊梅素進行研究，發(fā)現(xiàn)在40℃下，以液料體積質(zhì)量比為15mL∶1g，以體積分?jǐn)?shù)65%乙醇溶液為溶劑，超聲波輔助提取40min，目標(biāo)物二氫楊梅素的一次提取率可達93.1%，優(yōu)于常規(guī)的熱提取法。李衛(wèi)等[9]也開展了溫度對密閉微波提取二氫楊梅素影響的研究，在溫度低于80℃時，提取率很低，溫度大于80℃小于110℃時，隨著溫度的升高提取率呈上升趨勢，110℃達到最高。

譚斌等[10]通過對二氫楊梅素純化方法進行比較研究發(fā)現(xiàn)，添加活性炭的方法，工藝相對簡單，操作比較方便，但成本增加，易造成環(huán)境污染等問題。利用水提醇溶法純化二氫楊梅素，方法簡單，但設(shè)備相對復(fù)雜一些，且工藝中使用了乙醇，增加了成本。利用水提石油醚萃取純化二氫楊梅素主要缺點是最后成品中可能含有少量有機溶劑，從而影響產(chǎn)品的安全性和應(yīng)用范圍，同時增加了生產(chǎn)成本。利用大孔吸附樹脂純化二氫楊梅素，方法方便，處理量大，能連續(xù)生產(chǎn)，但其主要缺陷是過柱時要求保溫，且涉及樹脂再生等問題。高速逆流色譜法純化可以一次性獲得高純度樣品，但缺點是樣品處理量少，難以一次性獲得大量樣品。因此，高速逆流色譜法（HSCCC）法在應(yīng)用于化學(xué)成分的分離提純時，應(yīng)盡可能地與其它常用分離方法互補進行。微波動態(tài)是一種新型的提取方法，采用微波動態(tài)循環(huán)階段逆流提取藤茶中的二氫楊梅的方法，可以保證使提取中的固液相二氫楊梅素的濃度差在單位時間內(nèi)保持在較高的水平[11]。

不同二氫楊梅素的純化方法，各有各的優(yōu)缺點。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展及二氫楊梅素應(yīng)用領(lǐng)域的不斷擴寬，對二氫楊梅素的純度提出更高的要求?？梢赃x擇高精密的設(shè)備來純化二氫楊梅素，以得到高純度的二氫楊梅素，如可以采用制備型色譜柱，同時通過控制流動相溶劑種類、流動相的配比、流動相的流速及保留時間來分離純化高純度的二氫楊梅素。

3 藤茶中二氫楊梅素的測定方法

二氫楊梅素的測定方法有紅外光譜法[12]、DSC差熱掃描法[13]、質(zhì)譜法、高效逆流色譜法[14]、高效液相色譜法[15]、薄層掃描法等。

楊鈴等[12]采用紅外光譜法對藤茶中的二氫楊梅素進行了定性分析，采用這種方法可以鮮明地鑒別有機物并對結(jié)構(gòu)進行分析，它通過吸收峰的位置、吸收峰的相對強度以及峰的形狀提供化合物的結(jié)構(gòu)信息，其中以吸收峰的位置最為重要。何桂霞等[15]用HPLC測定不同采收時期及不同部位的藤茶二氫楊酶素含量，用HPLC法采用NovapakC18柱(150mm×4.6mm，5μm)，甲醇-水-磷酸(27∶73∶0.1)為流動相，流速為 1.0mL/min；紫外檢測波長為290nm;柱溫為25°C，結(jié)果表明本方法線性關(guān)系良好，平均加樣回收率為99.47%，RSD為1.68%。5月份藤茶葉中二氫楊梅素含量最高，達27.8%～31.2%;葉中含量高于莖中3～4倍。

隨著藤茶二氫楊梅素研究的不斷深入，將要求縮短前處理的時間，提高檢測效率，因此必須探索開發(fā)出二氫楊梅素前處理柱來縮短前處理的時間，既能保證萃取物的潔凈、穩(wěn)定，又能縮短前處理的時間；同時應(yīng)用超高效液相色譜（UPLC）能快捷、準(zhǔn)確地測定藤茶二氫楊梅素的含量。

4 藤茶中二氫楊梅素的保健功能

4.1 抗氧化

二氫楊梅素有著良好的抗氧化效果和潛在的激發(fā)細(xì)胞活力的功效[16]。郭清泉等[17]通過采用量子化學(xué)計算法探討二氫楊梅素抗氧化機制，確定二氫楊梅素的抗氧化活性中心在其分子結(jié)構(gòu)的B環(huán) 3′，4′，5′位連酚羥基上。 通過研究發(fā)現(xiàn)量子化學(xué)計算手段確定二氫楊梅素的各量子化學(xué)參數(shù)與抗氧化活性之間的關(guān)系，確定了影響物質(zhì)抗氧化活性的主要因素，提出了二氫楊梅素分子的抗氧化活性中心。

楊書珍等[18]研究了二氫楊梅素的抗氧化能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素具有良好的抗油脂氧化的能力，抗氧化效果優(yōu)于兒茶素、大豆異黃酮、葛根異黃酮，與TBHQ(特丁基對苯二酚)的抗氧化效果相近。張友勝等[19]通過對二氫楊梅素進行化學(xué)修飾，制備了既能溶于油脂又具有較好抗氧化作用的二氫楊梅素硬脂酸酯。

4.2 抑菌作用

藤茶中二氫楊梅素具有很好的抑菌作用，故在食品加工與貯藏方面有很大的開發(fā)和利用前景。蕭力爭等[20]研究二氫楊梅素對細(xì)菌、酵母和霉菌的抑菌活性和最低的抑菌濃度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素對細(xì)菌的最低抑菌濃度不超過1.76g/L，在酸性或弱堿性環(huán)境中比在中性和強堿性環(huán)境下的抑菌活性更強。楊書珍等[21]對二氫楊梅素的抑菌效果進行研究，發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素對牛奶酸敗菌和青霉菌具有明顯的抑制作用，且抑菌效果優(yōu)于常見的防腐劑苯甲酸。

4.3 免疫作用

藤茶二氫楊梅素具有明顯的免疫作用。二氫楊梅素能顯著提高小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能和溶血素含量，增強免疫功能[22]。謝鵬等[23]研究發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素(DMY)對肉雞免疫機能的影響可能存在量效關(guān)系:二氫楊梅素在低于0.05%添加劑量的情況下對肉雞免疫器官的發(fā)育有促進作用。

4.4 降血脂、降血糖

藤茶具有良好的降血脂、降血糖功能。陳玉瓊等[24]通過對二氫楊梅素的降血脂效果進行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素對高脂血癥小鼠體重有明顯減輕作用；二氫楊梅素能不同程度降低小鼠血清TC、TG、LDL-C、MDA 含量，提高血清 HDL-C 含量及SOD活性，降低肝系數(shù)。肝臟病理學(xué)觀察表明，喂飼藤茶中的二氫楊梅素小鼠肝細(xì)胞變性、腫脹的程度減輕。鄭成等[25]通過以藤茶葉為原料，采用四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型，觀察二氫楊梅素的降血糖效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素對高血糖模型小鼠有明顯的降血糖效果。

5 展望

我國擁有豐富的藤茶資源，隨著對藤茶研究的不斷深入，二氫楊梅素成為藤茶研究的熱點。特別是二氫楊梅素的降血脂、抗氧化和防腐作用等成為研究的重點。因此，必須開展對藤茶中二氫楊梅素含量的影響因素研究，篩選出高二氫楊梅素含量的藤茶品種和研究出高二氫楊梅素含量的藤茶加工工藝，同時研究藤茶中二氫楊梅素的最佳提取方法、純化方法，為二氫楊梅素的開發(fā)與利用提供重要的理論依據(jù)，也為藤茶中二氫楊梅素在醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域的應(yīng)用擴展更大的空間。

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2010-01-03

楊志堅（1981-），男，主要研究方向為農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)研究。

*通訊作者：yandisun@163.com