腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛及催眠作用的影響

石丹萍 陳小嬌 陳銀寶 周艷 申璐 王賀 張雪艷 戴體俊

七氟烷是一種新型的鹵族吸入全麻藥，具有誘導(dǎo)快、蘇醒快、麻醉深度易調(diào)節(jié)、對(duì)循環(huán)抑制輕、呼吸道刺激小、有一定的肌松作用等優(yōu)點(diǎn)，是臨床上常用的揮發(fā)性吸入全麻藥，具有很好的鎮(zhèn)痛和催眠作用［1］。但每種麻醉藥都需特殊揮發(fā)罐裝置，既不經(jīng)濟(jì)也不宜于現(xiàn)場急救，且誘導(dǎo)緩慢、對(duì)呼吸道有一定的刺激性。因此，人們一直在探索其他給藥途徑的可能性。近來有大量的研究證明，吸入麻醉藥通過靜脈、腹腔、硬膜外等途徑給予原藥或乳劑均能達(dá)到麻醉的作用［2-4］。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛及催眠作用的影響。

1 材料和方法

1.1 試劑與儀器 七氟烷:上海恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào):08061837;YLS-6B智能熱板儀(上海，中國)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠，清潔級(jí)，徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體質(zhì)量(25±3)g。實(shí)驗(yàn)前3 d使小鼠熟悉實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，自由攝食飲水，每日于同一時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3 動(dòng)物分組及處理

1.3.1 按分層隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，將120只小鼠(雌雄不拘，熱板法僅選用雌性)分為12組(n=10)，分別用于熱板實(shí)驗(yàn)(40只):對(duì)照組(NS 組)，Sev1、Sev2、Sev3 組(1.96、2.8、4 mg/ml)。扭體試驗(yàn)(40 只):對(duì)照組(NS組)，Sev1、Sev2、Sev3 組(1.96、2.8、4 mg/ml)。催眠實(shí)驗(yàn)(40 只):對(duì)照組(NS 組)，Sev1、Sev2、Sev3 組(2.7、3.8、5.5 mg/ml)。

1.3.2 熱板實(shí)驗(yàn)［5］雌性小鼠置于YLS-6B智能熱板儀(55±0.5)℃，記錄從足部接觸熱板到舔后足的時(shí)間即熱板法痛閾(HPPT)。給藥前每只小鼠測HPPT2次，間隔5 min，取平均值為基礎(chǔ)痛閾(Basal HPPT)，剔除基礎(chǔ)痛閾大于30 s或小于5 s的動(dòng)物。為防止足部燙傷，觀察截止時(shí)間為60 s，超過60 s者，HPPT計(jì)為60 s。記錄各組小鼠的基礎(chǔ)痛閾和腹腔注射七氟烷后 5、15、25、35、45、60、90 min 的 HPPT。

1.3.3 扭體實(shí)驗(yàn)［5］小鼠腹腔注射1%冰醋酸溶液0.01 ml/g致痛，使小鼠出現(xiàn)腹部內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臀部高抬等行為反應(yīng)(扭體反應(yīng))。各組先以NS、Sev腹腔注射，20 min后注射1.5%醋酸，以15 min內(nèi)發(fā)生的扭體次數(shù)為疼痛定量指標(biāo)。扭轉(zhuǎn)法記錄各組小鼠腹腔注射醋酸后15 min內(nèi)的扭轉(zhuǎn)次數(shù)。

1.3.4 催眠實(shí)驗(yàn) 小鼠以NS、Sev腹腔注射后，放入瓶蓋打孔的棕色廣口瓶中，并記錄小鼠從腹腔注射后到翻正反射消失的時(shí)間，即潛伏期;以及到翻正反射恢復(fù)的時(shí)間，即為睡眠時(shí)間(ST)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(±s)表示，組內(nèi)采用配對(duì)t檢驗(yàn)和單個(gè)重復(fù)測量因素方差分析;組間用單因素方差分析和q檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 熱板實(shí)驗(yàn) 與基礎(chǔ)痛閾比較，Sev1給藥后15、25、60 min的HPPT 增加(P ＜0.05，P ＜0.01)，Sev2給藥后 25、35、45、60、90 min的 HPPT增加(P ＜0.05，P ＜0.01)，Sev3給藥后15、25、35、45、60 min 的 HPPT 增加(P ＜ 0.05，P ＜ 0.01)，而NS組沒有明顯變化(P＞0.05)。與NS組比較，Sev1各時(shí)點(diǎn)的HPPT的差別無顯著性(P＞0.05)，Sev2 25、35 min的HPPT增加(P＜0.05)，Sev3給藥后15～90 min的HPPT增加(P＜0.05，P＜0.01)。見表1。

表1 腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(±s，n=10)

表1 腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(±s，n=10)

注:#P ＜0.05，##P ＜0.01 vs basal HPPT，*P ＜0.05，*P ＜0.01 vs NS group

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2.2 扭體實(shí)驗(yàn) 與NS組比較，Sev1、Sev2、Sev3組的WT減少(P＜0.01)。表明腹腔注射Sev可增加小鼠的鎮(zhèn)痛作用。見表2。

表2 腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(±s，n=10)

表2 腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(±s，n=10)

注:*P＜0.05，**P＜0.01 vs NS group

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2.3 催眠實(shí)驗(yàn) NS組比較，Sev1、Sev2、Sev3組的潛伏期縮短、睡眠時(shí)間增加(P＜0.01)。表明腹腔注射Sev有催眠作用。見表3。

表3 腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠的催眠作用(±s，n=10，min)

表3 腹腔注射七氟烷對(duì)小鼠的催眠作用(±s，n=10，min)

注:*P＜0.05，**P＜0.01 vs NS group

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3 討論

吸入麻醉藥吸入給藥通常需配置昂貴的麻醉機(jī)，且誘導(dǎo)緩慢。有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)吸入異氟醚可明顯加重脂多糖誘導(dǎo)的肺損傷病變且對(duì)手術(shù)室造成空氣污染。因此，吸入麻醉藥非呼吸道給藥具有一定價(jià)值。根據(jù)吸入麻醉藥的體內(nèi)過程和以往的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，吸入麻醉藥腹腔注射給藥后同樣能夠達(dá)到催眠、鎮(zhèn)痛作用［2、5］。

本研究結(jié)果顯示，小鼠腹腔注射七氟烷，可增加熱板法痛閾值、減少扭體次數(shù)、延長睡眠時(shí)間。說明腹腔注射七氟烷完全可能產(chǎn)生鎮(zhèn)痛和催眠作用。但研究中也存在一些問題:小鼠可在腹腔注射后迅速入睡，并在較短時(shí)間內(nèi)(＜300 s)恢復(fù)，而后再度入睡，這可能與藥物的再分布有關(guān)。

本研究為尋求吸入麻醉藥腹腔注射給藥途徑提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但其鎮(zhèn)痛及催眠作用機(jī)制復(fù)雜［6-8］，故尚需進(jìn)一步對(duì)其作用機(jī)掉、應(yīng)用劑量、安全性及生物利用度做相關(guān)研究。

［1］張春艷，劉寶江.七氟醚的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀.醫(yī)學(xué)綜述，2008，14(7):2901-4901.

［2］戴體俊，葉妙，傅英.注射揮發(fā)性麻醉藥對(duì)動(dòng)物的作用.臨床麻醉學(xué)雜志，2004，13(5):262-263.

［3］徐茜，陳玉培.靜脈乳化異氟醚的研究進(jìn)展.醫(yī)學(xué)綜述，2008，14(15):0532-3532.

［4］柴云飛，宋靜波，楊靜，等.8%乳化異氟醚兔硬膜外麻醉作用觀察.四川醫(yī)學(xué)，2007，28(5):473-475.

［5］宋必衛(wèi)，徐叔云，馬傳庚，等.鎮(zhèn)痛藥物實(shí)驗(yàn)法/徐叔云，卞如濂，陳修主編.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).人衛(wèi)生出版社，2002:882-887.

［6］杭黎華，邵東華，楊映紅，等.AMPA對(duì)吸入麻醉藥催眠、鎮(zhèn)痛作用的影響.中國藥理學(xué)通報(bào)，2008，24(4):482-485.

［7］閆肅，戴體俊，曾因明，等.神經(jīng)元煙堿受體與異氟烷、七氟烷催眠和鎮(zhèn)痛作用的關(guān)系.中國藥理學(xué)通報(bào)，2008，24(3):318-322.

［8］王瑞明，方才，等.異氟烷催眠、鎮(zhèn)痛作用與NMD受體甘氨酸位點(diǎn)的關(guān)系.中國藥理學(xué)通報(bào)，2007，23(2):189-193.