歸胃經(jīng)寒性中藥對胃熱癥大鼠體征的影響

黃雪群， 李小梅， 李續(xù)娥

(1.華南師范大學(xué)廣東省植物發(fā)育生物工程重點實驗室，廣東廣州 510631；2.清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東清遠(yuǎn)511510； 3.廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510511)

歸胃經(jīng)寒性中藥對胃熱癥大鼠體征的影響

黃雪群1,2， 李小梅1,3， 李續(xù)娥1*

(1.華南師范大學(xué)廣東省植物發(fā)育生物工程重點實驗室，廣東廣州 510631；2.清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東清遠(yuǎn)511510； 3.廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510511)

用干姜水煎劑連續(xù)給大鼠灌胃15 d，復(fù)制胃熱癥大鼠模型，再分別以黃連、蒲公英、枳實水煎劑灌胃治療10d.比較大鼠的飲食量、大小便、舌色舌苔變化，用放射免疫分析法測定大鼠血清中白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)的濃度變化.結(jié)果顯示，造模后大鼠呈現(xiàn)舌紅苔黃(Plt;0.05)、飲食量增加(10%以上)、大小便量減少(10%以上)、且大便多數(shù)干結(jié)、小便顏色加深(Plt;0 .01)、IL-8顯著升高(Plt;0.01).黃連、蒲公英、枳實可改善上述胃熱癥的指標(biāo)，且寒性程度愈高、治療效果愈好.經(jīng)分析得知，黃連、蒲公英、枳實通過降低胃熱癥大鼠血清中的IL-8，改善胃熱癥大鼠的體征.

黃連； 蒲公英； 枳實； 胃熱癥； 體征

中醫(yī)胃熱癥是指火熱熾盛、雍滯于胃所致的癥候，證見胃脘灼熱或灼痛、口渴喜冷飲、牙齦腫痛、便結(jié)尿黃、舌紅苔黃等癥[1].按照中藥藥性的寒熱與治則關(guān)系“寒者熱之，熱者寒之”，本試驗擬研究歸胃經(jīng)寒性中藥黃連、蒲公英、枳實對胃熱證大鼠體征的影響，并通過檢測大鼠血清中IL-4、IL-8的變化來探討3味中藥影響胃熱癥大鼠體征的機理.

1 材料與方法

1.1動物及分組

SD大鼠120只，SPF級，雄性，體質(zhì)量220～280 g，2～3月齡，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供(合格證號：粵監(jiān)證字2005A031號)，隨機分成8組(每組15只)：空白對照組，模型對照組，黃連大、小劑量組，蒲公英大、小劑量組，枳實大、小劑量組.

1.2中藥制劑及劑量

干姜(ZingiberofficinaleRosc.)、黃連(CoptischinensisFranch.)、蒲公英(TaraxacummongolicumHand. Mazz.)、枳實(CitrusaurantiumL.)均購自廣州壽生堂大藥房，由廣東藥學(xué)院藥用植物教研室鑒定.按傳統(tǒng)中藥水煎法分別將各味藥用蒸餾水浸泡煮沸后，改文火繼續(xù)煮30 min成煎劑.取煎劑上清液經(jīng)過濾除菌后分別濃縮成含干姜、黃連、蒲公英、枳實1.0、0.1、0.5、0.5 kg/L的質(zhì)量濃度，置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?黃連、蒲公英、枳實大劑量和小劑量分別按人用劑量[2]的10倍和5倍計，則有：黃連(0.6、0.3 g/kg)、蒲公英(2.0、1.0 g/kg)、枳實(1.0、0.5 g/kg).

1.3胃熱證模型的建立及治療

將大鼠置于溫度為18～27 ℃，濕度為45%～75%，氣流10～25 cm/s，噪音低于50 dB(A)的安靜環(huán)境中.除空白對照組，其余各組按5 g/kg 的劑量灌胃1.0 kg/L的干姜水煎劑(空白對照組則灌胃等量生理鹽水)連續(xù)15 d造模[3].大鼠造模后,黃連、蒲公英、枳實的大劑量和小劑量組以設(shè)定的劑量連續(xù)灌胃治療10 d(空白對照組和模型對照組灌胃等量生理鹽水).

1.4體征的測定

食量、飲水量及大小便均以24 h為時間單位，分別于造模前、造模后、治療后連續(xù)觀測3 d，然后分別取其平均值為各指標(biāo)測定值.進(jìn)行舌象觀測時，用灌胃針的針管拉開大鼠上下門齒，使其自然舒展地將舌伸出口外，充分暴露，在自然光下肉眼直視舌象，舌色分為淡白舌、淡紅舌、紅舌、紅絳舌、青紫舌，分別記為0、1、2、3、4級；舌苔特征分為薄白苔、白膩苔、薄黃苔、黃膩苔，分別記為1、2、3、4級[4].

1.5IL-4、IL-8的測定

治療結(jié)束后自大鼠腹主靜脈取血樣，分離出血清，用放射免疫分析法測定大鼠血清中的IL-4、IL-8的變化.所用儀器為上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠SN-695B型放免γ測量儀，IL-4、IL-8試劑盒(批號050826)由解放軍總醫(yī)院放免所提供.測定過程在廣州中醫(yī)藥大學(xué)核醫(yī)學(xué)教研室進(jìn)行.

1.6數(shù)據(jù)分析的方法

采用t檢驗分析飲食量、大小便、IL-4、IL-8等指標(biāo)數(shù)據(jù)；采用卡方(2)檢驗分析舌色舌苔數(shù)據(jù).

2 結(jié)果

表1為歸胃經(jīng)寒性中藥對胃熱癥大鼠飲食量、大小便的影響，表2為歸胃經(jīng)寒性中藥對胃熱癥大鼠舌色、舌苔及IL-4、IL-8的影響.可見造模后，大鼠食量及飲水量均增加10%以上，而大小便量則減少10%以上，且大便多呈干結(jié)狀、小便顏色加深(Plt;0.01)，呈現(xiàn)舌紅苔黃(Plt;0.05)，IL-4降低不明顯、IL-8顯著升高(Plt;0.01)、IL-4/IL-8顯著降低(Plt;0.01).使用黃連、蒲公英、枳實治療后，胃熱癥大鼠的舌色、舌苔得到明顯改善(Plt;0.05)，日飲水量顯著降低(Plt;0.05 或Plt;0.01)，尿液顏色明顯變淡(Plt;0.01)，大便粒數(shù)顯著增加(Plt;0.05 或Plt;0.01)，大便干結(jié)得到改善，日尿量及日食量有些改善但不明顯.黃連和蒲公英能使胃熱證大鼠血清中IL-8明顯降低(Plt;0.01)、IL-4/IL-8顯著升高(Plt;0.01)，黃連尚能使胃熱癥大鼠血清中IL-4明顯增加(Plt;0.05 或Plt;0.01).

表1 歸胃經(jīng)寒性中藥對胃熱癥大鼠飲食量、大小便的影響

注：與空白對照組比較，1)Plt;0.05、2)Plt;0.01；與模型對照組比較，3)Plt;0.05、4)Plt;0.01(表2同).

表2 歸胃經(jīng)寒性中藥對胃熱癥大鼠舌色、舌苔及IL-4、IL-8的影響

比較表1、表2中黃連、蒲公英、枳實對胃熱癥大鼠的治療效果，可以看到：除日尿量及尿液吸收值外，其它指標(biāo)的治療效果從大至小依次為黃連、蒲公英、枳實.

3 討論

3.1胃熱證大鼠模型的建立

從本研究所復(fù)制的胃熱癥大鼠體征看，其達(dá)到了文獻(xiàn)[3]中胃熱癥體征的評定指標(biāo)：日飲水的體積分?jǐn)?shù)增加10%以上，舌紅；食量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加10%以上；糞便的質(zhì)量分?jǐn)?shù)減少10%以上，有干結(jié)出現(xiàn)；小便的體積分?jǐn)?shù)減少10%以上，小便較造模前變黃；符合《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中胃熱癥診斷的體征評定指標(biāo):主癥為口渴喜飲、舌紅，次癥為消谷善饑、大便秘結(jié)、小便短黃.本試驗胃熱癥大鼠的血清IL-8顯著增高亦與文獻(xiàn)[5]結(jié)果一致.表明本試驗造模成功.

3.2黃連、蒲公英、枳實對胃熱證的治療作用

黃連清熱燥濕，因其長于苦降而能瀉火下氣，可使胃熱胃火速清而胃氣能降；蒲公英為中醫(yī)傳統(tǒng)清熱解毒藥物，在清解臟腑熱毒病癥方面有顯著療效，用于胃病熱象者時可清瀉胃火；枳實理氣消滯，在治療胃腸動力障礙性疾病中療效顯著，為消積導(dǎo)滯之要藥.它們的功效有所區(qū)別，但均歸胃經(jīng)，三者的寒性程度以黃連為大寒、蒲公英為中寒、枳實為微寒.本研究以它們的水煎劑治療胃熱癥大鼠后，其體征得到明顯改善，且改善程度以黃連最強、蒲公英次之、枳實再次.說明三者均可有效治療胃熱癥，且治療效果與它們的寒性程度相對應(yīng).

3.3IL-4、IL-8指標(biāo)對胃熱癥大鼠的影響

IL-8是一種強大的中性粒細(xì)胞趨化和激活肽,主要由單核-巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、細(xì)菌成分或產(chǎn)物刺激過的上皮細(xì)胞等產(chǎn)生.它能激活中性粒細(xì)胞脫顆粒引起呼吸爆發(fā),被認(rèn)為是中性粒細(xì)胞在損傷組織中浸潤的主要介導(dǎo)者,已被證實與許多炎癥性疾病有關(guān)[6].IL-4是由Th2細(xì)胞產(chǎn)生的一種重要的抑炎性細(xì)胞因子，對機體的免疫功能和炎癥過程具有重要的調(diào)節(jié)作用[7].文獻(xiàn)[8]報道，黃連、蒲公英、枳實對胃熱癥大鼠的胃黏膜炎細(xì)胞浸潤有治療作用，可有效促進(jìn)其受損胃黏膜的修復(fù)，且寒性程度愈強，效果愈好.本試驗結(jié)果表明，造模后血清中IL-8顯著升高、IL-4降低不顯著、IL-4/IL-8顯著降低，是導(dǎo)致胃黏膜發(fā)生了以中性粒細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤而呈現(xiàn)出炎性變化的重要原因；黃連、蒲公英、枳實按寒性程度大小依次使胃熱癥大鼠的IL-8、IL-4、IL-4/IL-8得到相應(yīng)程度的改善，從而改善了胃黏膜的炎性損害，使胃熱證大鼠的胃黏膜得到修復(fù)，并呈現(xiàn)出寒性程度愈強、效果愈好.

同時IL-8是消化性潰瘍寒熱辨證關(guān)系的重要指標(biāo)，消化性潰瘍熱癥組IL-8均值明顯高于寒證組[9].因此IL-8的明顯升高，是引起模型大鼠飲食、大小便、舌色、舌苔等體征的變化而呈現(xiàn)出胃熱癥的原因；黃連、蒲公英、枳實按寒性程度大小依次使胃熱癥大鼠的IL-8得到相應(yīng)程度的改善，從而有效治療了胃熱癥，且治療效果與它們的寒性程度相對應(yīng).

綜上所述，黃連、蒲公英、枳實通過影響胃熱癥大鼠血清中的IL-8、IL-4、IL-4/IL-8 ，改善胃熱癥大鼠的體征，發(fā)揮對大鼠胃黏膜炎細(xì)胞浸潤的治療作用.本試驗的研究結(jié)果將同歸胃經(jīng)寒性中藥黃連、蒲公英、枳實對胃熱癥大鼠胃部生理機能影響的數(shù)據(jù)[8,10-11]合并，為建立歸胃經(jīng)寒性中藥的寒涼程度與胃熱癥動物體征及胃部生理機能之間的因子分析模型提供數(shù)據(jù).

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Keywords： Rhizoma Coptidis; Herba Taraxaci; Fructus Aurantii Immaturus; stomach-heat syndrome; general symptom

【責(zé)任編輯 成 文】

INFLUENCESOFCOLDCHINESEHERBALMEDICINEWITHSTOMACH-MERIDIANTROPISMONGENERALSYMPTOMOFRATSWITHSTOMACH-HEATSYNDROME

HUANG Xuequn1,2, LI Xiaomei1,3, LI Xu’e1*

(1. Guangdong Key Lab of Biotechnology for Plant Development, South China Normal University, Guangzhou 510631, China; 2. Qingyuan Polytechnic College, Qingyuan, Guangdong 511510, China; 3. School of Life Science, Guangzhou University, Guangzhou 510511, China)

Rats were fed with decoction of Rhizoma zingiberis for 15 days to induce the model of stomach-heat syndrome. After modeling, the decoctions of Rhizoma Coptidis (RC), Herba Taraxaci (HT) and Fructus Aurantii Immaturus (FAI) were given respectively to corresponding groups for 10 days. After the treatment, the amount of the daily diet, volume and absorbance of urine, pellet number and moistness of excrement, color and coating degree of tongue were recorded, the contents of interleukin-4 (IL-4) and interleukin-8 (IL-8) in serum were measured by radioimmunoassay. The results showed: the model rats had yellow coating and red tongues (Plt;0.05), amount of daily diet were increased (over 10%), urine volume and excrement pellet number were decreased (over 10%), the urine color became yellow (Plt;0.01), the excrement became dry, and the content of IL-8 increased noticeably (Plt;0.01). RC, HT and FAI could improve the indexes observed above, and the colder the nature, the better the effects. It can be concluded that the reason why RC, HT and FAI relieve the general symptom of rats with stomach-heat syndrome is that they can decrease the content of IL-8 in serum.

2009-09-07

廣東省自然科學(xué)基金資助項目(7005844)

黃雪群(1977—)，女，廣東連州人，華南師范大學(xué)2004級在職碩士研究生，清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院講師，Email:huangxuequn@163.com；李續(xù)娥(1964—)，女，陜西興平人，博士，華南師范大學(xué)教授，主要研究方向：中藥藥性理論，Email:lixuescnu@sohu.com.

*通訊作者

1000-5463(2010)01-0088-04

R285.5

A