紫蘇子油納米乳的制備及其對(duì)高血壓大鼠血壓及心率的影響

吳旭錦,朱小甫

(咸陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物科技系,陜西咸陽(yáng)712000)

高血壓可導(dǎo)致多種心血管疾病的發(fā)生,嚴(yán)重危害人類的健康,目前臨床上應(yīng)用的降血壓藥對(duì)肝、腎多有不良反應(yīng),且易產(chǎn)生藥物依賴。因此,尋找無(wú)毒副作用的降壓藥,是心腦血管疾病防治中亟待解決的問(wèn)題。紫蘇子油可降血壓、降血脂、預(yù)防心血管疾病[1-3],但它對(duì)血壓的影響及其作用的機(jī)制是目前尚未深入開展的課題。

紫蘇子油屬干性油,在加工和儲(chǔ)藏過(guò)程中極易氧化而失去生理活性。因而防止紫蘇子油氧化的方法是其生產(chǎn)、貯存中最關(guān)鍵的問(wèn)題。納米乳是一種近年來(lái)被廣泛應(yīng)用的新型藥物載體,對(duì)易氧化的藥物有保護(hù)作用[4]?，F(xiàn)以聚氧乙烯氫化蓖麻油(RH 40)為表面活性劑,小麥胚芽油為油相,制備紫蘇子油納米乳,觀察紫蘇子油納米乳對(duì)高血壓大鼠血壓及心率的影響,為紫蘇子油的應(yīng)用開發(fā)提供合理的試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 左旋硝基精氨酸(L-NNA,Sigma公司);紫蘇子油(盤錦格潤(rùn)生物科技有限公司);紫蘇子油軟膠囊(湖北李時(shí)珍生物科技有限公司);其他所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。SD大鼠(體重160～180 g,雌雄各半),購(gòu)于解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2 方法

1.2.1 紫蘇子油納米乳的制備 采用滴定法制備紫蘇子油納米乳：精確稱取聚氧乙烯氫化蓖麻油(RH 40)18.0 g,小麥胚芽油2.0 g,放入燒杯,室溫下攪拌使之充分混勻,加入5.0 g紫蘇子油,攪拌混勻后向其中緩慢滴加蒸餾水,邊加邊攪拌,體系會(huì)變粘稠,繼續(xù)滴加并不斷攪拌,當(dāng)體系突然變稀時(shí),形成的即是穩(wěn)定的無(wú)色透明紫蘇子油納米乳,稱其總重量為50.0 g。

1.2.2 紫蘇子油納米乳對(duì)大鼠血壓及心率的影響

1.2.2.1 大鼠高血壓模型的建立[5]采用腹腔注射L-NNA建立高血壓大鼠模型。將20只體重160 g～180 g SD大鼠隨機(jī)分為2組,雌雄各半。LNNA 組：每日給L-NNA 15 mg/(kg?d),分2次腹腔注射,連續(xù)4周,以此方法來(lái)制備高血壓模型;于第2周起給自來(lái)水2mL灌胃,每日1次,連續(xù)4周。對(duì)照組：給1 mL生理鹽水腹腔注射,每日2次,連續(xù)4周。于第2周起給自來(lái)水2mL灌胃,每日1次,連續(xù)4周。于第4周末用RBP-1B型大鼠尾壓測(cè)量?jī)x測(cè)定每組大鼠血壓。

1.2.2.2 紫蘇子油納米乳對(duì)高血壓大鼠血壓及心率的影響 將SD大鼠70只,隨機(jī)分成7組,每組10只,雌雄各半,分為正常組(正常飼喂)、模型組(每日灌服生理鹽水2.5 g/kg)、空白納米乳組(每日灌服空白納米乳2.25 g/kg)、紫蘇子油軟膠囊組(每日灌服紫蘇子油軟膠囊2.60 g/kg)、紫蘇子油組(每日灌服紫蘇子油2.00 g/kg)、紫蘇子油納米乳組(每日灌服紫蘇子油納米乳2.25 g/kg)及陽(yáng)性對(duì)照組(每日灌服牛黃降壓丸0.12 g/kg),連續(xù)給藥15 d后,測(cè)量各組大鼠尾動(dòng)脈收縮壓和心率的變化。測(cè)定時(shí)間定于 8：00～9：00。以心臟重量(m g)/體重(g)比值表示心指數(shù)。結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理試驗(yàn)結(jié)果以±SD表示,應(yīng)用方差分析及組間q檢驗(yàn)作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

2 結(jié)果

2.1 紫蘇子油納米乳制備結(jié)果 RH 40與小麥胚芽油質(zhì)量比為8∶2、9∶1時(shí)均能形成穩(wěn)定、均質(zhì)、透明的具淡藍(lán)色乳光的紫蘇子油納米乳,以8∶2為佳。

2.2 對(duì)大鼠血壓及心率的影響試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 大鼠高血壓模型的建立結(jié)果 腹腔注射LNNA建立高血壓大鼠模型,4周后,用RBP-1B型大鼠尾壓測(cè)量?jī)x測(cè)定每組大鼠血壓,結(jié)果見表1。模型組大鼠與正常組大鼠血壓有顯著差異,說(shuō)明造模成功。與對(duì)照組大鼠相比,L-NNA大鼠血壓升高48%(P＜0.01),心率減慢10%(P＜0.01),心肌肥大,心指數(shù)增加26%(P＜0.01)。

表 1 大鼠高血壓模型建立的測(cè)定結(jié)果(±SD,n=10)

表 1 大鼠高血壓模型建立的測(cè)定結(jié)果(±SD,n=10)

注：與正常組比較,差異極顯著(P＜0.01),用字母a表示

組別 血壓 心率 心指數(shù)正常組 110±5 384±10 3.08±0.18模型組 163±8a 345±9a 3.88±0.19a

2.2.2 大鼠血壓及心率影響的試驗(yàn)結(jié)果 紫蘇子油納米乳對(duì)高血壓大鼠血壓的影響見表2。紫蘇子油納米乳能顯著降低大鼠血壓,與模型組比較,血壓降低28%(P＜0.01),心率增快14%(P＜0.01),心指數(shù)降低19%(P＜0.01)。

3 討論

本研究結(jié)果顯示,紫蘇子油納米乳對(duì)大鼠尾動(dòng)脈收縮壓顯著低于模型組,提示較高劑量的紫蘇子油納米乳有明顯的抵抗血壓升高的作用,這為紫蘇子油的應(yīng)用開發(fā)提供了合理的試驗(yàn)依據(jù)。

心腦血管病死亡率很高,高血壓則是冠心病、心肌梗死、腦卒中的主要危險(xiǎn)因素之一。多年以來(lái),眾多學(xué)者致力于心腦血管病的研究,建立了多種高血壓動(dòng)物模型,這對(duì)人類高血壓病的發(fā)病機(jī)制、并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展規(guī)律及防治措施起了重要的作用。高血壓大鼠模型也可分為自發(fā)性高血壓大鼠模型和繼發(fā)性高血壓大鼠模型。藥物誘發(fā)高血壓大鼠模型屬于繼發(fā)性高血壓大鼠模型。本研究采用腹腔注射LNNA建立高血壓大鼠模型,機(jī)制是臨床及試驗(yàn)研究表明,高血壓患者及動(dòng)物存在內(nèi)皮依賴性的血管舒張功能障礙,在持續(xù)性的誘導(dǎo)NO合成下降過(guò)程中,內(nèi)皮功能障礙可增強(qiáng)壓力反射,通過(guò)損害機(jī)體的自穩(wěn)機(jī)制中而引起高血壓,升高的血壓又可以進(jìn)一步損害內(nèi)皮細(xì)胞的NO合成能力,維持已形成的高血壓。

表2 紫蘇子油納米乳對(duì)高血壓大鼠血壓、心率和心指數(shù)的影響(±SD,n=10)

表2 紫蘇子油納米乳對(duì)高血壓大鼠血壓、心率和心指數(shù)的影響(±SD,n=10)

注：與模型組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母a表示;差異極顯著(P＜0.01),用字母 b表示;與正常組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母c表示;差異極顯著(P＜0.01),用字母d表示;與陽(yáng)性對(duì)照組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母 e表示;差異極顯著(P＜0.01),用字母f表示;與紫蘇子油納米乳組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母g表示

組別 血壓(mm Hg) 心率(次/m in) 心指數(shù)正常組 112±8b 386±9 3.11±0.15模型組 162±7 342±6 3.85±0.17紫蘇子油組 129±4a,c,e,g 399±2 3.12±0.16紫蘇子油軟膠囊組 130±6a,c,e,g 401±4 3.14±0.12空白納米乳組 161±5d,f 340±9 3.82±0.14陽(yáng)性對(duì)照組 110±6b 382±5 3.09±0.11紫蘇子油納米乳 116±7b 390±8 3.10±0.16

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