紅車軸草和白車軸草的生藥學(xué)研究

朱蕓,李鵬

(石河子大學(xué)藥學(xué)院/新疆特種植物藥資源重點實驗室,石河子832002)

紅車軸草和白車軸草的生藥學(xué)研究

朱蕓,李鵬

(石河子大學(xué)藥學(xué)院/新疆特種植物藥資源重點實驗室,石河子832002)

通過對紅車軸草和白車軸草生藥學(xué)研究,為車軸草的開發(fā)利用、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定及生藥學(xué)方面的研究提供依據(jù)。采用原植物鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定、理化鑒定的方法對兩種車軸草植物形態(tài),性狀特征、根、莖、葉橫切面組織構(gòu)造、粉末、理化特征等進(jìn)行了鑒定研究。紅車軸草和白車軸草在植物形態(tài)、性狀特征、組織結(jié)構(gòu)和所含化學(xué)成分等方面均有一定的差異。研究結(jié)果可作為車軸草生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的依據(jù)。

車軸草;生藥學(xué)研究;藥材性狀;顯微特征;理化特征

Abstract:To provide evidence for the establishment of quality standard,pharmacognostic studies and the further utilization ofTrif olium prateenL.andTrif olium itpensL.through the study of their pharmacognos-tic characteristics.By means of identification of the original plant,character identification,microscopic characteristics and its physicochemical identification.It studied modality,character specificity,tissue constitution of transverse section of root,stem and leaf,powder and physicochemical identification of two species of Trifolium.Results showed that some differences between two species of Trifolium were its modality,character specificity,tissue constitution,chemical composition.The study outcomes can be taken as the basis for setting up the quality standard ofTrif olium prateenL.

Key words:Trif olium PrateenL.;pharmacognostic study;medical materialcharacters;microscopy characteristics;physicochemical characteristics

紅車軸草(Trif olium prateenL).和白車軸草(Trif olium itpensL.)是豆科車軸草屬多年生草本植物,全草皆可入藥,具有止咳祛痰、鎮(zhèn)痙止痛、抗病毒、抗真菌、免疫調(diào)節(jié)等功效,其提取物對預(yù)防乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、改善骨質(zhì)疏松和改善婦女更年期癥狀有一定作用。近年來的研究主要集中在化學(xué)成分及應(yīng)用方面[1-6],而對它們生藥學(xué)方面的研究未見報道。作為新疆常見的藥用植物,有必要對其進(jìn)行深入的生藥學(xué)研究。本文對地產(chǎn)紅車軸草和白車軸草揮發(fā)油含量、原植物、生藥性狀、顯微、理化鑒定進(jìn)行系統(tǒng)地研究,以示區(qū)別。以期為更好的開發(fā)和利用新疆豐富的車軸草資源提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

樣品采自石河子市,均為栽培品,經(jīng)李鵬副教授鑒定為豆科車軸草屬紅車軸草(Trif olium Prateen L.)和白車軸草(Trif olium ItpensL.)。樣品陰干 ,粉碎 ,備用 。

FW-100型高速萬能粉碎機、KDM型調(diào)溫電熱套(山東鄄城振興儀器廠)、揮發(fā)油測定器、CX21型顯微鏡(奧林巴斯)、Powershot數(shù)碼照相機(Canon)、UV-2401紫外分光光譜儀(日本島津)等。所用試劑均為分析純。

1.2 實驗方法

本實驗從紅車軸草和白車軸草的全草性狀、橫切面組織構(gòu)造、粉末特征及理化鑒別幾方面進(jìn)行研究。

1.2.1 原植物鑒定

通過植物形態(tài)觀察,核對文獻(xiàn),確定植物學(xué)名,描述其形態(tài)特征。

1.2.2 性狀鑒定

通過對藥材外形、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、氣味的觀察、測量及聞嘗描述紅車軸草和白車軸草生藥的性狀特征。

1.2.3 切片的制作

取紅車軸草和白車軸草全草用FAA固定液固定,采用徒手切片法切片,經(jīng)過脫水、染色等過程,制成臨時切片。

1.2.4 粉末顯微鑒定

取全草粉碎,過60目篩,水合氯醛加熱透化后,滴加稀甘油,顯微鏡下觀察。

1.2.5 理化鑒別

各取紅車軸草和白車軸草粗粉2 g,加乙醇20 mL,冷浸2 h,石油醚萃取3次,棄去石油醚液,保留乙醇液作為供試品。

1.2.6 紫外光譜

取紅車軸草和白車軸草供試品,適當(dāng)稀釋,以乙醇作空白,于200～400 nm波長處進(jìn)行掃描[8]。

1.2.7 揮發(fā)油含量測定

分別稱取樣品粉末100 g,置1000 mL圓底燒瓶中,按《中華人民共和國藥典》(2005版一部)揮發(fā)油測定法(甲法)提取揮發(fā)油,讀取揮發(fā)油量,并計算揮發(fā)油含量。

2 結(jié)果

2.1 材料鑒定2.1.1 紅車軸草

主根甚長。莖粗壯,具縱棱,莖直立或平臥上升。密生或疏生柔毛,偶有禿凈莖。三出復(fù)葉,托葉近卵形,膜質(zhì)。每側(cè)具脈紋7條左右,基部抱莖。葉柄較長,莖上部葉柄較短,密生或疏生柔毛。小葉多呈橢圓形或近卵形,先端鈍,基部闊楔形,兩面疏生或者密生白色柔毛;葉面常有“V”字形白斑。花序球狀或卵狀頂生;總花梗甚短,包于頂生托葉內(nèi),托葉擴展成焰苞狀;花朵密集,近無花梗;萼鐘形,被長柔毛,具脈紋8～10條,萼齒絲狀,錐尖,比萼筒短,最下方一齒比其余齒長1倍左右;花冠蝶形,紫紅色,旗瓣卵形,翼瓣比龍骨瓣長。雌蕊2,子房橢圓形;雄蕊6左右,未見種子。

2.1.2 白車軸草

株高10～30 cm。主根短,側(cè)根和須根較發(fā)達(dá),須根極多。莖匍匐生,節(jié)上生根。全株近無毛。三出復(fù)葉,托葉卵狀披針形,膜質(zhì),基部抱莖成鞘狀。葉柄較長,10～30 cm。小葉呈倒卵形或倒心形,先端凹頭至鈍圓,基部楔形漸窄至小葉柄,葉面“V”字形白斑較寬。中脈下面隆起,小葉柄1～2 mm,微被柔毛。花序球形頂生,總花梗甚長,長于葉柄,花朵密集,無總苞,苞片披針形,錐尖,花長 7～12 mm,花梗比花萼長,開花后下垂。萼呈鐘形,具脈紋10條,5裂,披針形短于萼筒,無毛,花冠白色或淡紫色,花冠蝶形。種子3粒,闊卵形,有明顯凹槽。

2.2 性狀鑒定

2.2.1 紅車軸草

為干燥全草。主根長,支根粗壯,須根細(xì)小而多,棕色。莖扁平,寬 1～5 mm,綠色,密生或疏生柔毛,節(jié)明顯,節(jié)間6～8 cm。莖斷面白色,平坦,外皮纖維性,髓大。掌狀三出復(fù)葉,上面正面黃綠色,背面顏色稍淺。皺縮,被生柔毛。葉正反面均有且為白色柔毛,常有“V”字形白斑。葉柄斷面白色,花序暗紫色。質(zhì)輕,易碎。味淡微苦。

2.2.2 白車軸草

為干燥全草。主根短,側(cè)根和須根發(fā)達(dá)。地下莖節(jié)明顯,上生根,全株無毛。地上莖直徑1 mm,斷面白色。葉紙質(zhì),卷曲皺縮,葉柄和花梗中空。花序呈乳白色或黃棕色。質(zhì)脆易碎。味微酸略苦。

2.3 顯微鑒定

2.3.1 葉橫切面

2.3.1.1 紅車軸草 上、下表皮細(xì)胞類方形,外被角質(zhì)層,波狀突起,具氣孔;可見大量非腺毛,腺毛偶見。柵欄組織為1～2列細(xì)胞,含大量葉綠體,海綿組織為3～4列細(xì)胞,主脈處細(xì)胞較大。主脈為雙韌型維管束,木質(zhì)部導(dǎo)管6～7列,韌皮部中可見少量方晶。見圖1。

2.3.1.2 白車軸草 表皮可見少量腺毛。柵欄組織為2～3列細(xì)胞,通過主脈;海綿組織為3～5列細(xì)胞,細(xì)胞間隙大。主脈為雙韌型維管束。見圖2。

圖1 紅車軸草葉橫切面Fig.1 Leaf cross section of Trifolium prateen L.

圖2 白車軸草葉橫切面Fig.2 Leaf cross section of Trifolium itpens L.

2.3.2 莖橫切面

2.3.2.1 紅車軸草 類圓形,邊緣有波狀細(xì)棱脊12～15條。表皮為1列類方形細(xì)胞,具多數(shù)單細(xì)胞非腺毛及少量腺毛。皮層極窄,內(nèi)含葉綠體。維管束12～15個,于棱脊處較為發(fā)達(dá),韌皮部新月形或半月形,形成層不明顯,木質(zhì)部導(dǎo)管數(shù)十列,徑向排列。髓大。見圖3。

2.3.2.2 白車軸草 外被少數(shù)單細(xì)胞非腺毛。皮層寬廣。維管束10～12個,韌皮部外側(cè)具多數(shù)纖維,木質(zhì)部連續(xù)成環(huán)。髓部及射線中可見少量草酸鈣方晶。見圖4。

圖3 紅車軸草莖橫切面Fig.3 Stem cross section of Trifolium prateen L.

圖4 白車軸草莖橫切面局部Fig.4 Stem cross section of Trifolium itpens L.

2.3.3 根橫切面

2.3.3.1 紅車軸草 木栓細(xì)胞2～3列,皮層極窄。韌皮部寬,外側(cè)為數(shù)層纖維束。形成層成環(huán)。木質(zhì)部導(dǎo)管發(fā)達(dá),導(dǎo)管及周圍細(xì)胞常含黃棕色分泌物。射線長,延伸至木栓層,射線中可見少量草酸鈣方晶?？梢姼E維管束。見圖5。

圖5 紅車軸草根橫切面Fig.5 Root cross section of Trifolium prateen L.

圖6 紅車軸草根橫切面Fig.6 Root cross section of Trifolium itpens L.

2.3.3.2 白車軸草 皮層由數(shù)層薄壁細(xì)胞組成,其中可見數(shù)個分泌細(xì)胞聚集,內(nèi)含黃棕色分泌物。見圖6。

2.3.4 粉末

2.3.4.1 紅車軸草

(1)非腺毛:常見兩種,均為單細(xì)胞。一種表面有顆粒狀突起,較短,壁厚,長度為400～700μm;另一種甚長,彎曲褶皺,個別為紫紅或藍(lán)紫色。

(2)腺毛:圓柱狀,頭部略膨大,由數(shù)個細(xì)胞組成,稍皺縮,內(nèi)含有黃棕色分泌物。

(3)氣孔:不定式,副衛(wèi)細(xì)胞為3～4個,兼有少數(shù)不等式,表皮細(xì)胞壁多平直。

(4)方晶:多,成片存在,花冠表皮細(xì)胞中也含有大量方晶。

(5)花柱碎片:細(xì)胞分化成星狀毛,常5～7個分枝,圓錐狀,先端較尖。

(6)花粉粒:淡黃棕色,類圓形,直徑 30～37 μm。表面常有顆粒狀突起或網(wǎng)狀紋理,萌發(fā)孔3個。亦可見螺紋導(dǎo)管、纖維、薄壁細(xì)胞等。見圖7。

2.3.4.2 白車軸草

(1)非腺毛:3種,均為單細(xì)胞。一種表面有疣狀突起,壁薄,表面有疣狀突起,長度差別極大,少見;一種為厚壁非腺毛,腔小,120～600μm;表面光滑,常見;另一種甚長,彎曲褶皺,個別為藍(lán)色。

(2)腺毛:紡錘狀,基部和頭部細(xì)胞略小,由4～7個細(xì)胞組成,含黃色分泌物。

(3)氣孔:多數(shù)為不等式。

(4)導(dǎo)管:螺紋導(dǎo)管,網(wǎng)紋導(dǎo)管少見。

(5)花粉粒:淡黃色,橢圓形或類圓形,直徑25～30μm,外壁平坦。亦有方晶、厚壁細(xì)胞、纖維、花粉囊內(nèi)壁細(xì)胞等。見圖8。

圖7 紅車軸草粉末Fig.7 Powder of Trifolium prateen L.

圖8 白車軸草粉末Fig.8 Powder of Trifolium itpens L.

2.4 理化鑒定

2.4.1 顯色

由顯色結(jié)果(表1)初步判斷紅車軸草中含有黃酮類化合物。

2.4.2 紫外光譜

取紅車軸草和白車軸草供試品,適當(dāng)稀釋,以乙醇作空白,于200～400 nm波長處進(jìn)行掃描[8],表面兩者在化學(xué)成分上有一定差異。結(jié)果見圖9、10及表2。

表1 紅車軸草與白車軸草理化鑒別結(jié)果Tab.1 The physical and chemistrical identification results of Trifolium prateen L.and Trifolium itpens L.

圖9 紅車軸草紫外圖譜Fig.9 Ultraviolet Spectrum of Trifolium prateen L.

圖10 白車軸草紫外圖譜Fig.10 Ultraviolet Spectrum of Trifolium itpens L.

2.5 揮發(fā)油含量

紅車軸草和白車軸草中揮發(fā)油均為淡黃色,含量均為0.1%。

2.6 兩種藥材主要鑒別特征比較

結(jié)果見表2。

表2 紅車軸草與白車軸草的主要鑒別特征Tab.2 The identification characteristics of Trifolium prateen L.and Trifolium itpens L.

3 小結(jié)

通過原植物形態(tài)、性狀、橫切面組織構(gòu)造、粉末特征及理化鑒別的研究,數(shù)碼照片真實、直觀地反映了兩種藥材在性狀、根和莖橫切面和粉末特征上有一定的差別。

紫外光譜反映出兩種車軸草在化學(xué)成分上的差異,通過對紅車軸草和白車軸草進(jìn)行的揮發(fā)油含量測定可以看出兩者揮發(fā)油含量都比較低。

[1]陳學(xué)福,史高峰.紅三葉異黃酮的研究進(jìn)展[J].中草藥,2006,37(2):309-312.

[2]索志新,斯建勇,沈連鋼,等.紅車軸草的化學(xué)成分研究[J].中草藥,2007,38(1):32-33.

[3]劉巖,劉順航,王平.紅車軸草的研究進(jìn)展[J].中草藥,2007,38(5):5-8.

[4]曾分有,周海燕,吳永堯,等.紅三葉草活性成分及其在保健食品和醫(yī)藥中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2007,7(3):449-465.

[5]詹慶豐,夏增華,白海云.白車軸草化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志,2005,30(4):311-312.

[6]吳彩霞,王倩嶸,羅君,等.SPME/GC/MS法分析白車軸草花揮發(fā)性化學(xué)成分[J].河南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2006,25(3):17-20.

[7]吳立軍.天然藥物化學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:178.

[8]袁久榮.中藥鑒定紫外譜線組法及應(yīng)用[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1999.

Pharmacognosy ofTrif olium PrateenL.andTrif olium ItpensL.

ZHU Yun,LI Peng
(College of Pharmacy,Shihezi University/Key Laboratory of Xinjiang Phytomedicine Resources of the State Ministry of Education,Shihezi 832002,China)

R965.2

A

1007-7383(2010)04-0487-05

2009-10-11

朱蕓(1979-),女,講師,從事生藥學(xué)與天然藥物化學(xué)的研究。

李鵬(1968-),男,副教授,從事天然藥物的研究。