室內(nèi)培育條件下青島文昌魚性腺的年周期發(fā)育

馬得友, 尤 鋒, 文愛韻, 譚訓(xùn)剛, 倪 靜, 李 靖, 徐永立, 張培軍

（1. 中國科學(xué)院 海洋研究所 中國科學(xué)院實(shí)驗(yàn)海洋生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 山東 青島 266071; 2. 中國科學(xué)院 研究生院, 北京 100049; 3. 青島市海洋與漁業(yè)局漁業(yè)技術(shù)推廣站, 山東 青島 266071）

室內(nèi)培育條件下青島文昌魚性腺的年周期發(fā)育

馬得友1,2, 尤 鋒1, 文愛韻1,2, 譚訓(xùn)剛1, 倪 靜1, 李 靖3, 徐永立1, 張培軍1

（1. 中國科學(xué)院 海洋研究所 中國科學(xué)院實(shí)驗(yàn)海洋生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 山東 青島 266071; 2. 中國科學(xué)院 研究生院, 北京 100049; 3. 青島市海洋與漁業(yè)局漁業(yè)技術(shù)推廣站, 山東 青島 266071）

青島文昌魚（Branchiostoma japonicus）采自于青島沙子口海區(qū), 在室內(nèi)進(jìn)行周年培育。每月采集樣品, 經(jīng)測量、固定以及組織切片觀察, 研究了其周年卵巢和精巢的發(fā)育規(guī)律。結(jié)果表明, 室內(nèi)培育的文昌魚一周年內(nèi)全長沒有明顯變化, 僅體質(zhì)量在繁殖期即其性腺發(fā)育至Ⅴ期時有明顯增大（P＜0.05＝,精卵排空后則恢復(fù)原來體質(zhì)量。文昌魚1 a內(nèi)在夏季6～7月繁殖1次, 能自行排放卵和精子, 排空后個體的卵巢或精巢, 在適宜的條件下, 經(jīng)歷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ期的發(fā)育過程, 進(jìn)行下一輪的性腺發(fā)育。文昌魚精巢在Ⅳ期前先于卵巢發(fā)育, 兩者在Ⅳ期前發(fā)育都不同步, 精巢處于Ⅳ期時間較長, 一般從 3月持續(xù)到5月, 而卵巢處于Ⅳ期一般是在4月～5月。

青島文昌魚（Branchiostoma japonicus ）; 室內(nèi)培育; 性腺發(fā)育; 年周期; 組織學(xué)

文昌魚（Branchiostoma）一般分布在熱帶、亞熱帶以至暖溫帶的 8～16 m 淺水海域中, 主要在北緯48°～南緯40°的環(huán)形地帶; 在中國秦皇島、青島、廈門和北海等海域均有發(fā)現(xiàn)。青島文昌魚（Branchiostoma japonicus ）隸屬脊索動物門（Chordata）、頭索動物亞門（Cephalochordata）、文昌魚科（Branchiostomidae）、文昌魚屬[1]。文昌魚被認(rèn)為是最接近脊椎動物直接祖先的現(xiàn)生動物, 是無脊椎動物進(jìn)化到脊椎動物的過渡型動物[2], 在脊椎動物起源與演化研究中占有極其重要的位置, 是研究動物系統(tǒng)發(fā)育的珍貴材料和模式動物[3～5]。此外, 文昌魚富含蛋白質(zhì)、氨基酸、不飽和脂肪酸[6]、碘、鐵和磷, 具有較高的營養(yǎng)價值[1]和商業(yè)價值, 深受人們喜愛[5]。但是近年來由于環(huán)境污染、過度捕撈等原因, 致使文昌魚的生存環(huán)境受到嚴(yán)重破壞, 其數(shù)量在世界各分布區(qū)都呈現(xiàn)下降趨勢[7～8]。中國文昌魚的數(shù)量也急劇減少, 1988年已經(jīng)被列為國家二級重點(diǎn)保護(hù)動物, 并在青島、廈門等地設(shè)立自然保護(hù)區(qū)。由于文昌魚的特殊進(jìn)化地位, 自從1774年P(guān)allas[5]在英國南部海岸首次發(fā)現(xiàn)文昌魚后, 各國學(xué)者對文昌魚的胚胎發(fā)育[9,10]、生理生化[11]、神經(jīng)系統(tǒng)[12,13]等方面開展了系統(tǒng)研究。特別是近年來, 隨著分子生物學(xué)技術(shù)興起, 文昌魚又被作為了研究脊椎動物及其組織器官系統(tǒng)發(fā)生、進(jìn)化發(fā)育生物學(xué)、比較功能基因組學(xué)和比較免疫學(xué)等研究的理想模式生物[4,14]。

隨著對文昌魚研究的深入及其保護(hù)需求的提高,國內(nèi)外學(xué)者陸續(xù)開展了其繁殖生物學(xué)及人工養(yǎng)殖研究。美國學(xué)者 Stokes[15]系統(tǒng)報道了野生佛羅里達(dá)文昌魚的親本營養(yǎng)、性腺指數(shù)的變化、產(chǎn)卵模式及條件。法國學(xué)者Fuentes等[16,17]跟蹤觀察了野生歐洲文昌魚的繁殖習(xí)性, 明確了歐洲文昌魚的繁殖時期,并對其室內(nèi)產(chǎn)卵條件進(jìn)行了初步探索, 優(yōu)化了誘導(dǎo)產(chǎn)卵的方法。日本學(xué)者Yamaguchi等[18]和Kubokawa等[19]也分別觀察了日本野生文昌魚的繁殖習(xí)性及其性腺發(fā)育規(guī)律, 后者還成功誘導(dǎo)其在室內(nèi)條件下產(chǎn)卵, Yasui等[20]則進(jìn)一步構(gòu)建了日本文昌魚室內(nèi)循環(huán)水培育系統(tǒng), 并繁育出子代文昌魚。在中國, 文昌魚的研究主要集中在青島和廈門文昌魚。其中對廈門文昌魚的繁殖生物學(xué)研究方面, 不僅明確了廈門野生文昌魚性腺發(fā)育年周期及內(nèi)分泌調(diào)控規(guī)律[8,21], 而且還探討了環(huán)境因素子如水溫、光周期、鹽度和pH等對文昌魚性腺發(fā)育和生殖細(xì)胞的影響[22～24], 目前已經(jīng)獲得廈門文昌魚全人工繁育F2代[25]。而對于青島文昌魚繁殖生物學(xué)的研究報道相對較少, 童第周教授[26]作為中國文昌魚胚胎學(xué)研究奠基人, 在20世紀(jì)50年代率先在中國突破了文昌魚室內(nèi)繁殖技術(shù)。吳賢漢等[27]和宋裕昌等[28]分別對野生青島文昌魚種群年齡結(jié)構(gòu)、生活史及卵巢發(fā)育年周期進(jìn)行了研究。張士璀等[29,30]觀察了實(shí)驗(yàn)室培育的青島文昌魚成體的產(chǎn)卵、排精及其受精卵早期發(fā)育情況, 吳賢漢等[31]學(xué)者又成功獲得室內(nèi)培育的文昌魚子二代, 但是對室內(nèi)培育條件下青島文昌魚精巢和卵巢年周期發(fā)育的研究幾乎未見報道。

作者通過組織切片和顯微觀察方法, 研究了室內(nèi)條件下青島文昌魚卵巢和精巢發(fā)育年周期過程,以期了解文昌魚性腺發(fā)育規(guī)律, 完善其性腺發(fā)育年周期的理論知識, 為人工調(diào)控文昌魚的生殖活動和實(shí)現(xiàn)全人工繁育提供基礎(chǔ)資料, 為文昌魚資源恢復(fù)保護(hù)和開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 文昌魚的培養(yǎng)

文昌魚于2008年9月取自青島市沙子口自然海區(qū),活體運(yùn)輸至培育室, 在容積為400 L的培育缸中培養(yǎng),缸內(nèi)鋪有經(jīng)篩選的海砂, 厚度為15～20 cm。采用自然光照, 缸內(nèi)連續(xù)充氣, 每天上午換水（鹽度為 35）1次,換水后投喂螺旋藻（Spirulina）和小球藻（Chlorella）, 每天上午和下午分別記錄培育海水的溫度。

1.1.2 樣品的采取和固定

2008年 9月～2009年 5月, 每月下旬隨機(jī)挑選10尾文昌魚, 在2009年6月中旬和下旬、7月上中下旬及8月上旬和下旬分別取10尾文昌魚。測量文昌魚的全長和體質(zhì)量, 然后將其置于Bouin’s液中固定, 24 h后轉(zhuǎn)入70%乙醇中長期保存。

1.2 性腺組織切片

分別取文昌魚軀干部, 經(jīng)梯度酒精脫水, 石蠟包埋, 使用LEICA RM2145切片機(jī)做連續(xù)組織切片,切片厚度為 5～7 μm, 切片分別展在載玻片上, 蘇木精-伊紅染色, 樹膠封片。在光學(xué)顯微鏡下觀察切片,卵巢和精巢樣品至少各觀察 3個樣品, 每個樣品至少觀察8個切片, 并用Nikon相機(jī)采集圖片。

2 結(jié)果

2.1 室內(nèi)條件下文昌魚的周年生長情況

在室內(nèi)條件下, 2008年9月～2009年8月培育文昌魚的水溫范圍是 14～26℃（圖 1）, 最低溫為 14℃,出現(xiàn)在2009年1月、2月; 最高溫為26℃, 出現(xiàn)在2009年8月。

圖1 室內(nèi)文昌魚培育池的海水溫度Fig.1 Seawater temperatures of indoor amphioxus culture tank

室內(nèi)培養(yǎng)的文昌魚生長年周期觀察結(jié)果見圖2。由圖2可知, 文昌魚雌、雄個體間的生長沒有明顯差別。其全長一周年內(nèi)也沒有明顯變化（P＞0.05）, 而體質(zhì)量則在繁殖期（6、7月）均有明顯的增大（P＜0.05）, 8月份即繁殖期后恢復(fù)原來體質(zhì)量。

圖2 室內(nèi)培育雌（上）、雄（下）文昌魚的周年生長Fig. 2 The annual growths of female （top） and male （bottom） amphioxus under indoor culture conditions

2.2 性腺組織學(xué)切片觀察

參照方永強(qiáng)等[21]對廈門文昌魚性腺發(fā)育年周期的報道, 并參考 Cowden[32]對矛形文昌魚（Branchiostoma caribaeum）卵母細(xì)胞的發(fā)育分期, 觀察2008年9月～2009年5月每月固定的文昌魚性腺組織切片, 以及2009年6月中旬和下旬、7月上中下旬及8月上旬和下旬固定的文昌魚性腺組織切片。卵巢和精巢的發(fā)育分述如下:

2.2.1 卵巢的發(fā)育

青島文昌魚的卵巢是由兩側(cè)按肌節(jié)對稱排列的卵囊組成, 卵囊多呈橢圓形, 左側(cè)平均有24.0±0.67個卵囊, 右側(cè)往往比左側(cè)多2個, 平均有25.9±0.57個。根據(jù)卵囊一周年的發(fā)育情況, 可以把室內(nèi)條件下青島文昌魚雌性個體卵巢的發(fā)育分 為6期（圖3）。

圖3 文昌魚卵巢發(fā)育年周期的組織學(xué)觀察Fig.3 The histological observation of annual development of amphioxus ovary

Ⅰ期: 卵囊中有很大的空隙, 卵圓形或橢圓形的卵原細(xì)胞被生殖被膜包裹, 周圍有許多色素細(xì)胞圍繞, 卵原細(xì)胞進(jìn)行旺盛增殖活動（圖3-1、圖3-2）。

Ⅱ期: 卵囊的空隙減小, 出現(xiàn)小生長期初級卵母細(xì)胞, 卵母細(xì)胞的體積明顯增大, 有些卵母細(xì)胞的核開始移向卵細(xì)胞的動物極一側(cè); 卵囊內(nèi)周圍的卵母細(xì)胞比中部的卵母細(xì)胞先進(jìn)行卵黃沉積（圖3-3、圖 3-4）。

Ⅲ期: 卵囊開始飽滿, 其內(nèi)出現(xiàn)大生長期早期和中期初級卵母細(xì)胞, 早期卵母細(xì)胞形狀多數(shù)為卵圓形, 胞質(zhì)中積累了較多的卵黃粒; 中期的卵母細(xì)胞中卵黃粒進(jìn)一步堆積, 核膜開始不清晰, 卵囊已經(jīng)較飽滿（圖3-5、圖3-6）。

Ⅳ期: 卵囊更加飽滿, 各卵囊發(fā)育開始同步; 前期卵母細(xì)胞已較少, 大量出現(xiàn)大生長期晚期的卵母細(xì)胞, 其內(nèi)充滿了卵黃粒（圖3-7～圖3-9）。

Ⅴ期: 卵囊內(nèi)已充滿成熟的卵母細(xì)胞, 由于卵細(xì)胞的之間相互擠壓, 卵囊呈不規(guī)則狀; 在胞質(zhì)邊緣可見有一圈透亮的皮質(zhì)泡, 這是成熟卵巢的典型特征（圖3-10、圖3-11）。

排卵后期: 產(chǎn)卵后, 卵囊體積迅速減小, 卵囊被膜破裂, 排卵后剩余卵細(xì)胞的卵黃開始融合分解,為下一輪的卵巢發(fā)育做準(zhǔn)備（圖3-12～圖3-15）。

2.2.2 文昌魚精巢的發(fā)育

青島文昌魚的精巢是由兩側(cè)按肌節(jié)對稱排列的精囊組成, 精囊呈橢圓形, 左側(cè)平均有 23.9個±0.74個精囊, 右側(cè)常常也比左側(cè)多 2個, 平均有 25.8個±0.63個。根據(jù)精囊一周年的發(fā)育情況, 可以把室內(nèi)條件下青島文昌魚雄性個體精巢的發(fā)育分為6期（圖4）:

Ⅰ期: 精囊狹長, 空隙很大, 僅有一層卵圓形的精原細(xì)胞, 并貼近由結(jié)締組織圍繞而成的生殖被膜（圖 4-1、圖 4-2）。

Ⅱ期: 精囊的體積明顯增大, 呈橢圓形, 空隙減小。此期以精原細(xì)胞的增殖為主要特征, 精原細(xì)胞的數(shù)量明顯增多（圖4-3、圖4-4）。

Ⅲ期: 精巢中出現(xiàn)初級精母細(xì)胞, 它是精巢中最大的細(xì)胞, 其核也很大, 位于細(xì)胞中央, 其中具有大的著色很深的核仁（圖4-5、圖4-6）。

Ⅳ期: 精囊中有大量的各級生精細(xì)胞、精細(xì)胞和少量的精子, 精囊比較飽滿, 由于同側(cè)精囊相互擠壓使其呈不規(guī)則形狀（圖4-7、圖4-8）。

Ⅴ期: 精囊中充滿了精細(xì)胞和精子, 兩側(cè)的精囊相互擠壓而使其呈多邊形。具有此期精巢的雄性文昌魚可以正常排精（圖4-9～圖4-11）。

排精后期: 排精后, 精囊萎縮, 其內(nèi)有未變態(tài)成精子的精細(xì)胞和未排出的精子, 這些精細(xì)胞和精子最終會被融解, 精巢將開始新一輪的發(fā)育（圖 4-12～圖 4-15）。

2.3 文昌魚性腺的年發(fā)育周期

根據(jù)室內(nèi)培養(yǎng)的青島文昌魚雄性和雌性性腺一周年發(fā)育的觀察, 發(fā)現(xiàn)當(dāng)年已經(jīng)排完卵和精子的文昌魚個體, 在適宜的培育條件下, 其性腺能夠經(jīng)歷Ⅰ～Ⅴ期的發(fā)育過程, 在次年 6～7月再次產(chǎn)卵排精,進(jìn)行性腺下一周期的發(fā)育。

如圖5所示, 9月、10月雌性文昌魚主要處于Ⅰ期卵巢發(fā)育時期（水溫為 20～23℃）; Ⅱ期卵巢發(fā)育時間往往較長, 從 11月出現(xiàn)～次年 1月（水溫為 14～16℃）, 在12月和次年1月約80%雌性個體的卵巢都發(fā)育至Ⅱ期; 而次年2月、3月則有約80%雌性個體的卵巢處于Ⅲ期（14～15℃）; 4月、5月雌性個體則全部發(fā)育到Ⅳ期（水溫為16～18℃）; 6月、7月為文昌魚的生殖期, 雌性個體的卵巢全部處于Ⅴ期（水溫為22～24℃）; 8月份排完卵后, 雌性個體的卵巢恢復(fù)至排卵后期（水溫為26℃）。

9月、10月雄性文昌魚主要處于Ⅰ期精巢（水溫為 20～23℃）, 處于此期個體的比例可以占到 75%,Ⅱ期精巢發(fā)育期的雄性個體主要出現(xiàn)于11月、12月（水溫為 15～16℃）, 次年 1月、2月雄性個體主要處于Ⅲ期精巢（水溫為 14℃）; Ⅳ期精巢發(fā)育時間較長,從次年3月出現(xiàn)至5月（水溫為15～18℃）, 其中4月、5月雄性個體的精巢全部處于Ⅳ期（水溫為16～18℃）; 6月、7月為文昌魚的生殖期（水溫為 22～24℃）, 雄性個體的精巢全部處于Ⅴ期; 8月份排完精后（水溫為26℃）, 雄性個體的精巢恢復(fù)至排精后期。

精巢一般在Ⅳ期前先于卵巢發(fā)育, 卵巢和精巢在Ⅳ期前發(fā)育都不同步; 而且雄性個體精巢處在Ⅳ期時間較長, 一般從3月持續(xù)到5月, 而雌性個體卵巢處于Ⅳ期的時間一般是在4～5月。

3 討論

作為最接近脊椎動物直接祖先的現(xiàn)生動物, 文昌魚在脊椎動物起源與進(jìn)化研究中占有極其重要的位置。在中國, 文昌魚的分布范圍很廣泛, 從秦皇島至北海都有報道。目前關(guān)于文昌魚系統(tǒng)分類的研究業(yè)已展開, 一般認(rèn)為廈門地區(qū)有兩種文昌魚, 一種是白氏文昌魚（Branchiostoma belcheri）, 另一種是與青島文昌魚相近的日本文昌魚（B．japonicus）[33]。王義權(quán)等[2]建議把青島等地的文昌魚種名 Branchiostomabelcheri tsingtauense訂正為B．japonicus, 而南方的文昌魚保留其原種名 B．belcheri。關(guān)于文昌魚的分類命名還需進(jìn)一步研究和探討。

根據(jù)作者對青島文昌魚性腺發(fā)育年周期的研究結(jié)果, 并對比方永強(qiáng)等[21]報道的廈門文昌魚性腺的周年發(fā)育情況, 二者在性腺發(fā)育方面存在很多差異:（1）青島文昌魚排精產(chǎn)卵后性腺并不消失, 而是排空的卵囊和精囊中再次經(jīng)歷Ⅰ～Ⅴ期的發(fā)育過程; 但廈門文昌魚排完精卵之后性腺消失, 爾后在Ⅰ期重新形成新的生殖圈; （2）6月、7月是青島文昌魚的繁殖季節(jié), 而廈門文昌魚的繁殖期持續(xù)時間較長, 從5月上旬～7月。當(dāng)然它們的性腺發(fā)育也有相似性, 如不同個體的卵巢在Ⅳ期之前發(fā)育是不同步的, 同一個體中部卵囊的發(fā)育早于頭部和尾端的卵囊; 同一個卵囊內(nèi)卵母細(xì)胞的發(fā)育在Ⅳ期之前也是不同步的,貼近被膜的卵母細(xì)胞先發(fā)育, 中間的卵母細(xì)胞后發(fā)育。這一點(diǎn)也與日本文昌魚的卵巢發(fā)育類似, 后者不同個體的卵巢發(fā)育亦是不同步的且有多種發(fā)育階段[19]。青島文昌魚同其他幾種文昌魚的性腺發(fā)育規(guī)律也有相同和不同之處, 室內(nèi)條件下歐洲文昌魚的成熟期最多有兩個月, 溫度從 19℃上升至 25℃就能刺激室內(nèi)培育的歐洲文昌魚（B．lanceolatum）性腺成熟[16], 青島文昌魚性腺也有兩個月（6月、7月）的成熟繁殖期, 其性腺成熟在室內(nèi)條件下的水溫是18～24℃。根據(jù)觀察, 室內(nèi)條件下, 青島文昌魚 1 a只有1次產(chǎn)卵排精, 而佛羅里達(dá)文昌魚（B．floridae）1 a能產(chǎn)兩次卵[15], 有很大比例的日本文昌魚1 a也能產(chǎn)兩次卵[18]。因此, 不同種或不同地理群體的文昌魚性腺發(fā)育有相同的方面也有明顯的區(qū)別。

圖5 室內(nèi)培育文昌魚卵巢（上）和精巢（下）的年周期發(fā)育Fig.5 The annual developmental cycles of amphioxus ovary （top） and testis （bottom） under indoor culture conditions

張士璀等[29]通過觀察室內(nèi)培育 1個多月的青島文昌魚活體, 發(fā)現(xiàn)8月份文昌魚的全部退化, 這與作者的解剖學(xué)觀察結(jié)果相同; 但是經(jīng)組織學(xué)切片觀察,作者發(fā)現(xiàn)其性腺并未消失, 而是性腺萎縮, 以致在解剖鏡下觀察不到卵圓形的生殖囊。有關(guān)青島文昌魚性腺發(fā)育年周期的研究, 僅見宋裕昌等[28]對野生青島文昌魚卵巢的報道, 其發(fā)育在繁殖期即Ⅴ期前都不同步, 在第一年的 12月就有卵黃生成晚期（Ⅳ）的卵母細(xì)胞, 在次年的6～7月才能達(dá)到成熟產(chǎn)卵。而作者研究結(jié)果略有不同, 室內(nèi)培育的文昌魚不論是雄性還是雌性個體的性腺則是在Ⅳ期前發(fā)育不同步。有關(guān)文昌魚性腺中卵囊或精囊個數(shù), 室內(nèi)培育的與宋裕昌等[29]報道的野生文昌魚類似, 在身體兩側(cè)是不相等的, 右側(cè)一般比左側(cè)多兩個: 室內(nèi)培育的文昌魚右側(cè)生殖囊為26個, 左側(cè)生殖囊為24個; 而野生文昌魚右側(cè)卵囊平均有27個, 左側(cè)卵囊平均有25個。作者還觀察了室內(nèi)條件下青島文昌魚精巢發(fā)育的周年變化規(guī)律, 發(fā)現(xiàn)不同雄性個體的精巢在Ⅳ期前發(fā)育也往往不同步。在室內(nèi)培育情況下, 文昌魚精巢和卵巢年周期的發(fā)育經(jīng)歷了水溫先下降后升高過程, 這一溫度的變化將有助于性腺的發(fā)育和成熟,但其與溫度的相關(guān)性還有待進(jìn)一步的探討。

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Received: Apr, 28, 2010

Key words:Branchiostoma japonicus; laboratory-reared; gonad development; annual period; histology

Abstract:Amphioxus, Branchiostoma japonicus is one of the most precious subjects in the study of animal phylogeny. In recent years, the number of amphioxus has drastically decreased owing to environment changes and over catching. Artificial breeding is needed to provide sufficient supply of amphioxus. Amphioxus was caught from Shazikou natural sea area in Qingdao, and cultivated in our lab for more than one year. The samples were collected and measured, and then fixed monthly. Histological structure of amphioxus gonads was observed under light microscope. From Sep. 2008 to Aug. 2009, there were nearly no change in total length of amphioxus under indoor condition. As to body weight, there were significant increases only in the reproduction period （i.e. phaseⅤphase of ovaries and testis）（P＜0.05）, and then dropped to the former weight after reproduction. Amphioxus breeds only one time each year from June to July in summer. The laboratory-reared amphioxus could release eggs and sperm spontaneously. Afterwards, their ovaries and testis went through phaseⅠ,Ⅱ,Ⅲ,ⅣandⅤunder suitable conditions, and the gonad proceeded to the next round of annual development. It was also found that development of ovaries as well as testis did not accord until phase Ⅳ, and testis usually entered phase Ⅳand stayed there for a longer time （from March to May） than ovaries （from April to May）.

（本文編輯:譚雪靜）

Annual gonad development of the laboratory-reared amphioxus （Branchiostoma japonicus ）

MA De-you1,2, YOU Feng1, WEN Ai-yun1,2, TAN Xun-gang1, NI Jing1, LI Jing3, XU Yong-li1, ZHANG Pei-jun1
（1. Key Laboratory of Experimental Marine Biology, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071, China; 2. Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China;3. Technical Extension Station, Ocean and Fishery Bureau of Fisheries of Qingdao, Qingdao 266071, China ）

Q418

A

1000-3096（2010）11-0006-08

2010-04-28;

2010-07-16

“863”高技術(shù)研究發(fā)展計劃項(xiàng)目（2008AA092602）

馬得友（1984-）, 男, 山東莒縣人, 主要從事文昌魚和雌核發(fā)育牙鲆性腺發(fā)育學(xué)研究, E-mail: mdy531@163.com; 尤鋒, 通信作者,電話: 0532-82898560, E-mail: youfeng@ms.qdio.ac.cn