玉簪抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

呂小滿，彭 芳，楊永壽，劉光明，肖培云

（大理學(xué)院藥學(xué)院，云南大理 671000）

玉簪抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

呂小滿，彭 芳，楊永壽，劉光明，肖培云*

（大理學(xué)院藥學(xué)院，云南大理 671000）

目的：觀察玉簪提取物的抗炎作用。方法：通過二甲苯致小鼠耳腫脹及冰醋酸致小鼠毛細(xì)血管擴(kuò)張法觀察玉簪提取物的抗炎作用。結(jié)果：研究表明6.6，13.2，26.4 g/kg玉簪提取物對二甲苯致小鼠耳腫脹抑制作用分別為4.5%、34.4%、52.0%，對冰醋酸引起毛細(xì)血管通透性抑制作用為6.0%、31.3%、54.6%。結(jié)論：玉簪提取物具有顯著的抗炎作用，有待進(jìn)一步開發(fā)利用。

玉簪提取物；耳腫脹；通透性；抗炎作用

玉簪Hosta plantaginea（Lam.）Ascher為百合科植物，“甘辛，寒，有毒”，全株均可入藥?；ㄈ胨幘哂欣麧?、調(diào)經(jīng)止帶之功效，根入藥可以清熱消腫、解毒止痛，葉能解毒消腫〔1-5〕。研究表明，玉簪化學(xué)成分主要以甾體皂苷為主，另外還有黃酮、生物堿、脂肪酸等〔6〕。本文采用玉簪花地上部位提取物進(jìn)行抗炎實(shí)驗(yàn)研究，以期為玉簪的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料和儀器

1.1 材料 氫化可的松（天津藥業(yè)焦作有限公司產(chǎn)，規(guī)格：20 mL，100 mg，批號：20090630）；阿司匹林（上海醫(yī)藥集團(tuán)有限公司信誼制藥總廠產(chǎn)，規(guī)格：25 mg，批號：20080508）；冰醋酸（合肥工業(yè)大學(xué)化學(xué)試劑廠產(chǎn)，分析純，批號：20000901）；二甲苯（天津市科密歐化學(xué)試劑公司產(chǎn)，分析純，批號：20060802）；玉簪藥材（2008年8月采集于大理云龍，經(jīng)大理學(xué)院生藥學(xué)教研室楊月娥老師鑒定）。

1.2 動物 Km種小鼠，體重（20±2）g，雌雄各30只，由重慶醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.3 儀器 TU1901雙光束紫外分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司產(chǎn)）。

2 方法

2.1 玉簪提取物制備 玉簪地上部分曬干，粉碎，過80目，70%乙醇中浸泡48 h，上清液用石油醚萃取，乙醇部分旋蒸，得浸膏，備用〔7〕。

2.2 對二甲苯所致小鼠耳腫脹的方法 小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分成空白對照組（N.S），阿司匹林組，氫化可的松組，玉簪提取物低、中、高實(shí)驗(yàn)組，每組10只。實(shí)驗(yàn)組灌胃玉簪乙醇粗體物（33，66，132 mg/mL），空白對照組灌胃同容量的生理鹽水，陽性對照組阿司匹林灌胃給藥（200 mg/kg），皮下注射氫化可的松溶液（50 mg/kg），1 次/d，連續(xù)7 d。末次給藥30min后，用移液器在小鼠右側(cè)耳殼均勻涂抹二甲苯各10μL，左側(cè)耳殼作對照，1 h后處死小鼠，以直徑為8mm打孔器將小鼠雙耳同部位等面積切下，電子天平稱重，以右耳重量減去左耳重量的差值為腫脹值。以兩耳片的重量之差作為腫脹度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，并計(jì)算腫脹抑制率〔8〕。

腫脹抑制率=（空白對照組-藥物處理組）/空白對照組×100%

2.3 對毛細(xì)血管通透性影響的方法 小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分成空白對照組，阿司匹林組，氫化可的松組，玉簪提取物低、中、高實(shí)驗(yàn)組，每組10只。實(shí)驗(yàn)組灌胃玉簪乙醇粗體物（33，66，132 mg/mL），空白對照組灌胃給同容量的生理鹽水，陽性對照組阿司匹林灌胃給藥（200mg/kg），皮下注射氫化可的松溶液（50mg/kg），1 次/d，連續(xù)7 d。末次給藥1 h后，每只腹腔注射0.6%醋酸0.1 mL/10 g及尾靜脈1%注射伊文思藍(lán)0.1mL/10 g，30min后處死，剪開腹腔，用5mL蒸餾水沖洗腹腔數(shù)次，取出洗液，離心1 000 r/min，取上清液于紫外可見分光光度計(jì)590 nm處測OD值〔9-11〕。

2.4 統(tǒng)計(jì)方法 所有結(jié)果均采用SPSS11.5軟件進(jìn)行方差分析，結(jié)果用x±s表示。

3 結(jié)果

3.1 對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響 低劑量玉簪提取物對二甲苯所致小鼠耳腫脹幾乎沒有抑制作用，抑制率僅為4.5%；中、高劑量組則具有顯著的抑制作用，抑制率分別達(dá)到34.4%及52.0%，與空白對照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且具有劑量依賴性。見表1。3.2 對毛細(xì)血管通透性的影響 玉簪提取物高劑量組具有顯著的抑制冰醋酸致小鼠毛細(xì)血管擴(kuò)張作用，抑制作用為54.6%，中、低劑量組抑制作用較小，分別為31.3%、6.0%，但抑制作用具有劑量依賴性。見表2。

表1 受試物對小鼠耳腫脹度的影響（±s，n=10）

表1 受試物對小鼠耳腫脹度的影響（±s，n=10）

注：**與N.S組比較，P＜0.01；*與N.S組比較，P＜0.05。

組別N.S玉簪提取物阿司匹林氫化可的松劑量（g/kg）—6.6 13.2 26.4 0.2 0.05腫脹（mg/20 g）8.93±1.51 3.98±0.76 2.63±0.53*8.53±2.23**5.86±1.89**4.29±1.32**抑制率/%—4.5 34.4 52.0 55.1 70.5

表2 受試物對小鼠腹腔膜通透性影響

4 討論

炎癥是機(jī)體組織對局部損傷的反應(yīng)。在炎癥的早期，炎癥介質(zhì)刺激血管，使血管擴(kuò)張，血管內(nèi)皮間隙擴(kuò)大，血管壁通透性增加，血漿內(nèi)的液體、蛋白質(zhì)和白細(xì)胞等滲出到組織間隙，隨著滲出的增加，造成組織腫脹〔9〕。因此，炎性滲出、組織腫脹是炎癥早期的重要指標(biāo)。

二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)和醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)是研究藥物抗炎作用的常用實(shí)驗(yàn)方法，二甲苯可引起耳廓急性炎癥水腫，醋酸可引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加〔11〕。經(jīng)兩種炎癥模型的藥效學(xué)研究表明，玉簪提取物能明顯減輕二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹，顯著抑制冰醋酸所致的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高，說明玉簪提取物對炎癥早期血管通透性增高和水腫有明顯的抑制作用。這些研究為玉簪清熱解毒的功效提供了藥理學(xué)依據(jù)，其抗炎機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

感謝甘平、陸麗、胡艷芬、郝芳芳、普小菲、梁程和鄧?yán)锔咴趯?shí)驗(yàn)中給予的協(xié)助！

〔1〕解紅霞，張金花，張宏桂，等.蒙藥玉簪花的化學(xué)成分研究〔J〕.中國藥學(xué)雜志，2009，44（10）：733-735.

〔2〕Jaromir B.Kaempferol glycosides from Hosta ventricosa〔J〕.Phytochemistry，1990，29（11）：3643-3647.

〔3〕Yoshihiro M，Toshihiro K，Minpei K，et al.Steroidal saponins from the underground part of Hosta longipes and their inhibitory activity on tumor promoter-induced phospholipidmetabolism〔J〕.Phytochemistry，1995，43（7）：1190-1196.

〔4〕WangYH，ZhangZK，YangFM，etal.Benzylphenethylamine alkaloids from Hosta plantaginea with inhibitory activity against tobaccomosaic virus and acetylcholinesterase〔J〕.J Nat Prod，2007，70：1458-1461.

〔5〕解紅霞，薛培鳳，張宏桂，等.可見分光光度法測定玉簪花中總皂苷的含量〔J〕.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，32（9）：624-625.

〔6〕《中草藥學(xué)》編寫組.中草藥學(xué)：下冊〔M〕.南京：江蘇人民出版社，1980：1306.

〔7〕鄭虎占，董澤宏，余靖.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用〔M〕.北京：學(xué)苑出版社，1997：1055-1073.

〔8〕徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：905.

〔9〕李瑩，秦獻(xiàn)輝，李旭東，等.復(fù)方魚腥草膠囊抗炎作用及機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.沈陽藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，9（21）：5.

〔10〕喬慧軍，趙興濤，彭芳.紫紅獐牙菜抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，4（5）：30-40.

〔11〕張松.白龍須抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2009，20（9）：2334.

（責(zé)任編輯 蔣 康）

An Experimental Study of the Anti-inflammatory Effects of Hosta plantaginea（Lam.）Ascher

LU Xiaoman,PENG Fang,YANG Yongshou,LIU Guangming,XIAO Peiyun*
（College of Pharmacy,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:To observe anti-inflammatory effects of extracts fromHostaplantaginea（Lam.） Ascher.Methods:Using the test of Kunmingmouse ear swelling induced by dimethylbenzene and the test of capillary permeability induced by acetic acid,antiinflammatory effects of the extracts fromHostaplantagineawere evaluated.Results:Ear swelling and capillary permeability induced respectively by dimethylbenzene and acetic acid were inhibited by the effects of extracts fromHostaplantaginea.With doses of 6.6,13.2,and 26.4 g/kg,ear swelling inhibition ratios were respectively 4.5%,34.4%and 52.0%,and capillary permeability inhibition ratioswere 6.0%,31.3%and 54.6%.ConclusionExtracts fromHostaplantagineahad significantanti-inflammatory effects.

extracts fromHostaplantaginea;ear swelling;capillary permeability;anti-inflammatory effects

Q949.71+8.23

A

1672-2345（2010）12-0015-03

云南省教育廳基金資助項(xiàng)目（5Y0361C）

2010-03-02

呂小滿，主要從事腫瘤藥理研究.

*通信作者：肖培云，副教授，電話：15808729786.