禽白血病病毒特性及其致病機(jī)理的研究進(jìn)展

李建麗，尤永君

（瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司，河北保定 300380）

瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司

2009年6月份以來，在我國養(yǎng)殖密集的省市地區(qū)的雞群中發(fā)生了一定比例的疑似禽白血病血管瘤，主要臨床癥狀表現(xiàn)為，出現(xiàn)雞爪、皮膚出血，并且流血不止直到死亡，剖檢可見大肝大脾，每天死亡率在1‰～3‰。從30日齡到300日齡雞均能見到該發(fā)病癥狀，多集中于120～180日齡。此病在我國東北、河北、河南、山東、湖北、安徽等地均有發(fā)生，以大面積散發(fā)為主。該病無特效藥物治療，也無疫苗使用，對2009年的蛋雞業(yè)帶來了一定的沖擊和危害。下面就禽白血病病毒（ALV）的特征及免疫機(jī)制作一綜述，以期對ALV的致病機(jī)制、診斷和檢疫凈化提供參考。

禽白血病(Avian leucosis)是由反轉(zhuǎn)錄病毒科(Retroviridae) 禽白血病/肉瘤病毒群病毒(Avian leukosis/sarcoma virus)引起的以造血細(xì)胞惡性增生為主的多種腫瘤性疾病的總稱。根據(jù)臨床癥狀可分為淋巴細(xì)胞性白血病(Lymphoid Leukosis，LL)、成紅細(xì)胞性白血(Erythroblatosis)、成髓細(xì)胞白血病(Myeloblastosis)、髓細(xì)胞樣白(Myelocytomatosis)、結(jié)締組織性腫瘤(Connective Tissue Tumors)、骨硬化病(Osteopetmsis)等。其中，禽淋巴細(xì)胞性白血病對養(yǎng)禽業(yè)危害最大。該病毒既可水平傳播，也可垂直傳播，但以垂直傳播為主，且存在內(nèi)源性病毒。自1908年首次報(bào)道ALV以來，已在世界上許多國家流行和發(fā)生，給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

一、ALV的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

禽白血病病毒具有典型的反轉(zhuǎn)錄病毒科C型腫瘤病毒的共同特征，病毒粒子近似球形，有囊膜，其上有放射狀突起。ALV對熱、脂溶性、去污劑和甲醛敏感，但對紫外線有相當(dāng)強(qiáng)的抵抗力。

ALV為RNA病毒，其基因組是單股、正鏈、線性RNA 的二聚體。病毒粒子中的RNA不具有感染性，但其基因組的RNA可與來源于宿主的特異性tRNA 相連，成為ALV反轉(zhuǎn)錄過程的引物，這是ALV的重要特征之一。ALV基因組編碼兩個(gè)重要蛋白，即gp85和p27，其中g(shù)p 85為外膜蛋白，負(fù)責(zé)識別靶細(xì)胞膜上的特異性病毒受體，且能刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，具有亞群特異性，是ALV亞群分類的主要依據(jù)；p27為主要的群特異性抗原，在ALV的診斷方面具有重要的生物學(xué)意義。

二、ALV的分類特征

根據(jù)自然傳播方式，可將ALV分為外源性和內(nèi)源性病毒，兩種病毒的主要差別在于LTR 區(qū)的序列不同。外源性病毒是以傳染性病毒粒子形式存在，既能經(jīng)蛋垂直傳播也能水平傳播。內(nèi)源性病毒是指整合于宿主細(xì)胞染色體中的完整或缺失的前病毒DNA序列。內(nèi)源性病毒一般不以病毒粒子的形式存在，只作為雞基因組的一部分進(jìn)行代次間傳遞，具有很低或沒有致瘤性，但內(nèi)源性病毒具有某些生物功能：①保護(hù)效應(yīng)：某些感染內(nèi)源性病毒的細(xì)胞，對相應(yīng)外源性病毒的感染不敏感，這可能是由于內(nèi)源性病毒表達(dá)的蛋白(如env)干擾外源性病毒和細(xì)胞受體結(jié)合，而引起免疫耐受，使免疫系統(tǒng)不能識別感染細(xì)胞，弱化了免疫病理過程；②病理效應(yīng)：雞在胚胎期感染內(nèi)源性病毒，則特異性體液免疫受到抑制，若繼發(fā)感染外源性ALV，則會誘發(fā)強(qiáng)烈的持續(xù)性病毒血癥，產(chǎn)生嚴(yán)重的腫瘤；③可能影響蛋雞的生產(chǎn)性能。這可能與內(nèi)源病毒ev21的存在有直接關(guān)系，因此，利用分子育種技術(shù)，選育抗ALV品系的雞，也是降低ALV陽性率，凈化雞群中白血病的另一重要途徑。

三、ALV的亞群特征

根據(jù)病毒囊膜糖蛋白抗原結(jié)構(gòu)、各個(gè)病毒之間的干擾模式及在不同遺傳型雞胚成纖維細(xì)胞上的宿主范圍的差異，將病毒分為A-J10個(gè)亞群，其中 A、B、C、D、E和J亞群見于雞; F和G亞群僅分離自雉體內(nèi)；H和I亞群為僅分離自匈牙利的鷓鴣和鵪鶉的內(nèi)源性病毒；A、B和J亞群為發(fā)生于田間的外源性病毒，而C、D亞群很少發(fā)生于田間，E亞群為極普遍存在的內(nèi)源性ALV，也就是說，A、B和J亞群是危害雞群的ALV主要亞群。不同亞群的ALV對不同宿主的易感性也有差異，這種差異主要由靶細(xì)胞膜上的病毒特異性受體決定。

J亞群不同于其他亞群，具有自身特異性。J亞群是其他外源性ALV與內(nèi)源性病毒重組的產(chǎn)物，具有更快更強(qiáng)的水平和垂直傳播能力；J亞群病毒的天然靶細(xì)胞不是經(jīng)典型ALV所喜好的法氏囊B淋巴細(xì)胞，而是骨髓細(xì)胞，可引起骨髓干細(xì)胞不斷增生惡變，造成成年雞骨髓細(xì)胞瘤；和免疫耐受。Payne等于1989年首次從肉雞群中分離到J亞群禽白血病病毒(ALV-J)；徐鑌蕊等首次從中國某省的蛋雞群中發(fā)現(xiàn)J亞群禽白血病?，F(xiàn)已在山東、江蘇、河南、寧夏、內(nèi)蒙、吉林、黑龍江等省市分離到了多個(gè)ALV-J亞群流行株。因此，加大J亞群ALV的流行病學(xué)及診斷方法的研究，以便更好的檢測和淘汰陽性雞群，促進(jìn)我國養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。

四、ALV的致病機(jī)制

ALV多為隱性感染，在大多數(shù)情況下不會對細(xì)胞造成損害，但某些情況下或某些種類的ALV感染會導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化、引起細(xì)胞病變，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生，誘發(fā)機(jī)體的免疫抑制。

（一）ALV轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞的能力根據(jù)ALV轉(zhuǎn)化細(xì)胞的快慢，可將ALV分為急性轉(zhuǎn)化型和慢性轉(zhuǎn)化型，但二者轉(zhuǎn)化細(xì)胞的機(jī)制不同，進(jìn)一步研究表明，長末端序列(long terminal repeats，LTR)的差異和特異性的LTR 結(jié)合蛋白決定轉(zhuǎn)化細(xì)胞的類型。

急性轉(zhuǎn)化型ALV可能在長期的進(jìn)化過程中通過遺傳重組從正常細(xì)胞獲得不受正常調(diào)控的過程控制，其異常表達(dá)產(chǎn)物使細(xì)胞生長和分化發(fā)生變化而產(chǎn)生腫瘤，并引起惡性轉(zhuǎn)化的能力。慢性轉(zhuǎn)化型ALV不攜帶病毒性腫瘤基因，所誘導(dǎo)的腫瘤形成較晚。其主要機(jī)制是將前病毒DNA整合入宿主細(xì)胞的基因組中，通過ALV的LTR啟動子或增強(qiáng)子激活細(xì)胞原癌基因或前病毒插入宿主細(xì)胞基因組中的原癌基因的上游或下游或中間，使抑癌基因失活，從而導(dǎo)致細(xì)胞腫瘤基因的異常表達(dá)而形成腫瘤。

（二）ALV引起免疫抑制法氏囊B淋巴細(xì)胞是經(jīng)典型ALV的天然靶細(xì)胞。ALV感染后，可使B淋巴細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化，而轉(zhuǎn)化的B淋巴細(xì)胞失去了產(chǎn)生IgG的能力，從而引起免疫抑制。J-ALV有其獨(dú)特的機(jī)制。髓細(xì)胞是J-ALV所侵染的對象，正常的骨髓干細(xì)胞在J-ALV作用下，不斷增生惡變，形成骨髓瘤；淋巴器官及骨髓變性，導(dǎo)致功能性IL-2的合成受到干擾，影響到T、B淋巴細(xì)胞的成熟及分化，從而導(dǎo)致了免疫抑制。另外，病理組織學(xué)動態(tài)觀察表明，ALV-J主要引起骨髓的髓系細(xì)胞灶狀或彌漫性增生，導(dǎo)致骨髓機(jī)能受損，引起機(jī)體免疫機(jī)能下降，這是引起免疫抑制的根本原因。

（三）ALV與免疫抑制因子的共感染最近發(fā)現(xiàn)，ALV能與其他免疫抑制性病毒發(fā)生共感染，且發(fā)生率在增加。禽類的免疫抑制因子主要包括IBDV、CIAV、ARV、REV和霉菌毒素等，這些免疫抑制因子能抑制雞群抵抗ALV-J侵襲的免疫反應(yīng)能力。加之，ALV能與這些免疫抑制因子發(fā)生二重或多重感染，這種共感染會引起免疫抑制作用的疊加效應(yīng)，形成惡性循環(huán)，從而導(dǎo)致雞群更高腫瘤發(fā)生率和較差的生產(chǎn)性能。

五、結(jié)語

目前，沒有合適的疫苗和藥物來預(yù)防和控制ALV的發(fā)生和流行，主要通過檢疫凈化、淘汰陽性雞，建立無ALV的種禽群。目前，雙抗體夾心ELISA，能較快速、大規(guī)模地檢測蛋清、泄殖腔拭子中的ALV，已在ALV實(shí)驗(yàn)室診斷和雞群的檢疫凈化等方面得到廣泛應(yīng)用。PCR技術(shù)具有更靈敏、特異，且能區(qū)分亞群的特點(diǎn)，但儀器昂貴，專業(yè)性強(qiáng)，不適合現(xiàn)場快速診斷，因此，研制靈敏、特異且適合現(xiàn)場快速診斷的方法將是今后的研發(fā)方向。另外，選育抗ALV的品系也將是今后的工作重點(diǎn)之一。