三酰甘油(TG)測定結(jié)果失真分析

于志堅 張增光 屈瑋瑋

血清三酰甘油(TG)是一項重要的臨床血脂測定指標。TG不僅對動脈粥樣硬化(AS)和冠心病(CHD)的防治具有重要意義，而且已經(jīng)滲透并應(yīng)用于其他諸多臨床相關(guān)專業(yè)疾病的研究，如高血壓、糖尿病等。測定方法為甘油磷酸氧化酶終點法。在工作中，經(jīng)常遇到目測血清很清而測得結(jié)果明顯偏高及重度脂血的標本出現(xiàn)升高不明顯的情況，經(jīng)重新測定結(jié)果良好?，F(xiàn)選11列結(jié)果報告如下。

1 材料和方法

1.1 標本來源來源于門診和住院患者的標本。

1.2 儀器和試劑南京D-360全自動生化分析儀試劑為北京科美生物技術(shù)有限公司提供的甘油磷酸氧化酶終點法液體單試劑。

1.3 方法做好儀器每天的維護及保養(yǎng)，使儀器處于最佳狀態(tài)，要嚴格按照儀器的操作規(guī)程進行操作，作好室內(nèi)質(zhì)控。對TG明顯異常與目測相差很大的、反應(yīng)曲線異常的標本及嚴重脂血(用生理鹽水按照1：5的比例稀釋后)再重新測定。

2 結(jié)果

見表1。

表1 (mmol/L)

3 討論

3.1 測定TG為甘油磷酸氧化酶終點法 此法的原理是trinder反應(yīng)(被測物通過酶作用產(chǎn)生的過氧化氫，在4-氨基安替比林、過氧化物酶的存在下，可生成紅色醌亞胺化合物)。催化trinder反應(yīng)的過氧化物酶對底物專一性差，維生素C、尿酸、谷胱甘肽及膽紅素等還原性物質(zhì)也與色原性物質(zhì)競爭過氧化氫，從而使氧化過程中產(chǎn)生的過氧化氫被消耗，導(dǎo)致色素形成減少，測定結(jié)果偏低，此外，工具酶中如果夾雜有較多過氧化氫酶，也能消耗氧化產(chǎn)物過氧化氫，使被測物的測定值偏低，造成TG測定的負干擾。臨床上關(guān)于TG測定負干擾這方面的研究和報道不少。我院應(yīng)用D-360測定TG時，時有目測血清很清但測定值偏高的現(xiàn)象，如上表所列。TG高于3.33 mmol/L時才出現(xiàn)肉眼渾濁，有些標本肉眼觀不渾濁，但測定值卻遠高于此值，這說明存在TG測定的正干擾。分析原因：1、分析儀使用同一根試劑針吸取試劑，雖然分析儀有清洗系統(tǒng)，但試劑針很難通過一次短暫快速的清洗程序就清洗干凈，一個項目對隨后的一個項目甚至幾個項目都會帶來一定程度的試劑污染，并且隨著儀器使用時間的增加，試劑交叉污染程度會有所加劇。試劑間的交叉污染原因是多方面的，主要有三個：第一，試劑成分中含有某種被污染的項目;第二，試劑中含有下一個測試所要測定底物或含有的某種試劑成分，與下一反應(yīng)所測定的底物有作用，因而直接影響下一反應(yīng)測定的結(jié)果;第三，該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)給下一個項目反應(yīng)進程帶來了間接干擾。用全自動生化分析儀隨機組合檢測項目時，原則是將具有相同反應(yīng)原理的項目放在一起 ，相同酸堿度反應(yīng)的項目放在一起，試劑內(nèi)含相同被測成分的和該項目相隔兩個項目位置以上，易污染項目測定前吸樣針設(shè)置清洗2次以上等。因此要想獲得正確可靠結(jié)果，不但需要熟練掌握儀器原理、性能操作 ，而且需要掌握反應(yīng)原理 ，試劑組成等方面知識［1］。2、酶法測定血清TG時，當 Hb＜1 g/L時反映為負干擾;＞1 g/L時反映出正干擾，但Hb≤2 g/L時干擾不顯著，明顯溶血標本不宜作為TG測定。3、儀器自身缺陷，據(jù)工程師介紹D-360全自動生化分析儀有這方面缺陷，偶爾出現(xiàn)重復(fù)性差，結(jié)果明顯異常，避免辦法就是結(jié)合標本及臨床必要時再行復(fù)查。4、標本處于半凝固狀態(tài)，導(dǎo)致加樣不準確，標本一定要用血清。

3.2 血清FG(游離甘油)對TG測定結(jié)果的影響一直是臨床十分關(guān)注的問題。我國正常人血清FG水平平均約為0.08 mmol/L，約占總TG7.19%。雖然臨床標本中FG顯著升高者很少見，但有些異?；虿±砬闆r下如應(yīng)激反應(yīng)(腎上腺素激活LPL促進體內(nèi)脂肪水解)，劇烈運動，服用含甘油的藥物如硝酸甘油，靜脈輸入含甘油的營養(yǎng)液，肝素治療，某些嚴重的糖尿病、肝病與腎病，取血器材或試管塞上帶有甘油等時，可見血清FG顯著升高，并給臨床決策帶來誤導(dǎo)［2］。

3.3 近年來糖尿病血脂代謝紊亂，家族性高血脂患者不斷增加，高血脂癥患者越來越多。日常標本中甘油三脂(TG)在10～20 mmol/L屢見不鮮，血清似奶油狀無法報告結(jié)果。另一方面臨床上患者靜脈注射脂肪乳也出現(xiàn)同樣的情況。11號標本就是高度脂血。由于脂血中大量的乳糜微粒對人射光產(chǎn)生散射，使生化分析儀不能準確測定吸光度的變化，從而使測定結(jié)果失真。用生理鹽水稀釋后可以消除乳糜微粒對人射光產(chǎn)生的散射，從而消除脂濁對測定的干擾。對于重度脂血標本除了用生理鹽水稀釋外，還可以通過高速離心(5000/min)后取脂肪層下面的下清液進行測定其結(jié)果與用生理鹽水稀釋后測定的結(jié)果非常相近［3］。

3.4 在正常工作中由于標本量大，有些異常結(jié)果易被忽視，所以要加強工作責(zé)任心，對異常結(jié)果要密切注意，查找原因。除了要密切注意當天儀器的工作狀況，當天的質(zhì)控狀況外，還要密切注意異常結(jié)果的反應(yīng)曲線，特別注意少數(shù)偏離常規(guī)的特殊異常，結(jié)合臨床結(jié)合標本必要時及時復(fù)檢，為臨床提供科學(xué)的診斷依據(jù)。

［1］于雷.生化自動分析儀項間的交叉污染及其避免方法.臨床檢驗雜志，2003，21(3)：168.

［2］康格非.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗.人民衛(wèi)生出版社，1998：59-160.

［3］石凌波.利用高速離心消除脂血對生化測定的干擾.檢驗醫(yī)學(xué)，2004，19(2)：138-140.