不同劑量蔗果低聚糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)的研究

杭 鋒，伍劍鋒，龔廣予，王蔭榆，*

（1.光明乳業(yè)股份有限公司技術中心，上海200072；2.江門量子高科生物工程有限公司，廣東江門529080）

不同劑量蔗果低聚糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)的研究

杭 鋒1，伍劍鋒2，龔廣予1，王蔭榆1，*

（1.光明乳業(yè)股份有限公司技術中心，上海200072；2.江門量子高科生物工程有限公司，廣東江門529080）

為了研究蔗果低聚糖對機體免疫調(diào)節(jié)的效果，將192只體重為20±2g的清潔級昆明種雌性小鼠，分為4批進行實驗，每批隨機平均分為4組，每組12只。每批分成空白對照組和低、中、高4個劑量組，劑量分別為0、0.69、1.38、4.15g/kg·bw，于給藥后33d，分別進行小鼠淋巴細胞轉化實驗、遲發(fā)型變態(tài)反應、抗體生成細胞含量實驗、半數(shù)溶血值、臟器/體重、碳廓清能力、巨噬細胞吞噬實驗及NK細胞活性實驗。結果表明，高劑量組對小鼠淋巴細胞增殖能力、碳廓清能力、巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬指數(shù)具有極顯著促進作用（P＜0.01），對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率（P＜0.05）顯著提高；中、高劑量組與對照組相比顯著小鼠抗體生成細胞數(shù)（P＜0.05）。因此，蔗果低聚糖對小鼠免疫力具有增強作用。

蔗果低聚糖，免疫調(diào)節(jié)

Abstract：The immunomodulatory effects of fructooligosaccharides（FOS）on mouse were explored.One hundred and ninety-two mice，weight in the range of 18～22g，were divided into four treatment groups and fed at four dose.The dose were 0，0.69，1.38，4.15g/kg·bw，respectively.The transformation of spleen lyphmocytes，delayed type hypersensitivity（DTH）model induced by ConA，plaque-forming cell（PFC），erythrocytolysin，the thymus and spleen index，the phagocytsis index and phagocytsis percent for CRBC of macrophage and NK cell activities were investigated.The results showed that the high dosage of FOS significantly enhanced the transformation of spleen lyphmocytes，carbon particle clearance and the phagocytsis index of macrophage for CRBC（P ＜ 0.01），while promoted the phagocytsis percent for CRBC of macrophage（P ＜ 0.05）.The medium and high dosage of FOS promoted the number of plaque-forming cells.It was concluded that the immunomodulative effects of FOS especially depended on the dosage.

Key words：fructooligosaccharides；immunomodulatory effects

低聚果糖（Fructooligosaccharides，F(xiàn)OS）根據(jù)生產(chǎn)方法及原料的不同可分為蔗果低聚糖和果低聚糖，前者是以蔗糖為原料的產(chǎn)品，后者是以菊芋、菊苣等植物根莖為原料的產(chǎn)品。工業(yè)化低聚果糖是蔗果三糖（GF2）、蔗果四糖（GF3）和蔗果五糖（GF4）等的混合物，但其中蔗果六糖含量不得超過FOS總含量的5%［1］。低聚果糖作為一種益生元，能直達結腸并被腸道細菌利用，刺激雙歧桿菌的生長，同時生成大量的短鏈脂肪酸（Short-Chain Fatty Acids，SCFA），該特性可能與其免疫功能相關［2-4］。機體的免疫功能又可分為非特異性免疫和特異性免疫兩種，其中特異性免疫兩種又分為體液免疫和細胞免疫。目前，低聚果糖機體免疫調(diào)節(jié)作用的研究主要集中于腸道方面。腸道粘膜是免疫系統(tǒng)的第一道屏障，粘膜上定植的腸道菌群則是維護腸道免疫功能的重要物質，低聚果糖通過促進雙歧桿菌增殖來調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡，誘導腸粘膜淋巴系統(tǒng)的免疫活性，以及激活體液免疫和細胞免疫等多種方式，從局部或整體調(diào)節(jié)機體免疫功能。腸道局部免疫系統(tǒng)，又稱腸道相關淋巴組織（Gut Associated Lymphoid Tissue，GALT），在防止細菌粘附及細菌易位方面具有重要作用。Hosono等進行的小鼠實驗表明，低聚果糖能通過改變腸道微生態(tài)環(huán)境而促進腸粘膜的CD4+PP淋巴細胞亞群分泌IgA和白細胞介素IL-5、IL-6，并抑制Th2控制的免疫應答［5］。Nakamura等用低聚果糖喂食幼鼠，亦發(fā)現(xiàn)其能增加腸粘膜上IgA的分泌和pIgR的表達［6］。Guigoz等觀察發(fā)現(xiàn)，老年人攝入低聚果糖后，糞便中雙歧桿菌數(shù)較攝入前增加了100倍，且腸易激現(xiàn)象亦通過血液中IL-6mRNA的減少而明顯減少［7］。Manhart等研究結果表明，低聚果糖通過增加PP淋巴細胞的分泌，不僅在大腸而且在小腸部位均能激活或誘導粘膜免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)作用［8］。本文選擇小鼠模型，通過試食實驗從細胞免疫、體液免疫及非特異性免疫3個方面，進一步研究和全面評價蔗果低聚糖對其機體免疫調(diào)節(jié)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

OLIGOTM蔗果低聚糖60L 由江門量子高科生物工程有限公司提供，常溫、陰涼干燥處保存，保存期12個月，供實驗用；綿羊紅細胞（SRBC）、YAC-1細胞、雞紅細胞 北京聯(lián)合大學應用文理學院保健食品功能檢測中心；RPMI 1640培養(yǎng)液 美國CellGro公司；都氏試劑 NaHCO31.0g/L，K3［Fe（CN）6］0.2g/L，KCN 0.05g/L；SA 緩沖液 10mmol/L 醋酸鈉，pH5.0；小牛血清 長春西諾生物科技有限公司；MTT 美國Promega公司；豚鼠血清 上海麥莎生物科技有限公司；ConA、吩嗪二甲酯硫酸鹽、氧化型輔酶I 美國Sigma公司；乳酸脫氫酶 北京普利萊基因公司；印度墨汁 上海麥莎生物科技有限公司；Giemsa染液

德國AppliChem公司；其他為常規(guī)試劑。

BIO-RAD 680型酶標儀 美國Bio-Rad公司；HERAcell 240型CO2培養(yǎng)箱 德國Heraeus公司；TW 20恒溫水浴鍋 德國Julabo公司；BX61顯微鏡

日本Olympus公司；DMI 3000-3N/PH倒置顯微鏡德國Leica公司。

1.2 實驗方法

《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）規(guī)定［9］：在細胞免疫功能、體液免疫功能、單核——巨噬細胞功能、NK細胞活性4個方面任2個方面結果陽性，可判定該受試樣品具有增強免疫力功能作用。其中細胞免疫功能測定項目中的2個實驗結果均為陽性或任1個實驗的2個劑量組結果陽性，可判定細胞免疫功能測定結果陽性。體液免疫功能測定項目中的2個實驗結果均為陽性或任1個實驗的2個劑量組結果陽性，可判定體液免疫功能測定結果陽性。單核——巨噬細胞功能測定項目中的2個實驗結果均為陽性或任1個實驗的2個劑量組結果陽性，可判定單核——巨噬細胞功能結果陽性。NK細胞活性測定實驗的1個以上劑量組結果陽性，可判定NK細胞活性結果陽性。因此，選取評價細胞免疫功能中的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應、淋巴細胞轉化實驗；體液免疫功能中的抗體生成細胞含量實驗、半數(shù)溶血值；以及非特異免疫功能中的碳廓清能力、巨噬細胞吞噬實驗及NK細胞活性來作為評判蔗果低聚糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)能力。

1.2.1 動物分組及喂養(yǎng) 將192只體重為20±2g的清潔級昆明種雌性小鼠（由北京大學醫(yī)學部實驗動物科學部提供，許可證號：SCXK-（京）2002-0001），分為4批進行實驗，每批隨機平均分為4組，每組12只。實驗1批進行臟器/體重比值測定、遲發(fā)型變態(tài)反應實驗、半數(shù)溶血值（HC50）的測定和抗體生成細胞數(shù)的測定；實驗2批進行碳廓清實驗；實驗3批進行小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗；實驗4批進行conA誘導的小鼠淋巴細胞轉化實驗和NK細胞活性測定。

OLIGOTM蔗果低聚糖的推薦劑量為成人（按60kg體重計）每日8.3g（相當于 GF2+GF3+GF4=5g），相當于0.138g/（日·kg體重）。實驗分別設人體推薦量的 5、10、30 倍，即每日為 0.69、1.38、4.15g/kg·bw的低、中、高劑量組。受試物用水（已消毒）配制，每日一次經(jīng)口給予，連續(xù)灌胃33d后測各項免疫指標。小鼠灌胃體積為0.1mL/10g鼠重。同時設一空白對照組（0g/kg·bw），用水（己消毒）代替受試物，每日灌胃體積與各受試物組相同。

1.2.2 臟器體重比值的測定 按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003 版）中方法測定［9］。

1.2.3 遲發(fā)型變態(tài)反應（DTH）實驗（足跖增厚法）按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中方法測定［9］。受試樣品組的差值顯著高于對照組的差值，可判定該項實驗結果陽性。

1.2.4 ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉化實驗（MTT法） 按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中方法測定［9］。受試樣品組的光密度差值顯著高于對照組的光密度差值，可判定該項實驗結果陽性。

1.2.5 抗體生成細胞數(shù)的測定（Jerne改良玻片法）按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中方法測定［9］。受試樣品組的空斑數(shù)顯著高于對照組的空斑數(shù)，可判定該項實驗結果陽性。

1.2.6 半數(shù)溶血值（HC50）的測定 按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中方法測定［9］。溶血素的量以半數(shù)溶血值（HC50）表示，按下式計算：

樣品HC50=樣品的OD540/SRBC半數(shù)溶血時的光密度值×稀釋倍數(shù)

受試樣品組的HC50顯著高于對照組的HC50，可判定該項實驗結果陽性。

1.2.7 小鼠碳廓清實驗 按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中方法測定［9］。以碳廓清指數(shù)（a）表示小鼠碳廓清的能力，按下式計算：

受試樣品組的碳廓清指數(shù)顯著高于對照組的碳廓清指數(shù)，可判定該項實驗結果陽性。

1.2.8 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗（半體內(nèi)法） 按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中方法測定［9］，按下式計算吞噬率和吞噬指數(shù)：

式中：P-吞噬百分率，用小數(shù)表示。所得數(shù)據(jù)為計量資料，受試樣品組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)均顯著高于對照組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)，可判定該項實驗結果陽性。

1.2.9 NK細胞活性的測定（乳酸脫氫酶LDH測定法） 按《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）中方法測定［9］，按下式計算NK細胞活性：

NK細胞活性（%）=（反應孔OD490-自然釋放孔OD490）/（最大釋放孔OD490-自然釋放孔OD490）×100%

得出的NK細胞活性按下式進行數(shù)據(jù)轉換：

式中：P-NK細胞活性，用小數(shù)表示。所得數(shù)據(jù)為計量資料，受試樣品組的NK細胞活性顯著高于對照組的NK細胞活性，可判定該項實驗結果陽性。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

所得數(shù)據(jù)均以表示，并采用SAS 8.2對結果進行采用方差分析，但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F(xiàn)值＜F0.05，結論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計；若變量轉換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。

2 結果與討論

2.1 細胞免疫功能實驗

2.1.1 蔗果低聚糖對小鼠脾淋巴細胞轉化實驗的影響 淋巴細胞在免疫調(diào)控中起重要作用，其增殖反應是反映淋巴細胞活化和功能的重要指標。蔗果低聚糖在 0、0.58、1.17、3.50g/kg·bw 4 個不同劑量條件下對小鼠脾淋巴細胞增殖的刺激作用，結果見表1。

表1 蔗果低聚糖對小鼠脾淋巴細胞轉化實驗的影響（±SD，n=12）

表1 蔗果低聚糖對小鼠脾淋巴細胞轉化實驗的影響（±SD，n=12）

注：與對照組比較，進行顯著性檢驗，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01，表3、表6和表7同。

劑量（g/kg·bw）淋巴細胞增殖能力（OD差值） P值0—0.002 0.69 1.38 4.15 0.15±0.05 0.15±0.07 0.18±0.07 0.25±0.06**1.000 0.708

表1結果表明，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的蔗果低聚糖33d后，與0g/kg·bw組比較，4.15g/kg·bw顯著增強ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化能力（P＜0.01），兩者具有協(xié)同作用。而 0.69g/kg·bw和1.38g/kg·bw 2個劑量實驗組的脾淋巴細胞轉化能力均未發(fā)生明顯變化（P＞0.05）。淋巴細胞在免疫調(diào)控中起重要作用，特異性免疫是由淋巴細胞識別外源性抗原開始，通過增殖和分化成效應細胞行使清除抗原的功能。因此，淋巴細胞的增殖反應是反映淋巴細胞活化和功能的重要指標［10］。說明蔗果低聚糖在4.15g/kg·bw劑量時能夠刺激淋巴細胞增殖的有絲分裂源活性，具有顯著增強其細胞免疫功能。

2.1.2 蔗果低聚糖對小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應（DTH）的影響 遲發(fā)型變態(tài)反應是由T細胞介導的細胞免疫應答的一種類型，也是常見的一種免疫反應，外周血液中T細胞亞群的數(shù)目和比值測定是估計體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)平衡狀態(tài)的最有意義的參數(shù)，也是疾病嚴重程度和預后的重要標志之一［11］。由表2可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的蔗果低聚糖33d后，各劑量組足跖腫脹度與0g/kg·bw組比較，差異不顯著（P＞0.05），說明蔗果低聚糖對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應能力無影響。

表2 蔗果低聚糖對小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應（DTH）的影響（±SD，n=12）

表2 蔗果低聚糖對小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應（DTH）的影響（±SD，n=12）

劑量（g/kg·bw）足跖腫脹度（mm） P值0—0.797 0.69 1.38 4.15 0.56±0.24 0.64±0.28 0.62±0.24 0.63±0.18 0.742 0.892

2.2 體液免疫功能實驗

2.2.1 蔗果低聚糖對小鼠抗體生成細胞數(shù)的影響 溶血空斑數(shù)量可反映抗體產(chǎn)生水平，蔗果低聚糖3個劑量組與對照組間溶血空斑數(shù)的差異，其結果見表3。

表3 蔗果低聚糖對小鼠抗體生成細胞數(shù)的影響（±SD，n=12）

表3 蔗果低聚糖對小鼠抗體生成細胞數(shù)的影響（±SD，n=12）

劑量（g/kg·bw）溶血空斑數(shù)（ ×103/全脾） P值0—0.69 1.38 4.15 131±73 172±98 226±84*244±108*0.564 0.039 0.012

由表3結果可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的蔗果低聚糖33d后，蔗果低聚糖3個劑量組溶血空斑數(shù)均較對照組有一定的增加，其中1.38g/kg·bw組和4.15g/kg·bw組較對照組可提高小鼠抗體生成細胞數(shù)（P＜0.05），而0.69g/kg·bw實驗組對小鼠抗體生成細胞數(shù)的影響不具統(tǒng)計學意義（P＞0.05），說明1.38g/kg·bw和4.15g/kg·bw劑量的蔗果低聚糖有助于提高小鼠體液抗體水平。

2.2.2 蔗果低聚糖對小鼠半數(shù)溶血值的影響 血清溶血素實驗反映了B淋巴細胞受抗原刺激后分化成漿細胞并產(chǎn)生抗體的能力，其含量與機體體液免疫能力呈正相關。實驗動物經(jīng)綿羊紅細胞（SRBC）免疫后其B淋巴細胞可產(chǎn)生抗SRBC抗體（溶血素），并釋放至外周血。這種抗體在試管內(nèi)與SRBC溫育，在補體參與下可產(chǎn)生溶血反應，免疫動物血清中溶血素的含量可以通過檢測溶血過程中釋放的血紅蛋白作間接測定。本實驗以血清溶血素水平作為檢測體液免疫功能的指標，分別考察蔗果低聚糖3個劑量組對小鼠半數(shù)溶血值（HC50）的影響，其結果見表4。

表4 蔗果低聚糖對小鼠半數(shù)溶血值（HC50）的影響（±SD，n=12）

表4 蔗果低聚糖對小鼠半數(shù)溶血值（HC50）的影響（±SD，n=12）

劑量（g/kg·bW）半數(shù)溶血值（HC50） P值0—0.862 0.170 0.675 0.69 1.38 4.15 118±42 130±41 154±56 136±50

從表4可以看出，與對照組相比，各劑量組均能提高小鼠半數(shù)溶血值（HC50），劑量與效應呈正相關關系，但各劑量組與空白組相比無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。半數(shù)溶血值的測定結果表明了蔗果低聚糖沒有顯著增強小鼠產(chǎn)生血清溶血素的能力。

2.3 非特異性免疫

2.3.1 對臟器/體重比值的影響 胸腺和脾臟是機體內(nèi)重要的免疫器官，胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)可直觀地反映機體免疫功能的強弱。蔗果低聚糖3個劑量組與對照組間的差異對小鼠臟器/體重比值的影響見表5。

表5 蔗果低聚糖對小鼠臟器/體重比值的影響（±SD，n=12）

表5 蔗果低聚糖對小鼠臟器/體重比值的影響（±SD，n=12）

劑量（g/kg·bw）胸腺/體重比值（mg/g） P值 脾臟/體重比值（mg/g） P值0——0.69 1.38 4.15 0.631 1.000 0.568 2.0±0.5 2.1±0.5 2.4±0.6 2.3±0.5 0.979 0.329 0.509 5.3±0.8 5.6±0.9 5.3±0.9 5.7±0.8

由表5可知，各劑量組小鼠實驗前后胸腺/體重比值和脾臟/體重比值與空白對照組之間均無顯著性差異（P＞0.05），表明蔗果低聚糖對小鼠胸腺/體重比值和脾臟/體重比值的影響不明顯。

2.3.2 蔗果低聚糖對小鼠單核-巨噬細胞吞噬能力的影響 巨噬細胞是機體免疫系統(tǒng)的一種重要的免疫細胞，不僅具有很強的吞噬功能，而且是主要的抗原提呈細胞，在非特異性和特異性免疫應答均起關鍵作用［12］。

2.3.2.1 蔗果低聚糖對小鼠碳廓清能力的影響 碳廓清法可以表觀小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，通過測定其吞噬指數(shù)α的變化來研究不同劑量的對小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能的影響，其結果見表6。

表6 蔗果低聚糖對小鼠碳廓清能力的影響（±SD，n=12）

表6 蔗果低聚糖對小鼠碳廓清能力的影響（±SD，n=12）

劑量（g/kg·bw） 吞噬指數(shù) P值0—0.004 0.69 1.38 4.15 5.96±0.58 6.42±0.99 6.49±0.81 7.01±0.55**0.329 0.219

表7 蔗果低聚糖對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率及吞噬指數(shù)的影響（±SD，n=12）

表7 蔗果低聚糖對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率及吞噬指數(shù)的影響（±SD，n=12）

劑量（g/kg·bw） 吞噬率（%） sin-1■吞噬率 P值 吞噬指數(shù) P值0——0.69 1.38 4.15 20±7 22±8 22±5 28±6 0.46±0.10 0.48±0.10 0.48±0.06 0.55±0.06*0.906 0.819 0.025 0.30±0.15 0.34±0.15 0.34±0.09 0.46±0.12**0.822 0.792 0.009

由表6結果可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的蔗果低聚糖33d后，3個劑量組的吞噬指數(shù)a均較空白組有一定的增加，其中4.15g/kg·bw組較對照組可顯著增強小鼠碳廓清能力（P＜0.01），而0.69g/kg·bw和1.38g/kg·bw兩個劑量實驗組的未發(fā)生顯著變化（P＞0.05），說明4.15g/kg·bw劑量的蔗果低聚糖具有提高小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，對小鼠的非特異免疫功能有顯著促進作用。

2.3.2.2 蔗果低聚糖對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率及吞噬指數(shù)的影響 巨噬細胞的吞噬功能在免疫反應中起著至關重要的作用。由表7結果可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的蔗果低聚糖33d后，4.15g/kg·bw組較對照組可顯著增強小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率和吞噬指數(shù)（P＜0.05），而0.69g/kg·bw和1.38g/kg·bw兩個劑量實驗組的未發(fā)生顯著變化（P＞0.05），說明4.15g/kg·bw劑量的蔗果低聚糖有助于提高小鼠的非特異免疫功能。

2.3.3 蔗果低聚糖對小鼠NK細胞活性的影響 NK細胞（Natural Killer Cell，自然殺傷細胞）是與T、B細胞并列的第三類群淋巴細胞，可非特異直接殺傷靶細胞，這種天然殺傷活性既不需要預先由抗原致敏，也不需要抗體參與，且不受主要組織相容性復合體（MHC）的約束，因此，其作為非特異性免疫的重要指標可考察蔗果低聚糖對機體免疫功能的影響。由表8結果可知，低、中、高3個劑量組的小鼠NK細胞活性較對照組未發(fā)生明顯變化，說明蔗果低聚糖對增強NK細胞活性效果不顯著。

表8 蔗果低聚糖對小鼠NK細胞活性的影響（±SD，n=12）

表8 蔗果低聚糖對小鼠NK細胞活性的影響（±SD，n=12）

劑量（g/kg·bw）NK細胞活性（%） sin-1NK■ 細胞活性 P值0—0.69 1.38 4.15 21.6±5.0 22.6±5.6 24.5±4.6 22.2±4.5 0.48±0.06 0.49±0.07 0.52±0.05 0.49±0.06 0.931 0.355 0.976

3 結論

本次實驗選取小鼠模型從細胞免疫、體液免疫及非特異性免疫（單核——巨噬細胞功能、NK細胞活性）3個方面，對蔗果低聚糖的免疫功能的調(diào)節(jié)作用進行了研究。結果表明，與對照組相比，以低、中和高3個劑量試喂蔗果低聚糖的小鼠的ConA誘發(fā)的遲發(fā)性變態(tài)反應沒有明顯的效果（P＞0.05），而高劑量組小鼠的脾淋巴細胞增殖效果高度顯著（P＜0.01），因此，可以判定蔗果低聚糖對小鼠的細胞免疫調(diào)節(jié)作用為陰性；低、中和高3個劑量組小鼠的半數(shù)溶血值沒有發(fā)生顯著變化（P＞0.05），中、高劑量組小鼠血清中抗體生成細胞含量顯著提高（P＜0.05），所以，可以判定蔗果低聚糖對小鼠的體液免疫調(diào)節(jié)作用陽性；高劑量組小鼠碳廓清能力高度顯著（P＜0.01），小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率及吞噬指數(shù)顯著（P＜0.05），因此，可以判定蔗果低聚糖對小鼠的單核——巨噬細胞功能增強作用為陽性；低、中和高3個劑量組小鼠的NK細胞活性均沒有明顯變化（P＞0.05），所以，可以判定蔗果低聚糖對小鼠的NK細胞活性增強作用為陰性。此外，蔗果低聚糖對小鼠胸腺/體重比值和脾臟/體重比值的影響不明顯（P＞0.05）。綜合3個方面，可以認定蔗果低聚可以提高小鼠的免疫力。

高劑量蔗果低聚糖對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應較對照組有顯著的增強作用（細胞免疫），中、高劑量蔗果低聚糖提高小鼠血清中抗體生成細胞含量（體液免疫），高劑量蔗果低聚糖可顯著小鼠碳廓清能力以及提高巨噬細胞吞噬能力（非特異免疫），說明高劑量蔗果低聚糖組可顯著增強小鼠的免疫力，但效果依賴于蔗果低聚糖的攝入量。蔗果低聚糖具有促進腸道雙歧桿菌的增殖，改善腸道微生態(tài)平衡的能力，目前已有關于雙歧桿菌增強機體免疫力的報道。腸道粘膜是免疫系統(tǒng)的第一道屏障，粘膜上定殖的腸道菌群則是維護腸道免疫功能的重要物質。腸道局部免疫系統(tǒng)，又稱腸道相關淋巴組織（Gut Associated Lymphoid Tissue，GALT），在防止細菌粘附及細菌易位方面具有重要作用［13］。雙歧桿菌數(shù)量增加可增加其定殖腸黏膜的機率，阻止外界致病菌、腸道潛在致病的繁殖、定殖和入侵，減少腸源性內(nèi)毒素的來源，降低體內(nèi)血中毒素水平。此外，雙歧桿菌及其代謝產(chǎn)物能誘導干擾素、激活體液免疫和細胞免疫［14-15］。通過對相同劑量對小鼠腸道菌群的研究，結果表明（數(shù)據(jù)未給出），高劑量蔗果低聚糖組的小鼠腸道中的雙歧桿菌較對照組明顯增加（P＜0.05）。據(jù)此，可推斷蔗果低聚糖對免疫調(diào)節(jié)作用主要依賴于其對腸道雙歧桿菌的增殖［16］。

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Study on the immunomodulatory effects of fructooligosaccharides on mouse

HANG Feng1，WU Jian-feng2，GONG Guang-yu1，WANG Yin-yu1，*
（1.Technical Center，Bright Dairy&Food Co.，Ltd.，Shanghai 200072，China；2.Jiangmen Quantum Hi-Tech Biological Engineering Co.，Ltd.，Jiangmen 529080，China）

TS201.4

A

1002-0306（2010）10-0359-05

2009-04-24 *通訊聯(lián)系人

杭鋒（1982-），男，碩士，研究方向：乳品科學與技術。

國家“十一五”科技支撐計劃（2006BAD04A06）。