豬瘟和藍(lán)耳病母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律及疫苗免疫的干擾作用

杜喜忠，胡旭進(jìn)，樓芳芳，章蕭君，項(xiàng)玉燕

(1.浙江省金華市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 金華 323000;2.金華市畜牧獸醫(yī)局，浙江 金華 323000)

豬瘟 (HC)與豬藍(lán)耳病 (豬繁殖與呼吸障礙綜合征，PRRS)是引起“豬高熱病綜合癥”主要疾病之一，也是現(xiàn)行豬場(chǎng)必須免疫的2種豬傳染性疾病。為了給制定合理的豬瘟和藍(lán)耳病免疫程序提供理論依據(jù)，我們特此進(jìn)行了仔豬母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律和疫苗免疫間干擾作用試驗(yàn)。現(xiàn)將有關(guān)試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)于2007年10月至2008年2月在金華市農(nóng)科院金華豬選育場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)豬為14日齡臨床健康金華兩頭烏未免疫仔豬。

供試疫苗為豬瘟弱毒苗，為南京某廠(chǎng)家生產(chǎn)的豬瘟細(xì)胞源活疫苗，批號(hào):0707044;高致病性藍(lán)耳病滅活苗由金華市畜牧獸醫(yī)局提供的山東某廠(chǎng)家生產(chǎn)的NVDC-JXA1株，批號(hào):2007021;藍(lán)耳弱毒苗 (藍(lán)耳病CH-1R株)購(gòu)自上海某生物藥品有限公司，批號(hào):20070712。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律試驗(yàn)

對(duì)試驗(yàn)?zāi)肛i進(jìn)行常規(guī)免疫 (上胎仔豬豬瘟首免疫時(shí)每頭母豬免疫6頭份豬瘟細(xì)胞苗、配種前免疫高致病性藍(lán)耳病滅活苗2頭份、春秋二季集中免疫O型口蹄疫疫苗2頭份)。選產(chǎn)仔正常、產(chǎn)期相同或相近的經(jīng)產(chǎn)二頭烏母豬10頭和所產(chǎn)仔豬每窩中健康狀況較好的2頭，分別在仔豬14、21、28、35日齡時(shí)前腔靜脈采血3～5 mL，分離血清，保存?zhèn)溆?。同批次檢測(cè)豬瘟和藍(lán)耳病母源抗體水平，計(jì)算母源抗體半衰期，分析抗體消長(zhǎng)規(guī)律。

1.2.2 疫苗間免疫干擾作用試驗(yàn)

選上述同窩剩余仔豬中產(chǎn)期相近、健康狀況較好的84頭仔豬，隨機(jī)分成7組，每組12頭，各組免疫方法見(jiàn)表1。每組同時(shí)免疫，首免后4周加強(qiáng)免疫1次。每頭疫苗首免劑量:豬瘟2頭份、藍(lán)耳病1頭份;加強(qiáng)免疫劑量加倍。每次免疫后4周分別前腔靜脈采血，分離血清，保存?zhèn)溆谩Ｍ螜z測(cè)豬瘟和藍(lán)耳病抗體，比較免疫效果。

1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

間接血凝試驗(yàn)檢測(cè)豬瘟抗體，抗體水平≥log25為合格，全組合格率≥75%為免疫合格;酶聯(lián)吸附試驗(yàn)檢測(cè)藍(lán)耳病抗體，p/s值≥0.4為陽(yáng)性。

2 結(jié)果與分析

2.1 豬瘟、藍(lán)耳病母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律

從表2可見(jiàn)，母豬常規(guī)免疫所產(chǎn)仔豬能獲得較高母源抗體，仔豬母源抗體水平與母豬抗體水平成正相關(guān)。14日齡仔豬豬瘟、藍(lán)耳病母源抗體水平分別達(dá)到5.79、1.384，合格率 (陽(yáng)性率)分別為68.42%、100.00%。隨著仔豬日齡增加抗體水平、合格率隨之下降，至35日齡豬瘟母源抗體水平降至3.95、保護(hù)率降至36.84%，藍(lán)耳病抗體水平降至0.467、保護(hù)率降至58.33%。豬瘟母源抗體前4周下降緩慢，周間差異不顯著，第5周開(kāi)始下降加劇，抗體水平5周末與4周末差異顯著;藍(lán)耳病母源抗體前3周下降相對(duì)較緩慢，第4周開(kāi)始下降加劇，5周末p/s值與2周p/s值差異顯著。

表1 試驗(yàn)各組免疫方法

表2 各日齡豬瘟、藍(lán)耳病母源抗體的檢測(cè)結(jié)果

從抗體水平下降曲線(xiàn) (圖1、2)分析可知，豬瘟母源抗體的半衰期為17 d左右，藍(lán)耳病母源抗體的半衰期為9 d左右。因此，我們認(rèn)為，臨床應(yīng)先進(jìn)行藍(lán)耳病免疫，然后豬瘟免疫。

2.2 疫苗間免疫干擾作用情況

2.2.1 豬瘟免疫效果和豬瘟抗體檢測(cè)情況

從表2可見(jiàn)，高致病性藍(lán)耳病滅活苗免疫，對(duì)豬瘟免疫影響不明顯。首免后，豬瘟抗體水平最差為7.71、合格率在95%以上，試驗(yàn)各組與對(duì)照組差異不顯著，組間差異也不顯著;二免后豬瘟抗體水平明顯提高，最低為8.83，合格率均為100.00%。

圖1 各日齡豬瘟的抗體水平

圖2 各日齡藍(lán)耳病的抗體水平

藍(lán)耳病弱毒苗免疫對(duì)豬瘟免疫效果有明顯抑制作用。首免后豬瘟免疫效果從高到低依次也為:C2組6.42、B2組6.20、A2組5.30，與D組8.17相比:試驗(yàn) A2、B2、C2組差異均極顯著;試驗(yàn)A2組與B2、C2組差異也極顯著，合格率為60%，不能達(dá)到免疫要求，容易出現(xiàn)免疫失敗，臨床不能采用;B2組與C2組差異不顯著，說(shuō)明藍(lán)耳病與豬瘟免疫先后順序?qū)ωi瘟免疫無(wú)影響。加強(qiáng)免疫后豬瘟抗體水平均顯著提高，各組間差異不顯著。

2.2.2 藍(lán)耳病免疫效果和藍(lán)耳病免疫抗體情況

從p/s值上看，藍(lán)耳病弱毒苗和高致病性藍(lán)耳病滅活苗免疫效果均不理想。首免，弱毒苗免疫抗體試驗(yàn)C2組最高為0.364 4，陽(yáng)性率為22.22%，A2組最差抗體水平為0.052 0，合格率為0;高致病性藍(lán)耳病弱毒苗C1組免疫抗體最高0.250 2，合格率為27.78%，A1、B1組抗體水平為0.005 3、0.052 0，合格率均為0;弱毒苗免疫抗體總體水平為0.220 6高于高滅活苗的0.102 5，說(shuō)明仔豬藍(lán)耳病免疫弱毒苗免疫好于滅活苗。二免后，弱毒苗免疫抗體變化不明顯，A組仍為最差;而滅活苗免疫抗體上升明顯，各組抗體水平相近，陽(yáng)性率達(dá)51.85%(表 3、4)。

藍(lán)耳病弱毒苗與豬瘟弱毒苗同時(shí)免疫接種首免和二免疫藍(lán)耳病抗體水平均最低，說(shuō)明同時(shí)免疫豬瘟弱毒苗對(duì)藍(lán)耳病弱毒苗免疫也有一定干擾作用。

表3 各組別豬瘟的抗體水平及顯著性

表4 各組別藍(lán)耳病的抗體檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)果與討論

從本次試驗(yàn)看給母豬豬瘟細(xì)胞苗、高致病性藍(lán)耳病滅活苗常規(guī)免疫，所產(chǎn)仔豬能獲得較高母源抗體水平，仔豬母源抗體水平與母豬抗體水平成正相關(guān)，隨著仔豬日齡增加，抗體水平也隨之下降［1－3］。藍(lán)耳病的母源抗體在仔豬21日齡左右開(kāi)始衰退加劇，半衰期為9 d左右;豬瘟母源抗體在仔豬28日齡開(kāi)始衰退加劇，半衰期為17 d左右，與其他報(bào)道基本吻合［3］。因此，我們認(rèn)為臨床上藍(lán)耳病和豬瘟的免疫順序應(yīng)該是藍(lán)耳病先免疫，然后豬瘟免疫。

高致病性藍(lán)耳病滅活苗與豬瘟細(xì)胞苗同時(shí)免疫，豬瘟和藍(lán)耳病免疫抗體差異不顯著［4］，說(shuō)明二種疫苗同時(shí)免疫無(wú)明顯相互干擾作用。對(duì)一些小規(guī)模或農(nóng)村散養(yǎng)生豬，可以采用豬瘟弱毒苗與高致病性藍(lán)耳病滅活苗同時(shí)分點(diǎn)接種的免疫方法［5］。

藍(lán)耳病弱毒苗免疫對(duì)豬瘟細(xì)胞苗免疫產(chǎn)生明顯干擾作用，兩者同時(shí)免疫干擾作用極顯著。本次試驗(yàn)中，首免后豬瘟免疫合格率僅為60%左右，不能達(dá)到免疫要求;2種疫苗間隔7 d免疫，雖能滿(mǎn)足免疫要求，但有明顯干擾作用。這是因?yàn)?種病毒感染的受體相反或相同，產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用，而且一種病毒感染細(xì)胞后會(huì)產(chǎn)生干擾素，影響另一種病毒的復(fù)制［6］。因此，臨床制定免疫程序是此2種疫苗免疫必須間隔7 d以上。

藍(lán)耳病疫苗免疫效果尚不理想，高致病性藍(lán)耳病滅活苗首免抗體陽(yáng)性率僅為9.23%，二免抗體陽(yáng)性率51.85%;藍(lán)耳病弱毒苗免疫抗體陽(yáng)性率為12.96%。仔豬藍(lán)耳病弱毒苗免疫效果好于滅活苗免疫［7］。藍(lán)耳病免疫效果的評(píng)估有待進(jìn)一步研究。

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