大鼠右側(cè)足底注射 C48/80復(fù)合物對(duì)雙側(cè)足底皮膚血流影響的實(shí)驗(yàn)研究*

王廣軍 張宇沁 王瑞紅 田宇瑛 黃 濤 張維波 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所(北京 100700)

對(duì)稱和左右交互支配是最常見的生命現(xiàn)象,而且對(duì)稱的觀念始終貫穿于針灸核心理論及臨床治療過程?！秲?nèi)經(jīng)》中的巨刺和繆刺理論,即左病取右、右病取左的針刺方法就是這種觀念的體現(xiàn)[1]。張維波采用聚類分析發(fā)現(xiàn)左右同名穴二氧化碳的釋放量相關(guān)性最大,說明穴位處二氧化碳的釋放也服從這種規(guī)律[2]。我們以往的研究表明,當(dāng)右側(cè)下肢[3]接受溫?zé)岽碳ひ鹧髟龈吆?左側(cè)肢體相同部位的血流也增高,說明體表相同部位的血流分布也符合這種規(guī)律。但是當(dāng)我們擬深入探討機(jī)理,采用麻醉狀態(tài)的大鼠為研究對(duì)象時(shí),卻發(fā)現(xiàn)在麻醉狀態(tài)下,右側(cè)溫?zé)岽碳ひ鸬难髟龈卟⒉灰鹱髠?cè)相同部位的血流增高,我們初步考慮可能是兩方面原因:一是與機(jī)體的狀態(tài)有關(guān);二是與刺激的性質(zhì)有關(guān)。因此我們改變了刺激條件,以肥大細(xì)胞脫顆粒劑 C48/80復(fù)合物為工具藥,探討一側(cè)血流變化對(duì)對(duì)側(cè)血流的影響。

1 材料與方法 1.1 實(shí)驗(yàn)儀器參照張棟[4]的方法,使用PeriScan PIMⅡ型激光多普勒血流灌注成像儀(瑞典PERIM ED公司生產(chǎn)),激光波長(zhǎng) 670nm。本研究采用 NR掃描模式,步長(zhǎng) 3mm,掃描面積 Width50× Height50,掃描精度為High。應(yīng)用聯(lián)機(jī)自帶 LDPI2.5圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行血流圖的分析。

1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用雄性 Wistar大鼠 20只,體重 220g～250g,由中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨即分為靜息組 10只和足底注射組 10只,實(shí)驗(yàn)中靜息組共有 6只完成完整血流記錄,注射組共 8只完成完整血流記錄。

1.3 干預(yù)方法及血流記錄實(shí)驗(yàn)室保持暗光狀態(tài),室溫控制在 26℃± 2℃,大鼠用 1%戊巴比妥鈉腹腔注射 (4mL/kg)麻醉,俯臥位固定,充分暴露雙下肢足底 ,記錄初始狀態(tài)下雙下肢足底血流圖,記錄為 Pre。靜息組休息 5min后 ,開始記錄不同時(shí)間段血流值。注射組右下肢足底注射 0.1%的 C48/80復(fù)合物 5μl(Sigma,57K4011),5min后開始記錄不同時(shí)間段血流值。各時(shí)間段血流記錄為 (Post)1min、4min、7min、10min、 20min、 30min、40min、50min、60min、70min、80min、 90min。 實(shí)驗(yàn)過程見下示意圖。

實(shí)驗(yàn)流程示意圖

1.4 數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計(jì) 采用 LDPI 2.5圖像分析軟件,大鼠雙下肢足底血流均用 PU表示,不同時(shí)間點(diǎn)左右側(cè)血流比較采用配對(duì) t檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)采用 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2.1 靜息狀態(tài)大鼠足底血流變化在靜息狀態(tài)下,大鼠雙下肢足底血流較高,表現(xiàn)在血流圖上為雙后肢彌漫性的深紅色區(qū)域(圖 1),而且在 90min內(nèi) ,雙側(cè)足底血流無明顯波動(dòng)(見圖 3),左右側(cè)足底血流經(jīng)配對(duì) t檢驗(yàn)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05,見表 1)。說明在靜息狀態(tài)下,大鼠雙下肢足底血流維持在一定的水平,90min內(nèi)無明顯波動(dòng)。

2.2 右側(cè)足底注射 C48/80復(fù)合物后大鼠雙下肢足底血流變化 在右側(cè)注射肥大細(xì)胞脫顆粒劑 C48/80復(fù)合物之前,大鼠雙下肢足底血流比較對(duì)稱,見圖 2-B,血流圖表現(xiàn)為雙側(cè)對(duì)稱性橘黃色區(qū)域分布。在大鼠右下肢足底注射 C48/80復(fù)合物后,注射側(cè)足底血流顯著上升 ,在 1min～10min內(nèi) (見圖 2-C～F,表 2),與對(duì)側(cè)比 P ＜ 0.05。 在 20min～30min內(nèi) (見圖 2-G～F,表 2),血流下降至正常水平 ,與對(duì)側(cè)比 P＞0.05。在 40min～90min內(nèi)(見圖 2-I～O,表 2),注射側(cè)血流顯著低于對(duì)側(cè)血流 (P＜0.05)。結(jié)果表明大鼠右下肢足底注射 C48/80復(fù)合物后,局部血流先升高,后降低,而對(duì)側(cè)血流無明顯變化 ,見圖 4。

表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

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續(xù)表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

續(xù)表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

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表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側(cè)皮膚血流變化比較(,PU)

表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側(cè)皮膚血流變化比較(,PU)

組別 n 注射前注射后1min 4 min 7 min 10 min 20 min左側(cè) 8 1.93± 0.622.00± 0.68 1.95± 0.67 1.95± 0.67 1.92± 0.68 1.88± 0.59右側(cè) 8 1.89± 0.612.60± 0.76 2.41± 0.61 2.31± 0.58 2.21± 0.62 1.86± 0.53 t 1.282 -5.701 -6.269 -3.800 -2.791 0.271 P 0.241 0.001 0.000 0.007 0.027 0.794

續(xù)表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側(cè)皮膚血流變化比較(,PU)

續(xù)表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側(cè)皮膚血流變化比較(,PU)

組 別注射后30 min 40 min 50 min 60 min 70 min 80 min 90 min左側(cè) 1.82± 0.55 1.77± 0.48 1.74± 0.42 1.73± 0.45 1.74± 0.47 1.79± 0.52 1.78± 0.52右側(cè) 1.72± 0.52 1.64± 0.45 1.59± 0.41 1.57± 0.39 1.56± 0.41 1.57± 0.41 1.52± 0.40 t 1.760 3.243 3.169 3.245 3.645 3.732 4.027 P 0.122 0.014 0.016 0.0140 0.008 0.007 0.005

圖2 大鼠右足底溫?zé)岽碳?duì)血流灌注的影響

3 討 論 巨刺,即“左病取右,右病取左”之意,是機(jī)體一側(cè)有病而在對(duì)側(cè)選取經(jīng)穴治療的方法。巨刺始見于《內(nèi)經(jīng)》,如《靈樞? 官針》記載:“巨刺者,左取右,右取左”?？梢姀膫鹘y(tǒng)針灸理論來看,巨刺和繆刺是治療疾病時(shí)的選穴原則,是病理情況下左右對(duì)稱的體現(xiàn)。從一側(cè)痛覺過敏從經(jīng)皮神經(jīng)電刺激的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看,一側(cè)經(jīng)皮神經(jīng)電刺激可對(duì)對(duì)側(cè)不同性質(zhì)的疼痛進(jìn)行調(diào)制,說明在神經(jīng)系統(tǒng)的參與下,左右存在這種交互作用,而且這種交互作用是一種腦反射結(jié)果[5]。

對(duì)稱和左右交互支配是最常見的生命現(xiàn)象,既然在病理情況下,可出現(xiàn)這種交互作用,那么 ,在生理情況下機(jī)體的左右交互作用,就值得深入研究。因此我們以健康受試者為研究對(duì)象,以局部皮膚血流為指標(biāo),探討了生理狀態(tài)下的作用交互支配問題。從我們的結(jié)果來看,當(dāng)一種適宜的溫?zé)岽碳ぷ饔糜谌梭w后,不同于傷害性刺激引起的血流降低[6],往往是在不影響全身血流的基礎(chǔ)上,局部皮膚血流灌注量增高并維持在一定的水平[7]。而且右側(cè)肢體的血流升高往往伴隨著左側(cè)相同部位的血流增高[3]。我們推測(cè)對(duì)側(cè)血流的增高一方面是神經(jīng)活動(dòng)的結(jié)果,另外體液因素很可能參與其中,部分支持了體液因素參與一側(cè)炎性痛敏致對(duì)側(cè)痛閾變化的結(jié)論[8]。

但是這種基于溫?zé)岽碳さ慕换プ饔貌⒉荒苤噩F(xiàn)于麻醉狀態(tài)下的大鼠,對(duì)此我們有兩種理解,一是這種基于溫?zé)岽碳さ慕换プ饔帽旧硎悄X反射的結(jié)果,或者即使有體液因素的參與,也是繼發(fā)于腦反射的結(jié)果,大鼠的麻醉狀態(tài)阻止了基于腦反射的這種交互作用;二是可能與刺激的模式有關(guān),因此我們采用另方面刺激模式,進(jìn)一步探討這種交互作用。

圖3 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化的比較

圖4 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側(cè)皮膚血流的變化

我們知道,機(jī)體對(duì)外界的反應(yīng),是由外周感受器所介導(dǎo)的,而針灸的命名也是針對(duì)不同性質(zhì)的感受器而言,針刺過程主要由機(jī)械感受器介導(dǎo),而灸法主要由溫度感受器所介導(dǎo),無論是機(jī)械感受器興奮,還是溫度感受器興奮,往往導(dǎo)致或者伴有化學(xué)感受器的興奮,近來的研究表明,無論是針刺,還是灸療,在效應(yīng)始動(dòng)機(jī)制中肥大細(xì)胞發(fā)揮著關(guān)鍵作用,因此在我們的研究中采用肥大細(xì)胞脫顆粒劑 C48/80復(fù)合物作為工具藥[9]。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看,C48/80注射后,局部皮膚血流先升高,后降低 ,而對(duì)側(cè)血流無明顯波動(dòng),這樣的結(jié)果部分支持交互作用的基礎(chǔ)可能是腦反射,但也不排除有其他因素參與其中,詳細(xì)機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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