靈芝孢子油對大鼠骨骼肌收縮作用的影響

李如海 賀永貴 崔 永 許青松◇ 金元哲

吉林省安圖縣中醫(yī)院(安圖 133600)

靈芝是我國傳統(tǒng)的補(bǔ)益中藥,被歷代醫(yī)家視為滋補(bǔ)強(qiáng)壯、扶正固本、延年益壽之珍品。靈芝別名赤芝、紅芝、木靈芝、菌靈芝、萬年蕈、靈芝草,為多孔蓖科真菌靈芝,夏、秋季多生于林內(nèi)闊葉樹的木樁旁,或木頭、立木、倒木上,有時也生于針葉樹上,其孢子卵圓形,8cm～11cm×7cm,壁兩層,內(nèi)壁褐色,表面有小疣,外壁透明無色,長白山原始森林中有著廣泛分布。現(xiàn)代研究表明靈芝具有調(diào)節(jié)血脂、增強(qiáng)免疫、抗肝纖維化、抗腫瘤等多種功效[1-4]。靈芝孢子油是采用破壁方法,直接從孢子粉中提純的脂溶性物質(zhì),高度集中了靈芝孢子原生質(zhì)的三菇類、多糖類、核苷類等有效成分。本研究以大鼠為研究對象,觀察了長白山地產(chǎn)靈芝孢子油對在體骨骼肌收縮作用的影響。

1 材料與方法 1.1 材料 實(shí)驗(yàn)動物:選用體重 200～240gWistar雄性大鼠 40只,由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物科提供。藥品與試劑:長白山地產(chǎn)靈芝孢子粉,經(jīng)破壁、提取而得精制靈芝孢子油,由延邊圣霖菌業(yè)有限公司制備。實(shí)驗(yàn)儀器:RM6240生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)分析系統(tǒng)為成都儀器廠產(chǎn)品。

1.2 方法 1.2.1動物分組及給藥:將 40只 Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為對照組、靈芝孢子油小、中、大劑量組,每組 10只。分別灌胃給與生理鹽水、靈芝孢子油 0.25g/kg、0.50g/kg、1.00g/kg,1次 /d,連續(xù)灌胃 15d。第 15d灌胃 1h后,進(jìn)行在體骨骼肌收縮力學(xué)實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 大鼠骨骼肌模型制備:于最后 1次灌胃 1h后 ,參照文獻(xiàn)的方法進(jìn)行手術(shù)制備在體帶有神經(jīng)支配和血液供應(yīng)的大鼠骨骼肌標(biāo)本[5-6]。

1.2.3 大鼠骨骼肌收縮指標(biāo)測定:用 RM6240生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)測定大鼠骨骼肌收縮指標(biāo)。分別把腓腸肌和比目魚肌肌腱上的結(jié)扎線與張力換能器的金屬片相連,結(jié)扎線的走行應(yīng)與肌肉原始自然位置一致,牽拉肌肉至自然狀態(tài)下的長度。打開RM6240系統(tǒng)電源,調(diào)節(jié)張力換能器的零點(diǎn)。將 RM6240系統(tǒng)刺激器的輸出與雙極氯化銀刺激電極相連,并把刺激電極懸空搭在坐骨神經(jīng)干上。選擇刺激器的刺激參數(shù),波寬 0.2ms、延遲1min、刺激頻率根據(jù)需要使用單刺激或連續(xù)刺激。連續(xù)刺激的頻率 f= (T/1000)×20(T=骨骼肌單收縮時的收縮時間)。刺激強(qiáng)度在單刺激時從零開始逐漸遞增,尋找引起骨骼肌發(fā)生最大收縮的最小刺激強(qiáng)度(Ti)。測定指標(biāo):①單收縮:利用 2倍于最大刺激的刺激強(qiáng)度,觀察測得骨骼肌收縮的單收縮曲線的潛伏期(CT)、收縮幅度(Pt)和 1/2舒張時間(HRT)。②強(qiáng)直收縮:利用 2倍于最大刺激的刺激強(qiáng)度給予連續(xù)刺激后測得強(qiáng)直收縮曲線的潛伏期(CT)、收縮幅度(Pt)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2.1 靈芝孢子油對大鼠骨骼肌單收縮刺激強(qiáng)度的影響 靈芝孢子油小、中、大劑量組與空白組比較,大鼠腓腸肌和比目魚肌單收縮時的最大收縮的最小刺激強(qiáng)度均明顯降低(P＜0.05);腓腸肌單收縮時中劑量組 1/2舒張時間與空白組比較明顯縮短(P＜0.05),見表 1、3。

2.2 靈芝孢子油對大鼠骨骼肌收縮潛伏期的影響 2.2.1腓腸肌:靈芝孢子油中、大劑量組與空白組比較,大鼠腓腸肌單收縮和強(qiáng)直收縮的潛伏期均明顯縮短 (P＜0.05),見表 1、2。

2.2.2 比目魚肌:靈芝孢子油中、大劑量組與空白組比較,大鼠比目魚肌單收縮的潛伏期明顯縮短(P＜0.05);在強(qiáng)直收縮時,靈芝孢子油小、中劑量組與空白組比較,比目魚肌收縮的潛伏期明顯縮短(P＜0.05)。

2.3 靈芝孢子油對大鼠骨骼肌收縮幅度的影響大鼠腓腸肌和比目魚肌單收縮和強(qiáng)直收縮的收縮幅度各給藥組與空白組比較均無顯著差異(P＞ 0.05),見表 3、4。

表1 靈芝孢子油對大鼠腓腸肌單收縮的影響(,n=10)

表1 靈芝孢子油對大鼠腓腸肌單收縮的影響(,n=10)

與對照組比較,△ P＜0.05。

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表2 靈芝孢子油對大鼠腓腸肌強(qiáng)直收縮的影響(,n=10)

表2 靈芝孢子油對大鼠腓腸肌強(qiáng)直收縮的影響(,n=10)

與對照組比較,△ P＜0.05。

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表3 靈芝孢子油對大鼠比目魚肌單收縮的影響(,n=10)

表3 靈芝孢子油對大鼠比目魚肌單收縮的影響(,n=10)

與對照組比較,△ P＜0.05。

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表4 靈芝孢子油對大鼠比目魚肌強(qiáng)直收縮的影響(,n=10)

表4 靈芝孢子油對大鼠比目魚肌強(qiáng)直收縮的影響(,n=10)

與對照組比較,△ P＜0.05。

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3 討 論 增強(qiáng)骨骼肌收縮力和速度藥物的研究和開發(fā)是當(dāng)前運(yùn)動醫(yī)學(xué)、航天醫(yī)學(xué)、軍事醫(yī)學(xué)、老年醫(yī)學(xué)和康復(fù)醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域密切關(guān)注和面臨的課題之一。一些化學(xué)藥品和生物制品在提高運(yùn)動能力方面確有較好的效果,但是由于某些這類藥物含有興奮劑等可能對機(jī)體造成危害的成分而使其應(yīng)用受到很大限制。在尋找安全和有效的藥物時,中國傳統(tǒng)的中草藥由于副作用少,不含對人體有害的興奮劑成分而成為研究的熱點(diǎn)。靈芝是一種真菌,作為藥用已有悠久歷史,可靈芝防治多種疾病,如慢性支氣管炎、高血脂癥、高血壓病、神經(jīng)衰弱、肝炎、白細(xì)胞減少、腫瘤的輔助治療等。近年來隨著孢子采集、破壁技術(shù)的發(fā)展,對靈芝孢子的化學(xué)成分、藥理作用及作用機(jī)制的研究逐漸增多。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)靈芝孢子中含有三萜類、多糖類、氨基酸多肽類、甾醇類、生物堿類、脂肪酸類、維生素類、無機(jī)離子等多種化學(xué)成分,具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗艾滋病毒、生鎮(zhèn)靜催眠、保肝、改善肝纖維化、抑制胃潰瘍的形成、提高機(jī)體抗缺氧能力、清除自由基等多種藥理作用[7-9]。另外,王滿福等[10,11]的研究結(jié)果靈芝對運(yùn)動員還具有較好的抗疲勞效果,能加快血乳酸清除,提高機(jī)體耐酸能力。本研究灌胃給與 Wistar雄性大鼠長白山地產(chǎn)靈芝孢子油后,制作在體坐骨神經(jīng)-骨骼肌標(biāo)本,觀察刺激坐骨神經(jīng)時腓腸肌和比目魚肌收縮作用的影響,結(jié)果0.25g/kg、0.50g/kg、1.00g/kg3個給藥組腓腸肌和大劑量組比目魚肌的單收縮的最大收縮的最小刺激強(qiáng)度均減小;單收縮和強(qiáng)直收縮的潛伏期均縮短(P＜0.05),而收縮幅度無明顯變化(P＞0.05);0.50g/kg組腓腸肌 1/2舒張時間明顯延長(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明靈芝孢子油能在一定程度上降低骨骼肌收縮的最小刺激強(qiáng)度,縮短骨骼肌收縮的潛伏期,提高骨骼肌刺激傳導(dǎo)的速度,提示可能與增強(qiáng)骨骼肌收縮的敏感度有關(guān),其中以 0.50g/kg、1.00g/kg劑量作用較為明顯,其機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。

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[11]王滿福.靈芝液對運(yùn)動員抗疲勞效果的試驗(yàn)觀察[J].中國醫(yī)藥雜志,2004,1(3):165-166.