桃花止瀉顆粒對(duì)慢性腹瀉作用的實(shí)驗(yàn)性研究

趙艷玲, 山麗梅, 王伽伯, 周 旭, 肖小河

(解放軍 302醫(yī)院中藥研究所,北京 100039)

慢性腹瀉是一種臨床常見(jiàn)病和多發(fā)病,多表現(xiàn)為起病緩慢,病程較長(zhǎng),便質(zhì)稀溏或軟爛,或完谷不化,有的可挾有黏液,主要包括現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的慢性腸炎、慢性結(jié)腸炎、腸功能紊亂、結(jié)腸過(guò)敏等由消化器官發(fā)生功能或器質(zhì)性病變導(dǎo)致的腹瀉。中醫(yī)病證以腹瀉、體質(zhì)下降、畏寒、倦怠等為主要表現(xiàn)[1]。經(jīng)過(guò)系統(tǒng)臨床觀察,桃花止瀉顆粒具有溫中散寒、緩急止痛、澀腸止瀉等作用,臨床緩解治愈率達(dá) 90%以上[2]。采用超微粉碎工藝后,桃花止瀉顆?？诟懈?顆粒細(xì)化,增加了胃腸道的覆蓋率。因此本實(shí)驗(yàn)分別以小鼠、大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,觀察桃花止瀉顆粒對(duì)慢性腹瀉的治療作用,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

材料：番瀉葉、大黃均購(gòu)自北京同仁堂藥店。番瀉葉制成 20%煎劑(200g/L)。大黃制成 1000g/L煎劑。思密達(dá)散劑,博福 —益普生(天津)制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)：S 0567。健康清潔級(jí)昆明(K M)小鼠 50只,♀♂各半,體重(20±2)g,由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào)SCXK-(軍)2007-004)。健康清潔級(jí)SD大鼠 70只,♀♂各半,體重(220±20)g,由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供(合格證號(hào)SCXK(京)2007-0001)。

方法：番瀉葉引起大鼠慢性腹瀉試驗(yàn)[3]健康SD大鼠60只,隨機(jī)分成 6組,即對(duì)照組,模型組,思密達(dá)組,桃花止瀉顆粒高、中、低劑量(4,2,1 g/k g)劑量組,每組 10只,♀♂各半。按 20mL/k g灌服200g/L番瀉葉浸劑,1次/d,連續(xù) 7 d。在灌服 3d后,禁食不禁水 32 h,由肛門(深入 8c m)注入 80g/L的乙酸 0.5mL,捏緊大鼠肛門,倒提 20s。造模同時(shí)每天在給200g/L番瀉葉浸劑4h后給予相應(yīng)藥物治療7 d,第 8天檢測(cè)大鼠稀便率、血清 D-木糖含量、淀粉酶活性、琥珀酸脫氫酶比活性等相關(guān)指標(biāo)。

大黃引起小鼠慢性腹瀉試驗(yàn)[4]健康 K M小鼠 60只,隨機(jī)分成 6組,即對(duì)照組,模型組,思密達(dá)組,桃花止瀉顆粒高、中、低劑量(5.85、2.93、1.46 g/k g)劑量組, 每組 10只,♀♂各半。除正常對(duì)照組外,其余各組小鼠均每天灌胃 1 g/mL大黃煎劑 0.5mL/20 g。7 d后然后灌胃給藥,連續(xù) 5 d,模型對(duì)照組給予等量生理鹽水。末次給藥前 12 h禁食第 5天每只小鼠灌胃 1 g/mL大黃 0.5mL,1 h后給藥。每只小鼠置入墊有潔凈濾紙的鼠籠內(nèi),1 h更換墊紙 1次,觀察記錄6 h內(nèi)濾紙上的稀便點(diǎn)數(shù)及動(dòng)物排便情況。

2 結(jié) 果

2.1 桃花止瀉顆粒對(duì)番瀉葉引起大鼠慢性腹瀉及消化吸收功能的影響

正常組大鼠活潑喜動(dòng),皮毛光亮,無(wú)異常。各組大鼠一般癥狀變化造模大鼠第 2天出現(xiàn)腹瀉、稀便,個(gè)別可見(jiàn)血便,伴見(jiàn)精神委靡,豎毛,拱背,食欲差,蜷臥少動(dòng)。給予藥物治療后,稀便明顯減少,精神好轉(zhuǎn),食欲增強(qiáng)。以各組大鼠稀便率分別記錄造模 7 d后給予藥物治療后不同時(shí)間各組的大鼠干、濕糞便粒數(shù),計(jì)算稀便率。造模模型組出現(xiàn)嚴(yán)重稀便,桃花止瀉顆粒 4,2,1 g/k g劑量組均較模型組明顯改善,并呈一定的劑量依賴性。其中桃花止瀉顆粒高劑量組 4 g/k g組與思密達(dá)組 4g/k g劑量組效果最顯著。結(jié)果見(jiàn)表 1。造模后,模型組 D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性明顯下降(P＜0.01)。給予藥物治療后,各組大鼠血清D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性明顯升高。結(jié)果見(jiàn)表 2。

2.2 桃花止瀉顆粒對(duì)大黃引起小鼠慢性腹瀉影響

小鼠均每天灌胃 1 g/mL大黃煎劑 0.5mL/20 g,7 d后動(dòng)物出現(xiàn)食欲減退、活動(dòng)減少、泄瀉、豎毛拱背、毛色失澤等癥狀。給予藥物治療后,小鼠稀便點(diǎn)數(shù)減少。桃花止瀉顆粒治療組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)隨著治療劑量的升高呈減少趨勢(shì)。在治療后 2、3、4 h時(shí)間段,模型組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)分別為6.58±1.22、7.34±0.41、3.26±0.96。與模型組相比,桃花止瀉顆粒高、中、低劑量組有顯著性差異(P＜0.01,P＜0.05)。見(jiàn)圖 1。桃花止瀉顆粒高劑量治療組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)分別為 2.92±0.99、3.01±0.67、1.98±1.34,陽(yáng)性藥思密達(dá)治療組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)為分別 2.98±1.21、3.19±1.01、1.93±0.92。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,桃花止瀉顆粒高劑量治療組與陽(yáng)性藥思密達(dá)治療組沒(méi)有差別(P＞0.05)。說(shuō)明桃花止瀉顆粒具有良好的腹瀉抑制作用。見(jiàn)圖 1。

表1 桃花止瀉顆粒對(duì)番瀉葉引起大鼠腹瀉治療后稀便率比較(±s)

表1 桃花止瀉顆粒對(duì)番瀉葉引起大鼠腹瀉治療后稀便率比較(±s)

與對(duì)照組比較,##P＜0.01；與模型組比較,**P＜0.01；*P＜0.05。

組別 劑量/(g/k g)動(dòng)物數(shù)/只時(shí)間1～24 h 24～48 h 48～72 h 72～96 h 96～120 h 120～144 h 144～168 h對(duì)照組 — 10 0 0 0 0 0 0 0模型組 — 10 0.68±0.03##0.74±0.05##0.78±0.04##0.81±0.06##0.88±0.08##0.89±0.02## 0.93±0.05##思密達(dá)組 4 10 0.34±0.06**0.25±0.07**0.23±0.06**0.21±0.04**0.18±0.02**0.15±0.03**0.09±0.07**桃花止瀉顆粒 4 10 0.31±0.08**0.26±0.06**0.22±0.05**0.19±0.05**0.17±0.04**0.12±0.07**0.10±0.05**桃花止瀉顆粒 2 10 0.38±0.06**0.35±0.07**0.31±0.09**0.27±0.05**0.25±0.07**0.19±0.04**0.18±0.06**桃花止瀉顆粒 1 10 0.55±0.03 0.48±0.06* 0.48±0.04*0.43±0.05**0.38±0.07**0.36±0.05**0.33±0.04**

表2 各組大鼠血清 D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性的表達(dá)(±s,n=10)

表2 各組大鼠血清 D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性的表達(dá)(±s,n=10)

與對(duì)照組比較,##P＜0.01；與模型組比較,**P＜0.01；*P＜0.05。

組別 劑量/(g/k g)動(dòng)物數(shù)/只D-木糖含量/(m m o l/L)淀粉酶活性/(μ k a t/L)琥珀酸脫氫酶比活性/(μ k a t/L)對(duì)照組 — 10 0.8 342±0.2 351 122.57±2.56 492.3±116.5模型組 — 10 0.4 126±0.1 433## 110.87±2.11# 164.9±101.2##思密達(dá)組 4 10 0.7 883±0.1 932** 121.25±2.35* 459.6±99.8**桃花止瀉顆粒 4 10 0.7 869±0.1 846** 122.03±2.19** 468.2±123.9**桃花止瀉顆粒 2 10 0.7 128±0.2 209** 120.65±1.92* 411.6±144.9**桃花止瀉顆粒 1 10 0.6 539±0.1 923* 119.32±2.38* 401.2±112.8**

圖1 桃花止瀉顆粒對(duì)慢性腹瀉小鼠排便情況的影響

3 討 論

桃花止瀉顆粒是以東漢著名醫(yī)學(xué)家張仲景治療腹瀉名方"桃花湯"為基礎(chǔ),通過(guò)處方優(yōu)化、工藝篩選和劑型改革,結(jié)合現(xiàn)代超微粉碎技術(shù)而研制出的口服抗腹瀉藥物。該制劑主要由赤石脂、干姜、粳米等藥味組成,具有益氣健脾、澀腸止瀉之功效。臨床主要用于治療細(xì)菌、病毒引起的急慢性腹瀉及脾虛型遷延性腹瀉。

本實(shí)驗(yàn)在大鼠慢性腹瀉模型基礎(chǔ)上,通過(guò)觀察桃花止瀉顆粒對(duì)慢性腹瀉大鼠稀便率和消化吸收功能及對(duì)小鼠稀便點(diǎn)數(shù)的影響,探討其對(duì)慢性腹瀉的治療作用。D-木糖是一種戊糖,口服后經(jīng)小腸吸收,在體內(nèi)不被肝臟代謝,經(jīng)腎臟排出,故血清D-木糖含量是與小腸吸收功能成正相關(guān)的較為敏感和特異的檢測(cè)指標(biāo)[5,6]。淀粉酶活性是反映消化酶分泌情況較為敏感和特異的檢測(cè)指標(biāo)[7,8]。琥珀酸脫氫酶是細(xì)胞線粒體內(nèi)膜氧化磷酸化的標(biāo)志酶之一,其比活性可以反映細(xì)胞氧化磷酸化供能情況[9,10]。從表 1、表 2我們可看到上述指標(biāo)的變化情況,造模成功。未經(jīng)治療的模型組病變最重,桃花止瀉顆粒 4,2,1 g/k g劑量組均有不同程度的改善,其中桃花止瀉顆粒 4 g/k g劑量組作用最為明顯。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),大黃水煎液可誘導(dǎo)小鼠慢性腹瀉。分別給予高、中、低劑量桃花止瀉顆?？擅黠@降低由于灌服大黃引起的稀便點(diǎn)數(shù)。與模型組對(duì)照,有顯著性差異。證明桃花止瀉顆粒具有良好的腹瀉抑制作用。

[1] 朱柏林.慢性泄瀉的辨證治療[J].浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1997,20(2)：16-18.

[2] 趙 敏,趙艷玲,李永綱,等.桃花止瀉顆粒聯(lián)合環(huán)丙沙星治療感染性腹瀉 38例[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2009,28(2)：202-203.

[3] 田佳鑫,馬增春,王宇光.三種脾虛泄瀉證模型大鼠消化系統(tǒng)功能改變的比較[J].中國(guó)臨床康復(fù),2006,10(39)：129-131.

[4] 吳素珠,肖文霞,廖晶晶,等.痛瀉藥方治療小鼠應(yīng)激腹瀉的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥信息,2008,25(1)：75-78.

[5] 蔡華芳,蔣幼芳.小兒泄瀉停沖劑的止瀉及改善腸道吸收作用[J].兒科藥學(xué)雜志,2005,11(6)：3-4.

[6] 朱曙東,李彬裴,喬 樵.云母粉對(duì)脾虛泄瀉證大鼠淀粉酶、木糖的影響[J].浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,26(6)：46-47.

[7] 張 翥,馬繼偉,李寅超.溢尿停對(duì)實(shí)驗(yàn)性脾虛SD大鼠胃腸功能的影響[J].遼寧中醫(yī)雜志,2004,31(8)：703-704.

[8] 胡琳琳,高云芳,何志仙.三種脾虛證模型小鼠消化吸收功能改變的比較研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2005,25(9)：813-816.

[9] 李 霞,汝明權(quán).脾虛型大白鼠腮腺的細(xì)胞學(xué)研究[J].濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1996,18(4)：245-249.

[10] 劉旺根,王紅霞,王雪萍.黃芪建中湯對(duì)大鼠脾虛證胃粘膜酶組織化學(xué)的影響[J].浙江中醫(yī)雜志,2004,28(8)：355-356.