鈣和維生素D對肉雞脂質(zhì)過氧化及血糖血脂的影響

張淑云，王 安，陳 娟，郭 麗

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，哈爾濱 150030）

血脂升高在動脈粥樣硬化和冠心病等形成過程中起重要作用，高血脂可破壞體內(nèi)自由基產(chǎn)生和清除的平衡。而自由基過多導(dǎo)致的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)在糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)病中起著重要的作用[1－2]?？梢娋S持機(jī)體正常的血脂及防止脂質(zhì)過氧化對動物的的健康具有重要的意義。

近年來的研究表明，維生素D（VD）和鈣具有一定的抗氧化作用，鈣在降血脂方面也具有重要的作用。孫長顥等研究表明，飼喂一定水平的鈣可降低大鼠血清中總膽固醇和甘油三酯的含量，改善高胰島素血癥，從而抑制高脂膳食誘導(dǎo)的肥胖[3]。目前對于VD和鈣這方面作用的研究多集中在鼠方面，在肉雞方面研究較少。另外，維生素D和鈣之間具有相互作用，目前對于兩者的交互作用對機(jī)體的抗氧化作用等方面的研究還未見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)通過研究VD和鈣及其交互作用對愛拔益加（AA）肉雞脂質(zhì)過氧化及血糖血脂的影響，探索肉雞日糧中VD和鈣的合理添加量，為肉雞的健康養(yǎng)殖提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物與分組

本試驗(yàn)選用健康、體重相近的4周齡愛拔益加（AA）肉雞 144只隨機(jī)分為4個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6只雞，采用2×2完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在基礎(chǔ)日糧中設(shè)2個(gè)鈣水平，分別為適鈣（0.90%）、高鈣（1.15%）；設(shè) 2個(gè)維生素 D水平，分別為適維生素 D（750 U·kg－1）、高維生素 D（5 000 U·kg－1）。即適 Ca適維生素 D 組（Ⅰ）、適鈣高維生素 D組（Ⅱ）、高鈣適維生素D組（Ⅲ）、高鈣高維生素D組（Ⅳ）。

1.2 基礎(chǔ)日糧

基礎(chǔ)日糧參考 NRC（1994）和我國（2004）家禽營養(yǎng)需要推薦水平配制，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表 1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)期為 4周（4～7周齡）。試驗(yàn)過程按肉雞常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫，試驗(yàn)雞飼養(yǎng)于三層層疊式金屬籠中，每個(gè)籠子飼養(yǎng)3只雞。

人工喂料，管道式自動飲水，保證試雞供料和飲水充足，光照和溫度適宜，保持通風(fēng)暢通，避免驚嚇和干擾，且各試驗(yàn)組條件保持一致，其余同肉雞常規(guī)管理。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 測定指標(biāo)與方法

試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只雞，于清晨空腹稱重，翅下靜脈采血10 mL，37℃水浴30 min后，3 000 rpm離心15 min，將所得血清－20℃保存?zhèn)溆?。采血后對試?yàn)雞進(jìn)行屠宰，取其肝臟，－20℃下保存?zhèn)溆谩Ｑ搴透闻K總抗氧化能力（TAOC）、丙二醛（MDA）含量、過氧化氫酶（CAT）在UV－2401紫外可見分光光度計(jì)上進(jìn)行測定，所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所?？偰懝檀迹–HO）、甘油三酯（TG）、葡萄糖（Glu）在日立CL7170型全自動生化分析儀上測定，所用試劑盒均購自中生北控生物科技股份有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 8.0軟件的ANOVA法進(jìn)行兩因素方差分析，用 Duncan′s極大復(fù)級差法（RRS）進(jìn)行多重比較，所得結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 鈣和維生素D對肉雞血清脂質(zhì)過氧化的影響

鈣和維生素D對肉雞血清脂質(zhì)過氧化的影響見表2。

由表 2可知，鈣對血清中 T－AOC、CAT和MDA影響均不顯著（P＞0.05），隨鈣添加量的增加，T－AOC和CAT活性均有降低趨勢，維生素D對血清中T－AOC、CAT和MDA影響也不顯著（P＞0.05），但高水平維生素 D可升高 T－AOC和CAT活性，降低MDA含量。鈣和維生素D的交互作用對血清 T－AOC和CAT影響不顯著（P＞0.05），但對血清MDA影響極顯著（P＜0.01），在適鈣水平下增加維生素 D添加量，T－AOC和CAT活性升高，而MDA含量極顯著降低（P＜0.01）；但在高鈣水平下增加維生素D添加量，T－AOC和CAT活性降低，而MDA含量增加，可見適鈣高維生素D組血清抗脂質(zhì)過氧化能力最好。

表2 鈣和維生素D對血清T-AOC、CAT和MDA的影響

2.2 鈣和維生素D對肉雞肝臟脂質(zhì)過氧化的影響

鈣和維生素D對肉雞肝臟脂質(zhì)過氧化的影響見表3。

由表3可知，鈣對肝臟CAT和MDA影響不顯著（P＞0.05），但對 T－AOC 影響顯著（P＜0.05），高水平鈣可降低 T－AOC及CAT活性。維生素D對肝臟 T－AOC、CAT和 MDA影響均不顯著（P＞0.05），但高水平維生素D可升高肝臟 T－AOC和CAT活性，降低MDA含量。鈣和維生素 D的交互作用對肝臟 CAT影響不顯著（P＞0.05），但對 TAOC和MDA影響顯著（P＜0.05），適鈣水平下，增加維生素 D添加量可升高 T－AOC活性（P＜0.05）及CAT活性，顯著降低 MDA含量（P＜0.05）；但高鈣水平下增加維生素 D添加量，T－AOC和CAT活性降低，而MDA含量增加，可見適鈣高維生素D組肝臟抗脂質(zhì)過氧化能力最好。

表3 鈣和維生素D對肝臟T-AOC、CAT和MDA的影響

2.3 鈣和維生素D對肉雞血糖血脂含量的影響

鈣和維生素D對肉雞血糖血脂含量的影響見表4。

表4 鈣和維生素D對血清CHO、TG和Glu的影響

由表4可知，Ca對血清CHO、TG和Glu的影響均不顯著（P＞0.05），隨 Ca添加量的增加，CHO和TG略有降低趨勢，而Glu略有升高趨勢。VD對血清CHO、TG和Glu的影響均不顯著（P＞0.05），隨維生素D添加量的增加CHO、TG和Glu均略有降低趨勢。鈣和維生素D的交互作用對血清Glu的影響不顯著（P＞0.05），適量 Ca添加量下隨VD增加，血糖降低；鈣和維生素D的交互作用對血清CHO和TG影響顯著（P＜0.05），適量鈣添加量下增加維生素D添加量，CHO和TG降低，而高鈣添加量下增加維生素D添加量，CHO和TG會升高，適鈣高維生素D組血脂較其他組低。

3 討論

3.1 鈣和維生素D對脂質(zhì)過氧化及血糖血脂的影響

CAT作為抗氧化系統(tǒng)的重要酶系，可清除氧自由基，使細(xì)胞免受氧化；T－AOC則可反映機(jī)體整體的抗氧化能力；而MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，其含量可間接反映細(xì)胞損傷程度。高血脂高血糖常常是一些疾病的誘導(dǎo)因素，而血液中CHO和TG可直接反應(yīng)機(jī)體脂肪的代謝狀況[4]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，高水平鈣對血清和肝臟MDA幾乎沒有影響，但可降低T－AOC、CAT活性；高水平鈣可降低血清CHO和TG，但會升高Glu。這說明添加高水平鈣雖然有降血脂的趨勢，但對降低血糖和抗脂質(zhì)過氧化沒有作用。細(xì)胞內(nèi)鈣離子在細(xì)胞膜等結(jié)構(gòu)脂質(zhì)過氧化發(fā)生的過程中起著重要的作用，鈣可提高心肌細(xì)胞抗氧化酶系的活性，但對MDA的影響甚微[5－6]。飼糧中鈣添加過量會對動物機(jī)體產(chǎn)生一定損傷，因此在動物飼糧中應(yīng)適當(dāng)限制鈣的添加量[7]。Itoh等研究發(fā)現(xiàn)，日糧限飼鈣可顯著上調(diào)超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶的表達(dá)，但對過氧化氫酶沒有顯著影響[8]。鈣與食物中的磷在一定條件下可形成不溶的沉淀物，然后與膽汁酸結(jié)合在一起隨糞便排出，導(dǎo)致合成脂肪酸的膽固醇量增加，內(nèi)源性膽固醇合成減少，使血液膽固醇濃度降低[9]。高鈣通過減少腸道脂質(zhì)的吸收而降低血脂水平和組織中的脂質(zhì)含量[10]。在脂肪組織中鈣對于胰島素介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)是必不可少的，只有當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度控制在一個(gè)較窄的范圍內(nèi)時(shí)，才能使胰島素介導(dǎo)的各項(xiàng)功能達(dá)到最佳，這也可能是本試驗(yàn)高水平鈣未能降低血糖的原因[11]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，高水平維生素D可升高血清和肝臟T－AOC和CAT活性，降低MDA含量，降低血清CHO、TG和Glu水平，但作用均不顯著。這說明高水平維生素D不僅有降低血糖和血脂的作用，還可在一定程度上抵抗脂質(zhì)過氧化。研究發(fā)現(xiàn)，維生素D是細(xì)胞膜質(zhì)抗氧化劑，可以防止鐵依賴性脂質(zhì)過氧化，從而防止自由基對細(xì)胞的損傷，維生素D被認(rèn)為是膽固醇、麥角固醇、三苯氧胺，并與抗癌有關(guān)，可見維生素D也是以與膽固醇結(jié)構(gòu)相似的1,25(OH)2－VD3形式來發(fā)揮抗氧化作用[12－13]。呂錦芳等研究發(fā)現(xiàn)，隨蛋雞日糧中維生素D水平的增加，血清中總膽固醇逐漸降低[14]。這與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。維生素D及其代謝產(chǎn)物可通過維生素D受體直接作用于胰島β細(xì)胞，影響胰島素的分泌，這可能是高水平維生素D降低血糖的原因[15]。

3.2 鈣和維生素D的交互作用對脂質(zhì)過氧化及血糖血脂的影響

本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，鈣和維生素D的交互作用可顯著影響MDA、CHO和TG（P＜0.05），在適鈣水平下增加維生素D添加量， T－AOC和CAT活性升高，MDA、CHO、TG和Glu降低，適鈣高維生素D處理組的降血脂血糖能力及抗脂質(zhì)過氧化能力均好于其他組。楊煥等研究發(fā)現(xiàn)，維生素D通過促進(jìn)鈣吸收對脂質(zhì)代謝產(chǎn)生影響，在普鈣基礎(chǔ)上補(bǔ)充一定劑量維生素D可降低血液TG含量，在前15 d可降低血液膽固醇含量；但在高鈣基礎(chǔ)上補(bǔ)充同劑量維生素D則對脂質(zhì)代謝有不良影響[10]。鈣和維生素D攝入不足可破壞胰島β細(xì)胞內(nèi)外鈣離子池的平衡，影響胰島素的正常釋放，在葡萄糖負(fù)荷增加時(shí)這一作用尤其明顯[15]。這與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。Rama Rao等研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞日糧中添加亞理想鈣和磷水平時(shí)，當(dāng)維生素D添加水平高于肉雞推薦水平時(shí)可以滿足肉雞的營養(yǎng)需要，且隨維生素D3水平的增加，肝臟中鐵、鋅和錳的沉積量呈非線性升高，這可能也是高維生素D適Ca組能增強(qiáng)生長肉雞抗氧化性能的原因[16]。

4 小結(jié)

高水平鈣有降血脂的趨勢，但對降低血糖和抗脂質(zhì)過氧化沒有作用；而高水平維生素D不僅有降低血糖和血脂的作用，還可在一定程度上抵抗脂質(zhì)過氧化。

鈣和維生素D的交互作用可顯著影響MDA、CHO和TG（P＜0.05），適鈣高維生素D組降低血脂血糖的效果及抗脂質(zhì)過氧化能力均好于其他組。

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