脂肪酸鈣對瘤胃發(fā)酵及羧甲基纖維素酶活性的影響

青 島 農(nóng) 業(yè) 大 學 孫國強 呂永艷

上海市肉牛育種中心 劉建雷

本試驗通過測定瘤胃液pH、氨態(tài)氮（NH3-N）、揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度以及羧甲基纖維素酶活性，研究日糧中添加不同水平脂肪酸鈣對綿羊瘤胃發(fā)酵及羧甲基纖維素酶活性的影響，旨為其在綿羊日糧中適宜添加量的確定提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 選用年齡相同，裝有永久性瘤胃瘺管的健康小尾寒羊4只，平均體重為（50±2.84）kg。

1.2 試驗動物和飼養(yǎng)管理 試驗精料組成為玉米60%，麩皮10%，豆粕25%，預混料5%。試驗羊粗料為全株玉米青貯和花生蔓。精料400 g/d·頭，全株玉米青貯4 kg/d·頭，花生蔓0.8 kg/d·頭。試驗羊日糧干物質(zhì)飼喂量為體重的4%，即2 kg。單籠飼喂，自由飲水，每日喂料 2 次（08∶00 和 18∶00）。

1.3 棕櫚油脂肪酸鈣 試驗用棕櫚油脂肪酸鈣購自石家莊犇牛有限公司。

1.4 試驗設(shè)計 采用4×4拉丁方設(shè)計，分為4組，其中一組為對照組（CT）飼喂不添加棕櫚油脂肪酸鈣的基礎(chǔ)日糧，其余三組，即A組、B組和C組為試驗組，分別添加日糧干物質(zhì)的1%（20 g）、2%（40 g）、3%（60 g）的棕櫚油脂肪酸鈣，整個試驗設(shè)計分4期，每期13 d，其中預試期10 d，正試期為3 d。棕櫚油脂肪酸鈣分2次隨精料添加。

1.5 測定指標與方法 每期試驗的第12、13天的 08∶00、10∶00、12∶00、15∶00、18∶00 分別采集瘤胃液40 mL，四層尼龍布過濾后立即測定pH。然后將瘤胃液離心（4000 r/min離心15 min），上清液制樣以備測定瘤胃液NH3-N濃度、VFA濃度和羧甲基纖維素酶活性。

1.5.1 pH 用pH-5型pH計進行測定。

1.5.2 VFA 按照曹慶云和周武藝（2006）的氣相色譜法進行測定。

1.5.3 NH3-N 采用馮宗慈和高民（1993）的比色法測定。

1.5.4 羧甲基纖維素酶活性 按照汪水平和王文娟（2006）的方法測定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 數(shù)據(jù)采用Excel進行預處理后，采用SPSS進行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃液pH的影響結(jié)果見表1。表1顯示，一個飼喂周期內(nèi)，各組的pH平均值均大于6.4。與CT組相比，試驗組的pH平均值均略有降低，但無顯著差異（P＞0.05），各組pH值均呈先降低后升高的趨勢。

表1 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃內(nèi)pH的影響

2.2 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃液NH3-N濃度的影響 結(jié)果見表2。表2顯示，一個飼喂周期內(nèi)，各試驗組NH3-N濃度平均值均大于CT組，A組與CT組差異不顯著 （P＞0.05），C組極顯著高于CT組和 A組（P＜0.01），顯著高于B組（P＜0.05）。飼喂后2～4 h達到最高水平，隨后逐漸下降后又恢復至飼喂前水平。

2.3 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸的影響

2.3.1 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸（TVFA）濃度的影響 結(jié)果見表3。表3顯示，一個飼喂周期內(nèi)，A和B組TVFA濃度平均值與CT組差異不顯著（P＞0.05）。C組顯著高于CT和B 組（P ＜0.05），與 A 組無顯著差異（P ＜0.05）。

表2 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃內(nèi)NH3-N濃度的影響mg/100mL

表3 不同水平脂肪酸鈣對TVFA濃度的影響mmol/L

2.3.2 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃液乙酸與丙酸比例的影響 見表4。表4說明，各組瘤胃液乙酸與丙酸比例差異不顯著（P＞0.05）。

表4 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃乙酸丙酸比例（乙酸/丙酸）的影響

2.4 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃液羧甲基纖維素酶活性的影響 結(jié)果見表5。表5表明，一個飼喂周期內(nèi)，C組酶活性平均值最高，且顯著高于CT組和A、B兩組（P＜0.05）。A組、B組平均值與CT組差異不顯著（P＞0.05）。

表5 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃羧甲基纖維素酶活性的影響IU

3 討論

3.1 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃內(nèi)pH的影響瘤胃液pH是瘤胃內(nèi)發(fā)酵最重要的指標之一，瘤胃微生物在pH為6.4～7.0時活性最高。表1顯示，飼喂基礎(chǔ)日糧和添加不同水平脂肪酸鈣的日糧，對瘤胃內(nèi)pH無顯著影響 （P＞0.05），3個試驗組pH有所下降，但均大于6.4，因此不會影響瘤胃發(fā)酵，這與Schauff（1989）的研究結(jié)果一致。因此，本試驗日糧中添加1%、2%、3%的脂肪酸鈣不會對瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生影響?？赡芤驗橹舅徕}在瘤胃中的分解產(chǎn)生的不飽和脂肪酸的量不足以對瘤胃微生物造成毒害作用，即對瘤胃微生物沒有副作用，因此瘤胃發(fā)酵穩(wěn)定，所以瘤胃pH值在正常范圍內(nèi)。

3.2 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃內(nèi)NH3-N濃度的影響 本試驗中，不同水平脂肪酸鈣添加后瘤胃內(nèi)NH3-N平均濃度比對照組均有所提高，3%添加組顯著高于其他組，這與馮仰廉（2004）研究結(jié)果一致?？赡苁侵舅徕}在瘤胃的少量分解，不僅沒有抑制瘤胃微生物的活動，反而為瘤胃微生物提供了能量，增強瘤胃微生物消化能力，因而增強了其對日糧蛋白質(zhì)的降解，這與騰佳伍（2006）研究的結(jié)果一致。據(jù)報道，瘤胃最適NH3-N濃度為8～10 mg/100 mL，但5～30 mg/100 mL時也屬正常變動范圍，不影響微生物的活性（劉哲等，2005；苑文珠，2002）。本試驗各組發(fā)酵后的NH3-N濃度為6.04～9.73 mg/100 mL，均在正常變動范圍。

3.3 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃內(nèi)VFA濃度的影響

3.3.1 對TVFA濃度的影響 Martin（1996）研究指出，VFA能提供反芻動物總能量需要的70%～80%，本試驗中，C組顯著高于CT和A、B組，可能是添加3%的脂肪酸鈣后在瘤胃的少量分解，不但沒有對瘤胃微生物造成危害，反而為瘤胃微生物提供了能量，促進了瘤胃微生物的生長繁殖，增強瘤胃微生物的活力，因而飼料消化率提高，這也可用本試驗中C組羧甲基纖維素酶活性最強的結(jié)果來證實。添加A組和B組與對照組差異不顯著，可能是添加量少，對瘤胃微生物的生長繁殖沒有起到促進作用，這與Suhanff（1989）的結(jié)果一致。

3.3.2 對乙酸丙酸比例的影響 乙酸丙酸比例影響瘤胃液pH和瘤胃內(nèi)飼料的消化進而影響動物的生產(chǎn)性能，乙酸丙酸比例過高或過低，無論對于瘤胃發(fā)酵、飼料的消化利用還是動物生產(chǎn)性能的發(fā)揮都是不利的，乙酸丙酸比例的最適范圍是2.0～3.6，但是其變化范圍可為1.05～5.15，本試驗各組在各個時間點的乙酸丙酸比例變化范圍是3.19～4.43，均在正常范圍內(nèi)，其中C組的乙酸丙酸比例為3.50，在最適范圍內(nèi)。

3.4 不同水平脂肪酸鈣對瘤胃液羧甲基纖維素酶活性的影響 羧甲基纖維素酶和微晶纖維素酶是瘤胃中最重要的內(nèi)切和外切葡萄糖酶，羧甲基纖維素酶是內(nèi)切酶，能膨脹纖維素和羧甲基纖維素，并以隨機方式內(nèi)切纖維素聚合體并產(chǎn)生纖維素糊精、纖維素二糖及葡萄糖，可見羧甲基纖維素酶在纖維素消化過程中起著非常重要的作用。本試驗中，C組羧甲基纖維素酶活性顯著高于其他組（P＜0.05），可能是添加3%的脂肪酸鈣后，其在瘤胃中少量分解為瘤胃微生物的生長繁殖增加了能量和鈣，加之適宜的氨氮水平，使瘤胃微生物生長繁殖加快，活性增強，分泌的羧甲基纖維素酶增多，因而瘤胃液羧甲基纖維素酶活性高于其他組。本試驗中C組TVFA濃度最高的結(jié)果就是對上述推斷的佐證。

4 結(jié)論

添加不同水平棕櫚油脂肪酸鈣后對瘤胃pH影響不顯著，而對瘤胃NH3-N濃度影響顯著或極顯著，但均在正常范圍內(nèi)。添加3%的棕櫚油脂肪酸鈣可顯著提高瘤胃羧甲基纖維素酶活性及TVFA濃度，而各組間在乙酸丙酸比例上差異不顯著。因此，在本試驗設(shè)計條件下，棕櫚油脂肪酸鈣最適添加水平為日糧干物質(zhì)的3%。

[1]曹慶云，周武藝.氣相色譜測定羊瘤胃液中揮發(fā)性脂肪酸的方法研究[J].中國飼料，2006，4：26 ～ 28.

[2]馮仰廉.反芻動物營養(yǎng)學[M].北京：科學出版社，2004.337～356.

[3]馮宗慈，高民.通過比色法測定瘤胃液氨氮含量方法的改進[J].內(nèi)蒙古畜牧科學，1993，4：40 ～ 41.

[4]劉哲，張昌吉，郝正里，等.飼喂含不同秸稈的全日糧顆粒料對綿羊瘤胃及血液代謝參數(shù)的影響[J].中國飼料，2005，11：12～14.

[5]藤佳伍.過瘤胃脂肪對綿羊瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響[D].陜西：楊陵西北農(nóng)林科技大學，2006.

[6]汪水平，王文娟.瘤胃纖維降解相關(guān)酶活性的測定方法測定[J].中國飼料，2006，11：31 ～ 33.

[7]苑文珠.茶皂素對湖羊生產(chǎn)性能及瘤胃發(fā)酵的影響[D].杭州：浙江大學，2002.

[8]Martin van houtert.Challenging the retional for altering VFA rations in growing ruminants[J].Fd Mix，1996，4：1.

[9]Schauff D J.Effects of prilled fatty acids and calcium salts of fatty acids on rumen fermentation，nutrient digestibilities，milk production，and mink composition[J].J Dairy Sci，1989，72：917 ～ 927.