HER-2表達(dá)在乳腺癌輔助化療方案選擇中的作用

戴 攜，張言濤，秦 琴，張顯嵐

（桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普外二科，廣西 桂林 541001）

HER-2表達(dá)在乳腺癌輔助化療方案選擇中的作用

戴 攜，張言濤，秦 琴，張顯嵐?

（桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普外二科，廣西 桂林 541001）

目的：探討HER-2表達(dá)與乳腺癌不同方案輔助化療療效的關(guān)系,為患者篩選有效的化療方案。方法：應(yīng)用蒽環(huán)類和（或）紫杉類三種化療方案對308例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者進(jìn)行輔助化療，免疫組織化學(xué)SP法檢測標(biāo)本中HER-2的表達(dá)，中位隨訪45.00（13.2～94.1）個月,分析化療方案及病理學(xué)特征（HER-2狀態(tài)，激素受體狀態(tài),病理分期）與生存率的關(guān)系。結(jié)果：總復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率22.07%（68/308）,平均疾病進(jìn)展時間27.58個月。HER-2陽性患者中，蒽環(huán)類化療組無病生存率（DFS）135/191,紫杉類化療組DFS15/16（x2=3.938,P＜0.05）差異有顯著性；蒽環(huán)紫杉類聯(lián)合組DFS35/39與蒽環(huán)類組相比（x2=6.104,P＜0.05）差異有顯著性。對激素受體陽性的患者,用蒽環(huán)類化療組DFS（116/165）,與紫杉醇類化療DFS（19/20）（x2=5.517,P＜0.05）差異有顯著性。在腋窩淋巴結(jié)陽性的的患者中，蒽環(huán)類化療組無病生存率（DFS）73/113,紫杉類化療組DFS17/19（x2=4.638,P＜0.05）差異有顯著性；蒽環(huán)紫杉類聯(lián)合組DFS36/41與蒽環(huán)類組相比（x2=7.831,P＜0.01）差異有顯著性。結(jié)論：HER-2陽性乳腺癌患者對紫杉類化療藥物更敏感；紫杉類比蒽環(huán)類藥物對激素受體陽性的患者療效更好而對激素受體陰性的患者無明顯區(qū)別；蒽環(huán)紫杉聯(lián)合類和紫杉類藥物對淋巴結(jié)陽性者療效比蒽環(huán)類好，蒽環(huán)類和紫杉類及聯(lián)合類藥物對淋巴結(jié)陰性者療效相當(dāng)。

乳腺腫瘤；輔助化療；HER-2

1.3 免疫組化結(jié)果判定

HER-2蛋白定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì),可見胞膜胞漿同時染色,單獨胞漿染色不計為陽性,根據(jù)染色強度按陽性細(xì)胞百分比,將陽性細(xì)胞數(shù)＜25%定為陰性（-）；陽性細(xì)胞數(shù)在25%～50%之間定為弱陽性（+）；50%～75%定為中度陽性（++）；＞75%定為強陽性（+++），見圖1-4。

圖1 乳腺癌組織中HER-2陰性表達(dá)

圖2 乳腺癌組織中HER-2弱陽性表達(dá)

圖3 乳腺癌組織中HER-2中度陽性表達(dá)

圖4 乳腺癌組織中HER-2強陽性表達(dá)

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計處理,各指標(biāo)相互關(guān)系用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

記錄所有患者的臨床病理特征和化療方案,包括HER-2表達(dá)狀態(tài)、激素受體狀態(tài)、腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)。其中HER-2陽性246人、HER-2陰性62人，ER和（或）PR陽性221人、ER和PR均陰性87人。用紫杉類藥物化療者23人,用蒽環(huán)類藥物化療者237人，用紫杉聯(lián)合蒽環(huán)類藥物輔助化療者48人。在接受了蒽環(huán)和（或）紫杉醇化療的患者中,淋巴結(jié)陽性173人,淋巴結(jié)陰性135人，平均隨訪46.43個月,總復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率22.07%（68/308）,平均疾病進(jìn)展時間27.58個月。HER-2陽性患者中，蒽環(huán)類化療組無病生存率（DFS）135/191,紫杉類化療組DFS15/16（χ2=3.938,P＜0.05）差異有顯著性；蒽環(huán)紫杉類聯(lián)合組DFS35/39與蒽環(huán)類組相比（χ2=6.104, P＜0.05）差異有顯著性。對激素受體陽性的患者,用蒽環(huán)類化療組DFS（116/165）,與紫杉醇類化療組DFS（19/20）（χ2=5.517,P＜0.05）差異有顯著性。在腋窩淋巴結(jié)陽性的的患者中，蒽環(huán)類化療組無病生存率（DFS）73/113,紫杉類化療組DFS17/19（χ2=4.638,P＜0.05）差異有顯著性；蒽環(huán)紫杉類聯(lián)合組DFS36/41與蒽環(huán)類組相比（χ2=7.831,P＜0.01）差異有顯著性。在激素受體陰性組中，因紫杉組的樣本太少（3例）視統(tǒng)計結(jié)果無意義。應(yīng)用χ2檢驗分析患者在接受不同的輔助化療方案輔助化療后HER-2表達(dá)情況、激素受體狀態(tài)、腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)與無病生存率的關(guān)系（見表1）。

表1 三組化療方案無病生存率（DFS）與HER2表達(dá)、激素受體、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況的關(guān)系

3 討論

大量研究報道[4.5]HER-2的過表達(dá)可提高乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能,表現(xiàn)出較多的侵襲性臨床病理特征，將HER-2基因轉(zhuǎn)染到乳腺癌細(xì)胞系中，發(fā)現(xiàn)激活的HER-2基因通過促進(jìn)分泌細(xì)胞基底膜降解酶、改變整合素和黏合素的功能、激活絲分裂原活化蛋白激酶（MAPK）等途徑，逃避微環(huán)境的監(jiān)控，增強轉(zhuǎn)移潛力。在乳腺癌發(fā)生的早期階段,腋淋巴結(jié)陰性的乳腺癌組織里HER-2擴(kuò)增或過表達(dá)的比例不高,腋淋巴結(jié)陽性或Ⅳ期乳腺癌組織中HER-2的擴(kuò)增或表達(dá)更明顯[6]，HER-2已作為評價乳腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。在化療效果的影響方面,HER-2過表達(dá)患者對含蒽環(huán)類藥物的化療方案比較敏感。多中心研究表明接受含蒽環(huán)類藥物化療（FAC）的HER-2陽性患者,與HER-2陰性患者生存無顯著差異。但仍有相當(dāng)一部分HER-2陽性的患者在接受了含蒽環(huán)類藥物化療后出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。近年來,越來越多的研究提示含紫杉醇類的化療方案能進(jìn)一步改善預(yù)后。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)HER-2過表達(dá)乳腺癌具有特征性的臨床表現(xiàn),預(yù)后較差,對一些傳統(tǒng)化療藥物及激素致瘤的有效性改變[7]且NCCN指南中也對淋巴結(jié)陰性患者不建議使用紫杉類藥物化療，對腋窩淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移也已不作為建議使用紫杉類藥物化療的唯一指標(biāo)。BCIRG 001試驗[8]在對腋淋巴結(jié)陽性乳腺癌患者輔助治療中將蒽環(huán)類化療方案與紫杉類聯(lián)合蒽環(huán)類化療方案兩者相比較。中位隨訪33個月應(yīng)用TAC方案組比應(yīng)用CAF方案組的無病生存率提高了8%（P＜0.01）尤其對HER-2過表達(dá)組療效更為明顯（P＜0.01），但應(yīng)用紫杉類藥物不良反應(yīng)也明顯增高如脫發(fā)、神經(jīng)毒性等。但Van Poznak[9]對幾組應(yīng)用紫杉類化療藥物治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的回顧性研究顯示HER-2過表達(dá)不能預(yù)測腫瘤細(xì)胞對紫杉類藥物敏感性。這一相反的結(jié)論可能與HER-2受體存在的復(fù)雜信號網(wǎng)絡(luò)和配體對紫杉類耐藥性或敏感性出現(xiàn)的不同結(jié)果以及HER-2在不同細(xì)胞和組織表達(dá)不同的生物學(xué)作用有關(guān)。由于HER-2測定方法和分析標(biāo)準(zhǔn)不同以及評價者主觀偏差導(dǎo)致HER-2檢測結(jié)果的不一致,使得HER-2化療敏感性的結(jié)果不同。同時在不同的病例分析研究中,不同的統(tǒng)計學(xué)方法及病例數(shù)目的不足也造成了結(jié)果的偏差。因此深入研究HER-2與乳腺癌臨床病理因素及化療藥物之間的關(guān)系，在未來研究中建立標(biāo)準(zhǔn)化的測定和分析方法，有助于評估乳腺腫瘤的生物學(xué)行為及治療效果，尤其對淋巴結(jié)陰性但易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的這些高?；颊吆侠淼倪x擇術(shù)后化療方案。

本研究從HER-2、激素受體、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移三方面對三種化療方案的無病生存率進(jìn)行了對比。我們在研究中通過統(tǒng)計分析觀察到HER-2陽性的乳腺癌患者接受紫杉類比接受含蒽環(huán)類藥物化療獲得的無病生存率更高。在進(jìn)一步分層分析中,我們還發(fā)現(xiàn)紫杉類比蒽環(huán)類藥物對激素受體陽性的患者療效更好而對激素受體陰性的患者無明顯區(qū)別，提示化療與激素受體陽性狀態(tài)密切相關(guān)?；煼桨笇ER-2陽性患者的療效,提示含紫杉醇類化療能提高HER-2陽性腫瘤患者的無病生存期。在HER-2參與的乳腺癌信號傳導(dǎo)通路中,HER-2能增加氨酸激酶活性,增強癌細(xì)胞惡性表型的表達(dá),降低腫瘤細(xì)胞化療敏感性，紫杉類療效優(yōu)于蒽環(huán)類藥物可能與這一機(jī)制有關(guān)有待進(jìn)一步研究。紫杉類化療方案與蒽環(huán)類化療方案的療效在淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移上沒有明顯優(yōu)勢，這與多數(shù)研究報道不相符，通過加大樣本量可能會更具說服力。同時，我們的研究中發(fā)現(xiàn)仍有一部分患者在應(yīng)

book=28,ebook=16function in animals[J].PACE,2002,25：484.

用了紫杉類或紫杉聯(lián)合蒽環(huán)類藥物后疾病復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。HER-2的表達(dá)產(chǎn)物是一種酪氨酸激酶,對HER-2陽性尤其是過表達(dá)的患者通過酪氨酸激酶抑制劑可以阻斷HER-2信號傳導(dǎo)通路。因此，HER-2指標(biāo)對乳腺癌的特異性治療如分子靶向治療、多肽及DNA疫苗的免疫治療等具有重要意義，在臨床治療中也有廣闊應(yīng)用空間。

本研究是回顧性分析，為更好的研究HER-2與乳腺癌化療方案的關(guān)系尚有待通過前瞻性研究來解決選擇的偏移問題。

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The Role of HER-2 Expression in The Program Selection for Breast Cancer Ad juvant Chemotherapy

DAI Xie,ZHANG Yan-Tao,QIN Qin ZHANG Xian-Lan
（General Surgery Two,Affiliated Hospital of Guilin Medical College,Guilin 541001,China）

Objective To explore the relationship between HER-2 expression and the efficacy of different breast cancer adjuvant chemotherapy for screening of effective chemotherapy.M ethods 308 cases ofⅠ-Ⅲbreast cancer patients were adjuvant chemotherapyed with three kinds of programs of anthracycline and （or）taxane, HER-2 expression was detected by immunohistochemistry SP samples,the median follow-up 45.00 （13.2～94.1）months,and analysis the relationship among chemotherapy and pathological features （HER-2 status,hormone receptor status,pathological stage）and the survival rate.Results Overall recurrence rate 22.07% （68/308）,the average time to progression 27.58 months.In HER-2 positive patients,disease-free survival in anthracycline chemotherapy groupis DFS （135/191）,in taxane group chemotherapyis DFS （15/16）,and the difference was significant（x2=3.938,P＜0.05）；the difference between DFS（35/39）in Anthracycline-taxane combination group and that in anthracycline chemotherapy group was significant（x2=6.104,P＜0.05）.In hormone receptor-positive patients,the difference between DFS（116/165）in anthracycline-chemotherapy group and DFS （19/20）in taxol

原癌基因HER-2也稱為c-erbB-2或HER-2/neu,HER-2基因定位于人類染色體17q21-22,編碼具有酪氨酸激酶活性的細(xì)胞膜糖蛋白,分胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域三部分[1]，HER-2分子在細(xì)胞表面以單體形式存在，此時基本無活性,當(dāng)其與細(xì)胞外功能區(qū)的配體結(jié)合形成穩(wěn)定的受體二聚體后才能產(chǎn)生活化信號，HER-2異質(zhì)二聚體能明顯減弱EGFR（上皮生長因子受體）與cab1的偶聯(lián),減少EGFR在細(xì)胞代謝過程中的降解,從而加快EGFR回到細(xì)胞膜上的循環(huán),促使EGFR在細(xì)胞膜過表達(dá),從而參與對細(xì)胞生長、繁殖和分裂的調(diào)控以及控制腫瘤的生長[2]。研究表明[3]HER-2可作為乳腺癌的預(yù)后評價指標(biāo)，臨床上HER-2陽性尤其是過表達(dá)的乳腺癌患者往往表現(xiàn)為生存率低、腫瘤惡性程度高、病情進(jìn)展迅速、易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、化療緩解期縮短。本研究應(yīng)用蒽環(huán)類和（或）紫杉類三類化療方案對310例局部進(jìn)展期乳腺癌進(jìn)行輔助化療,探討HER-2表達(dá)狀態(tài)與乳腺癌不同方案輔助化療療效的關(guān)系,為患者篩選有效的化療方案。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

本組308例取2002年至2008年我院行根治性手術(shù)或保乳手術(shù)加根治性放療的Ⅰ～Ⅲ期女性患者,均經(jīng)病理學(xué)確診為浸潤性乳腺癌,排除原位癌和特殊癌。全組平均年齡48.67±10.46（23～79）歲,中位年齡48.0歲。所有標(biāo)本均有DCC法檢測的雌激素受體（ER）值,陽性標(biāo)準(zhǔn)＞10pmol/mg。手術(shù)時有同側(cè)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移158例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者135例。根據(jù)2008年NCCN標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期患者105例,Ⅱ期161例,Ⅲ期42例。將308例患者分蒽環(huán)類化療方案（CTX,CEF,CAF,AC）,含紫杉醇類化療方案（TC,T），蒽環(huán)聯(lián)合紫杉類（TTC,TEC,TAC,TA,TE）三組化療，標(biāo)準(zhǔn)化療六個療程。T1、T2期和（或）腋淋巴結(jié)＜4個的患者（低危組）以蒽環(huán)類方案為主,T3、T4期和（或）腋淋巴結(jié)≥4個的患者（高危組）以紫杉類和（或）蒽環(huán)類藥物為主。隨訪截止日期為2009年12月30日,隨訪期（46.43±20.98）個月,中位隨訪45.00（13.2～94.1）個月。在隨訪期間有68例（22.07%）出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移或死于乳腺癌,隨訪期間死于其他原因、失訪或研究截止者,均計為刪失數(shù)據(jù)。

1.2 試劑和方法

采用MaxVisionTM快捷免疫組化法,根據(jù)聚合物技術(shù)把過氧化物酶與抗兔IgG分子結(jié)合在多聚物上形成多聚物分子。石蠟切片用檸檬酸緩沖液高溫高壓進(jìn)行抗原修復(fù)。免疫組化方法所用試劑抗HER-2單克隆抗體購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司,工作濃度為1∶100；快捷免疫組化MaxVisionTM試劑盒為福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司產(chǎn)品，檢測程序按說明書進(jìn)行,顯色劑為DAB，陰性對照用TBS代替一抗。具體步驟為：1石蠟切片脫蠟和水化后，用PBS（pH7.4）液沖洗三次，每次3分鐘。2用檸檬酸緩沖液高溫高壓進(jìn)行抗原修復(fù)。3.對內(nèi)源性過氧化物酶含量高的組織，每張切片加一滴13%過氧化氫，室溫下孵育10分鐘，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS沖洗三次，每次三分鐘除去PBS液4.每張切片加一滴第一抗體，室溫下孵育60分鐘。5. PBS沖洗三次，每次3～5分鐘。除去PBS液，每張切片加一滴即用型MaxVisionTM試劑，室溫下孵育10～15分鐘。PBS沖洗三次，每次3分鐘。6.除去PBS液，每張切片加2滴新鮮配制的DAB溶液，顯微鏡下觀察3～5分鐘。7.自來水沖洗，蘇木素染色，PBS沖洗返藍(lán)。切片經(jīng)過梯度酒精脫水干燥，二甲chemotherapy was significant（x2=5.517,P＜0.05）.In the axillary lymph node-positive patients,the difference of the disease-free survival between DFS （73/113）in anthracycline chemotherapy group and DFS17/19 in taxane chemotherapy was significant（x2=4.638,P＜0.05）；the difference between DFS（36/41）in anthracycline-taxane combination group and that in anthracycline was significant （x2=7.831,P＜0.01）.Conclusion Breast cancer patients of HER-2 positive were more sensitive to taxane chemotherapy drug,The efficacy of taxane on the hormone receptor-positive patients is better than that of anthracycline,and the efficacy of taxane and anthracycline on the hormone receptor-negative patients was not significantly different.The efficacy of anthracycline-taxane combined and taxane on lymph node-positive is better than that in anthracycline,and the efficacy of anthracycline and taxane and the combined drugs on lymph node-negative is rather.

Breast cancer；Adjuvant chemotherapy；HER-2苯透明，中性樹膠封固。

R737.9

A

1673-016x（2010）01-0022-04

2009-12-26

廣西省科研課題（Z2009062）

戴攜（1982-），男，湖南長沙人，在讀碩士生，主要從事外科臨床工作，E-mail：66687712@99.com

＊通訊作者：張顯嵐，男，副主任醫(yī)師，E-mail：xianlan-zhang@tom.com