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    西洋參湯對(duì)脾虛證大鼠機(jī)體的調(diào)節(jié)作用初探*

    2010-08-22 05:04:36滕靜如晉志高王少君
    關(guān)鍵詞:西洋參睪酮動(dòng)物模型

    滕靜如,王 昕,晉志高△,李 艷,劉 紅,王少君

    (1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所,北京 100700;2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 針灸研究所,北京 100700)

    西洋參湯對(duì)脾虛證大鼠機(jī)體的調(diào)節(jié)作用初探*

    滕靜如1,王 昕2,晉志高2△,李 艷1,劉 紅1,王少君1

    (1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所,北京 100700;2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 針灸研究所,北京 100700)

    目的:觀察西洋參湯對(duì)脾虛證大鼠血睪酮含量的影響,探討其治療脾虛證的作用機(jī)理。方法:選用成年Wistar大鼠26只,隨機(jī)分為4組。其中脾虛造模組8只,西洋參治療組6只,自然恢復(fù)組6只,正常對(duì)照組6只。除正常對(duì)照組外,其余3組均按“彭式”方法建立脾虛證模型,觀察動(dòng)物的一般狀況。西洋參湯治療11d后,采用放射免疫分析法測(cè)定血清中睪酮(T)的含量,以此來(lái)說(shuō)明對(duì)脾虛證的影響。結(jié)果:西洋參湯可使脾虛大鼠血清中睪酮的水平升高,明顯高于模型對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論:脾虛證可導(dǎo)致睪酮水平下降,經(jīng)用西洋參湯治療后,激素水平可以得到恢復(fù)。

    脾虛證;西洋參;睪酮4

    自20世紀(jì)80年代研制脾虛動(dòng)物模型以來(lái),脾虛動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究工作取得了較豐富的經(jīng)驗(yàn)。從最早利用苦寒瀉下中藥大承氣湯(大黃、芒硝、枳實(shí)、厚樸)灌服動(dòng)物,復(fù)制脾虛證動(dòng)物模型[1,2],用四君子湯(人參、白術(shù)、茯苓、甘草)復(fù)?。?]以做反正。到最近常用的多因素模型即“彭氏”[4]偏食法(先食酒、后食醋)建立大鼠脾虛動(dòng)物模型,用西洋參湯治療。雖然思路不同、方法各異,但其研究在脾虛動(dòng)物模型的不同研究階段都起到一定的推動(dòng)作用,為脾虛證的研究積累了寶貴資料。

    本研究按“彭式”方法建立大鼠脾虛動(dòng)物模型,動(dòng)物不但具有中醫(yī)脾虛證的特征,而且可用西洋參湯復(fù)健以作反證用以治療。用放射免疫法測(cè)定脾虛證大鼠血清中睪酮(T)的含量,以此說(shuō)明對(duì)脾虛證的影響。睪酮是雄性激素的代表,它與人體的運(yùn)動(dòng)能力、肌肉力量的增長(zhǎng)、疲勞消除密切相關(guān)。

    我國(guó)《藥性考》述記“洋參……味類人參,惟性寒、甘苦,補(bǔ)陰退熱。”西洋參味苦性涼入心肺腎經(jīng),功能滋陰降火益氣生津,為滋補(bǔ)強(qiáng)體、生津止渴、補(bǔ)血用藥,可以補(bǔ)益脾胃陽(yáng)氣,調(diào)和陰陽(yáng),扶正祛邪,同時(shí)還能抗缺氧、抗疲勞、增強(qiáng)機(jī)體耐力。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物分組及模型復(fù)制

    選用成年Wistar雄性大鼠26只,由中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)動(dòng)物中心提供,體重200g,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為4組,其中脾虛造模組8只,中藥治療組6只,自然恢復(fù)組6只,正常對(duì)照組6只。除正常對(duì)照組外,其余3組均按“彭式”方法造模。模型組于實(shí)驗(yàn)第1天用50%醫(yī)用乙醇1ml/100g體重灌胃。第2天以后,每天用山西白醋(pH=3)1ml/100g體重灌胃,第11天處死動(dòng)物,斷頭取血。正常組于實(shí)驗(yàn)的第1天1ml/100g體重生理鹽水灌胃,1次/d,第11天處死動(dòng)物。中藥治療組前10d造模,同模型組,從第11天起停止造模,給予西洋參湯治療,西洋參湯1ml/100g體重灌胃,1次/d,第21天處死動(dòng)物。自然恢復(fù)組前10d造模,同模型組,第11天停止造模,改用生理鹽水1ml/100g體重灌胃,1次/d,第21天處死動(dòng)物。

    1.2 中藥制劑

    中藥西洋參計(jì)量 2g/d,喂 10d。稱取西洋參200g,冷水浸泡 1h,煎煮 20min,過(guò)濾、濃縮提取液200ml,生藥含量為1g/ml。冰箱內(nèi)保存。

    1.3 大鼠冷水力竭實(shí)驗(yàn)

    各組大鼠處死前放入長(zhǎng)1m寬0.8m深0.8m水溫18℃的水池中,以大鼠入水到頭部沉入水中10s不能浮出水面的時(shí)間為力竭時(shí)間。

    1.4 取材

    斷頭取血,在3500r/min溫度4℃的條件下離心15min后取上清液,保存在-20℃冰箱中,待用于各種激素的濃度測(cè)定。

    1.5 放免測(cè)定

    儀器用GC-911r放射免疫計(jì)數(shù)器,由中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)科技實(shí)業(yè)總公司生產(chǎn)。睪酮放射免疫分析藥盒由北京北方免疫試劑研究所提供,按照試劑盒說(shuō)明操作。

    1.6 數(shù)據(jù)處理

    各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,運(yùn)用配對(duì)樣本 t檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)的方法,均采用雙側(cè)檢驗(yàn),P<0.05被認(rèn)為所檢驗(yàn)的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 力竭試驗(yàn)

    表1顯示,在造模后期,大鼠出現(xiàn)攝食量減少、大便稀溏、神疲乏力、懶動(dòng)、畏寒、被毛枯槁、毛發(fā)疏散不潔、失去光澤、嗜臥、扎堆、喜聚堆、瞇眼等表現(xiàn)。有些大鼠還有易激惹、咬斗等現(xiàn)象。這與臨床上脾虛證的癥狀較相似。中藥組灌服西洋參湯治療后,上述癥狀有所改善。在冷水游泳力竭實(shí)驗(yàn)中,模型對(duì)照組和自然恢復(fù)組大鼠的游泳時(shí)間顯著低于中藥治療組及正常組(P<0.05)。自然恢復(fù)組與模型組游泳時(shí)間比較升高不明顯(P>0.05)。自然恢復(fù)組游泳時(shí)間明顯低于正常組和中藥治療組(P<0.05)。

    表1 各組大鼠冷水游泳力竭實(shí)驗(yàn)(±s)

    表1 各組大鼠冷水游泳力竭實(shí)驗(yàn)(±s)

    注:與模型對(duì)照組比較:*P<0.05;與正常對(duì)照組比較:△P<0.05;與自然恢復(fù)組比較:#P<0.05

    組 別 n min正常對(duì)照組 6 15.50±1.73*#模型對(duì)照組 8 10.13±1.64△自然恢復(fù)組 6 11.80±2.86△中藥治療組 6 15.00±2.33*#

    2.2 血清睪酮含量

    表2顯示,模型組大鼠血清中睪酮含量明顯低于正常組(P<0.05),灌服西洋參湯治療后與模型組比較睪酮含量升高(P<0.05)。自然恢復(fù)組與模型組比較沒有明顯變化(P>0.05)。自然恢復(fù)組睪酮含量明顯低于正常組和中藥治療組(P<0.05)。

    表2 各組大鼠血清中睪酮含量比較(±s)

    表2 各組大鼠血清中睪酮含量比較(±s)

    注:與模型對(duì)照組比較:*P<0.05;與正常對(duì)照組比較:△P<0.05;與自然恢復(fù)組比較:#P<0.05

    組 別 n T(ng/ml)正常對(duì)照組 6 0.902±0.177*#模型對(duì)照組 8 0.274±0.085△自然恢復(fù)組 6 0.315±0.109△中藥治療組 6 0.703±0.097*#

    3 討論

    本實(shí)驗(yàn)采用偏食法(先食酒再食醋)導(dǎo)致大鼠食欲下降、大便稀溏、體瘦毛松、神疲乏力等,涉及之臟腑當(dāng)首推脾。脾為后天之本,氣血升化之源;脾主運(yùn)化,主肌肉四肢,與運(yùn)動(dòng)的關(guān)系十分密切。正如《素問(wèn)集注·五臟生成》所說(shuō):“脾主運(yùn)化水谷之精,以生養(yǎng)肌肉,故主肉。”肌肉的壯實(shí)與否,與脾胃的運(yùn)化功能相關(guān),脾胃的運(yùn)化功能障礙,必致肌肉瘦消,軟弱無(wú)力,甚至萎弱不用。在力竭實(shí)驗(yàn)中,脾虛大鼠神疲乏力明顯,體力下降很快,故游泳時(shí)間就短。我國(guó)《藥性考》述記“洋參……味類人參,惟性寒、甘苦,補(bǔ)陰退熱?!闭J(rèn)為西洋參湯能起到補(bǔ)益脾胃元?dú)庵Γ勺萄a(bǔ)強(qiáng)體、生津止渴、調(diào)和陰陽(yáng)、扶正祛邪,增強(qiáng)免疫功能,同時(shí)還能抗缺氧、抗疲勞、增強(qiáng)機(jī)體耐力、消除疲勞[5]。正如余天莽在《西洋參》一文中指出,西洋參可抗疲勞增強(qiáng)耐缺氧能力,能明顯延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間和抓棒時(shí)間,延長(zhǎng)缺氧時(shí)的生存時(shí)間和耐受性[6]。用西洋參湯治療10d后,脾虛癥狀便得以糾正,所以中藥治療組大鼠游泳時(shí)間比模型對(duì)照組長(zhǎng)(P<0.05)。

    脾為后天之本,氣血生化之源。脾主四肢肌肉,維持臟腑正常機(jī)能。而腎藏精,主骨生髓,為先天之本。先天之精與生俱來(lái),而后天之精來(lái)源于攝入的飲食物,通過(guò)脾胃運(yùn)化功能而生成水谷之精氣。脾虛則生化無(wú)源,臟腑失養(yǎng);腎也需依賴脾胃水谷精氣的滋養(yǎng),脾虛日久最后必然會(huì)引起腎的虛損[7]。脾虛及腎是逐漸加重的病理過(guò)程,又可出現(xiàn)四肢肌肉萎縮、肢體無(wú)力,骨枯髓虛,形削肉萎,腰脊四肢痿軟無(wú)力,最后使體內(nèi)性激素(睪酮)水平發(fā)生紊亂。睪酮是雄性激素的代表,它與動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)能力、肌肉力量的增長(zhǎng)、疲勞消除密切相關(guān),故此模型組血清睪酮含量明顯降低。

    自古以來(lái),東方人把人參視為起死回生的靈丹妙藥,可大補(bǔ)人體元?dú)狻N餮髤⒌墓δ芘c人參相似,正如張錫純所著《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》載:“西洋參性涼而補(bǔ),凡欲用人參而不受之溫補(bǔ)者,皆可以此代之?!蔽餮髤勺萄a(bǔ)強(qiáng)體,增強(qiáng)免疫功能,同時(shí)還能消除疲勞,一直被推為健脾補(bǔ)虛培元之首選中藥。在中藥組灌服西洋參湯后,脾虛癥狀有所改善,模型組血清睪酮含量的降低可以得到糾正(模型對(duì)照組與中藥治療組比較P<0.05)。中醫(yī)認(rèn)為,脾腎在生理上有著密切聯(lián)系,相互資生、相互促進(jìn),脾主運(yùn)化水谷精微,需借助腎中陽(yáng)氣的溫煦,而腎中精氣亦有賴于水谷精微的不斷充實(shí)和營(yíng)養(yǎng),在維持機(jī)體的正常生理活動(dòng)中發(fā)揮著重要作用,使得氣血旺盛,元?dú)獬渑?。通過(guò)補(bǔ)脾而滋腎,先后天相互資生和促進(jìn),以達(dá)到機(jī)體的陰陽(yáng)平衡。

    綜上所述,脾虛證的發(fā)生與性激素水平紊亂有關(guān),經(jīng)西洋參湯治療后,脾虛癥狀有所改善,激素水平可以得到恢復(fù)。說(shuō)明西洋參湯對(duì)脾虛大鼠有一定的保護(hù)作用,對(duì)受損的機(jī)體修復(fù)具有顯著的促進(jìn)作用,從而發(fā)揮其健脾補(bǔ)虛、強(qiáng)肌健力之功,其作用機(jī)理之一可能與調(diào)節(jié)性激素水平有關(guān)。

    [1]北京師范大學(xué)生物系消化科研組.中醫(yī)脾虛動(dòng)物模型的造型[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,1980,60(2):83-86.

    [2]陳小野.脾虛證動(dòng)物模型的造模思路[J].中醫(yī)雜志,1993,35(4):239-241.

    [3]楊云,陳小野,王昕,等.勞倦和饑飽引起的大鼠脾虛證模型的造型及實(shí)驗(yàn)研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,1989(2).

    [4]彭成,羅光宇.脾氣虛脾不統(tǒng)血證候動(dòng)物模型的研究思路[J].中醫(yī)雜志,1996,37(4):241.

    [5]劉鐵城.中國(guó)西洋參[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1995.

    [6]余天莽,余椿生.西洋參[J].食品與藥品,2006,8(2).

    [7]陳芝喜,劉小斌,周名璐,等.健脾補(bǔ)腎方對(duì)脾虛大鼠性激素及甲狀腺激素水平的影響[J].中國(guó)醫(yī)藥學(xué)刊,2006,4(3):14.

    △通訊作者:晉志高(1953-),男,研究員,從事針灸的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制研究。

    R285.5

    B

    1006-3250(2010)09-0819-02

    國(guó)家中醫(yī)藥管理局項(xiàng)目(2002LHR01);國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(39870905)

    2010-03-19

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