主動(dòng)脈夾層和急性冠脈綜合征患者血漿ADAMTS-9水平比較研究

吳文靜 ，林多茂 ，王 慧 ，程勁松 ，程文立 ，李 耿 ，廖文強(qiáng) ，孔 煒 ，柯元南

（1．北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 研究生院，北京 100730；2．中日友好醫(yī)院 心內(nèi)科，北京 100029；3．北京安貞醫(yī)院 麻醉科，北京 100029；4．中日友好醫(yī)院 心血管病中心實(shí)驗(yàn)室，北京 100029；5．北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部 生理學(xué)與病理生理學(xué)系，分子心血管教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100083）

主動(dòng)脈夾層和急性冠脈綜合征患者血漿ADAMTS-9水平比較研究

吳文靜1，2，林多茂3，王 慧1，2，程勁松1，2，程文立4，李 耿4，廖文強(qiáng)4，孔 煒5，柯元南2?

（1．北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 研究生院，北京 100730；2．中日友好醫(yī)院 心內(nèi)科，北京 100029；3．北京安貞醫(yī)院 麻醉科，北京 100029；4．中日友好醫(yī)院 心血管病中心實(shí)驗(yàn)室，北京 100029；5．北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部 生理學(xué)與病理生理學(xué)系，分子心血管教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100083）

目的：檢測(cè)主動(dòng)脈夾層（AD）和急性冠脈綜合征（ACS）患者外周血含Ⅰ型血小板結(jié)合蛋白基序（TSP）的解聚蛋白樣金屬蛋白酶-9（ADAMTS-9）水平，以探索是否能將ADAMTS-9用于AD的鑒別診斷。方法：選擇51例確診AD患者、84例急性ST段抬高心肌梗死（STEMI）患者、41例急性非ST段抬高心肌梗死（NSTEMI）患者、65例不穩(wěn)定性心絞痛 （UAP）患者，采集其臨床資料，取外周血離心、分離血漿，使用ELISA法檢測(cè)血漿ADAMTS-9水平。結(jié)果：4組受試者在性別、高血壓病史、血肌酐水平、血脂水平、體重指數(shù)方面無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；AD組患者發(fā)病年齡、合并糖尿病史患者比例及高敏C反應(yīng)蛋白水平均與其它3組存在顯著性差異 （均P＜0.05）；4 組患者血漿 ADAMTS-9 水平分別為 277.51±66.74ng/ml、53.73±60.01ng/ml、51.02±44.21ng/ml、64.19±56.64ng/ml，AD組較ACS組明顯升高（P＜0.05）。結(jié)論：ADAMTS-9可作為鑒別AD和ACS患者的指標(biāo)之一。

含Ⅰ型血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶-9；主動(dòng)脈夾層；急性冠脈綜合征

Author’s addressGraduate School of Peking Union Medical College，Beijing 100730，China

ADAMTS（a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs）意為含Ⅰ型血小板結(jié)合蛋白基序（TSP）的解聚蛋白樣金屬蛋白酶，通常結(jié)合于基質(zhì)上，參與基質(zhì)重構(gòu)，可能在體內(nèi)多種疾病中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用。其中ADAMTS-9通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，可能介導(dǎo)了主動(dòng)脈夾層（aortic dissection，AD）的形成（未發(fā)表）。本研究擬探索急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）患者外周血中 ADAMTS-9 表達(dá)情況，以明確是否可以使用ADAMTS-9鑒別AD和ACS。

1 材料和方法

1.1 觀察對(duì)象

病例選擇2009年3月～2009年12月安貞醫(yī)院收治的確診AD欲行手術(shù)患者51例，以及2008年12月～2009年12月我院收治的缺血性胸痛的患者239例。其中不穩(wěn)定性心絞痛（unstable angina pectoris，UAP）患者65例，急性非ST段抬高心肌梗死 （non ST elevated myocardial infarction，NSTEMI）患者 41 例，急性 ST 段抬高心肌梗死 （ST elevated myocardial infarction，STEMI）患者84例。每位患者采血6ml，4℃條件下置于EDTA抗凝的采血管中保存，0.5 h內(nèi)以1000g離心15min，將上清取出，保存于-80℃?zhèn)錂z。

1.2 血漿ADAMTS-9檢測(cè)

使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），試劑盒購(gòu)自武漢中美科技有限公司（USENLIFE），測(cè)量線性范圍 1.56pg/ml～100ng/ml， 酶標(biāo)儀為 Molecular Devices公司生產(chǎn)的spectramax M2型。試驗(yàn)步驟按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，所有樣本均在中日友好醫(yī)院心血管病中心實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。為避免不同測(cè)量板的差異對(duì)研究結(jié)果的影響，將各組樣本平均分配于測(cè)量板上。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法

應(yīng)用SPSS13.0軟件分析。組間比較采用單因素方差分析，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

入選患者基本情況見(jiàn)表1。與AD組相比，另外3組在年齡、糖尿病史、高敏C反應(yīng)蛋白及采血距發(fā)病時(shí)間上均存在顯著性差異（均P＜0.05）。

圖 1 示，AD 組、STEMI組、NSTEMI組、UAP組患者血漿 ADAMTS-9水平 （ng/ml）分別為277.51±66.74、53.73±60.01、51.02±44.21 和 64.19±56.64。ACS組血漿ADAMTS-9水平為 （54.81±56.13）ng/ml，AD 組比 ACS 組顯著增高（P＜0.05）。

表1 患者基本情況

3 討論

AD是現(xiàn)今死亡率最高的心血管病之一，人群發(fā)病率是2.9/100000/年，3%患者猝死，發(fā)病2d內(nèi)病死率高達(dá)50%，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，多表現(xiàn)為胸痛、胸悶、氣短等類似冠心病的癥狀，誤診和漏診率可高達(dá)31.8%，誤診為心絞痛者占10.1%，心肌梗死者占5%[1]，其診斷往往依賴于超高速計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)、磁共振成像、經(jīng)胸或經(jīng)食管超聲心動(dòng)圖、動(dòng)脈造影等輔助檢查，但上述檢查復(fù)雜、費(fèi)時(shí)。而對(duì)于ACS患者，時(shí)間就是生命，不允許我們把上述檢查作為篩查手段，因此，臨床急需一種方便、快捷的手段對(duì)AD和ACS進(jìn)行鑒別診斷。

生物標(biāo)記物因其無(wú)創(chuàng)、方便、快捷備受臨床醫(yī)生歡迎，但目前尚無(wú)一種理想的生物標(biāo)記物能夠應(yīng)用于臨床。Katoh等發(fā)現(xiàn)循環(huán)平滑肌肌球蛋白重鏈蛋白（由損傷的主動(dòng)脈中層平滑肌釋放）可作為一種標(biāo)記物鑒別AD[2]，然而，在試點(diǎn)研究中發(fā)現(xiàn)其局限于主動(dòng)脈近端損傷，且發(fā)病在3h內(nèi)[3]；Shinohara等又研究了可溶彈性蛋白片段（soluble elastin fragments，sELAF），彈性蛋白是動(dòng)脈壁的主要基質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白，可溶彈性蛋白片段交聯(lián)于纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中，對(duì)動(dòng)脈壁提供穩(wěn)定性。一個(gè)回顧性的研究證實(shí)sELAF可對(duì)AD進(jìn)行鑒別診斷，主要的局限包括檢測(cè)耗時(shí)較長(zhǎng)，且假腔內(nèi)血栓形成的急性AD患者sELAF不升高，目前還需要前瞻性研究證實(shí)其陰性預(yù)測(cè)價(jià)值[4]；其它非特異的生化標(biāo)記物如D二聚體、hsCRP、纖維蛋白原等已在臨床實(shí)踐中證實(shí)無(wú)效[5，6]。

ADAMTS-9是在對(duì)小鼠結(jié)腸腺癌基因差異顯示的篩選中發(fā)現(xiàn)的，定位于人染色體21q21-q22，編碼含951個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，分子量約為100kD，分泌后大多通過(guò)C末端3個(gè)TSP重復(fù)序列和間隔區(qū)錨定在細(xì)胞外基質(zhì)中。在許多組織，如心臟、肺、肝臟、骨骼肌和腎中均有表達(dá)[7]。研究發(fā)現(xiàn)ADAMTS-9通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白如Versican、Brevican、Aggrecan[8]，參與多種生理和病理生理過(guò)程。目前已有研究發(fā)現(xiàn)基質(zhì)降解在AD的形成中有重要作用[9～11]。作者先前研究也發(fā)現(xiàn)AD患者血漿ADAMTS-9水平約為正常對(duì)照組的8 倍 [AD 組為 （277.51±66.74）ng/ml， 對(duì)照組為（34.98±27.21）ng/ml]，AD 患者血管壁 ADAMTS-9表達(dá)明顯增加，提示ADAMTS-9可能參與了AD的形成（尚未發(fā)表）。因此，本研究首次對(duì)AD和ACS患者血漿ADAMTS-9水平進(jìn)行了對(duì)照，以探索是否能將ADAMTS-9作為一種生物標(biāo)記物對(duì)AD和ACS進(jìn)行鑒別。

本研究中，AD組血漿ADAMTS-9水平約為ACS 組的 5 倍[AD 組為（277.51±66.74）ng/ml，ACS組為（54.81±56.13）ng/ml]，提示 ADAMTS-9 可能單獨(dú)或聯(lián)合循環(huán)平滑肌肌球蛋白重鏈蛋白、sELAF等對(duì)主動(dòng)脈夾層進(jìn)行診斷與鑒別診斷，為臨床醫(yī)生提供快速、準(zhǔn)確的幫助。

但是，本研究樣本采集時(shí)間在各組受試者中差別較大，而且未對(duì)血漿ADAMTS-9水平隨時(shí)間的變化進(jìn)行觀察，因此需要更進(jìn)一步的研究來(lái)觀察血漿ADAMTS-9水平隨發(fā)病時(shí)間的變化，明確其表達(dá)達(dá)峰時(shí)間；并進(jìn)一步在其它臨床難以與AD鑒別的疾病如急性肺動(dòng)脈栓塞患者中檢測(cè)血漿ADAMTS-9的水平。

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Plasma level of a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs-9 in aorticdissection and acute coronary syndrome patients

WU Wen-jing，LIN Duo-mao，WANG Hui，et al//Journal of China-Japan Friendship Hospital，24（5）：259-261

Objective：To explore whether a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs-9 （ADAMTS-9）could be a differential diagnosis index for AD by detecting the level of plasma ADAMTS-9 in aortic dissection （AD）and acute coronary syndrome （ACS）patients.Methods：Altogether 51 AD patients，84 ST elevated myocardial infarction patients，41 non ST elevated myocardial infarction patients and 65 unstable angina pectoris patients were included.ELISA was used to measure plasma ADAMTS-9.Results：Four groups had no difference in gender，hypertension history，serum creatinine level，serum lipid level and body mass index.Patients were younger in AD group and less patients in this group had diabetes （P＜0.05）.Higher high-sensitivity C reactive protein level was detected in AD group （P＜0.05）.Plasma ADAMTS-9 in 4 groups were 277.51 ±66.74ng/ml，53.73 ±60.01ng/ml，51.02 ±44.21ng/ml and 64.19 ±56.64ng/ml，respectively.AD group elevated significantly higher than that of ACS group（P＜0.05）.Conclusion：ADAMTS-9 may be a new index for the differentiation diagnosis of AD from ACS patients.

a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs-9；aortic dissection；acute coronary syndrome

R543.1+6

A

1001-0025（2010）05-0259-03

10.3969/j.issn.1001-0025.2010.05.001

2* 本文通訊作者。

吳文靜（1979-），女，住院醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士。

2010-07-02

2010-08-04