張建軍 施衛(wèi)忠 張貽傳
(1.浙江省嘉興市大運(yùn)河生態(tài)牧業(yè)有限責(zé)任公司,浙江嘉興314015;2.普瑞納嘉興飼料公司,浙江嘉興 314002)
硒 (Selenium,Se)是瑞典化學(xué)家Berzilus于1817年首先發(fā)現(xiàn)的,是動(dòng)物必需的微量元素之一,它與動(dòng)物繁殖、生長(zhǎng)、發(fā)育和疾病發(fā)生有著密切的關(guān)系。硒在地殼中含量極低,而且分布很不均勻,在我國(guó),從黑龍江到云南有一條缺硒帶,東南沿海也存在缺硒區(qū),這些地區(qū)動(dòng)物的白肌病、桑葚心病、營(yíng)養(yǎng)性肝壞死等疾病均與缺硒有關(guān);而湖北的恩施與陜西的紫陽(yáng)縣則因土囊含硒過高發(fā)生人畜慢性硒中毒。飼料原料中的魚粉含硒較高,苜蓿粉、黑麥等次之,餅粕較少,谷類最低。動(dòng)物腎 (尤其是腎皮質(zhì))、肝、胰腺、垂體及毛發(fā)含硒較高,而肌肉、骨骼和血液相對(duì)較低,脂肪組織最低。
硒以無機(jī)硒和有機(jī)硒兩種形式存在,無機(jī)硒包括亞硒酸鈉、硒酸鈉、硒化鈉、亞硒酸鈣等;有機(jī)硒包括硒酵母、硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸、海藻硒多糖等。有機(jī)硒的生物利用率高于無機(jī)硒,且有機(jī)硒毒性小,不會(huì)對(duì)動(dòng)物和環(huán)境造成不良影響。
硒在動(dòng)物體內(nèi)的生物學(xué)作用有很多種,其中最主要的是抗氧化作用。
硒的抗氧化作用可分為酶和非酶兩類。
1.1.1 硒酶抗氧化作用
谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH-Px)是哺乳動(dòng)物體內(nèi)第一個(gè)被公認(rèn)的含硒酶,硒含量為4molSe/mol酶,這種酶廣泛存在于哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、肝臟、肺臟、腎臟、腦等組織中,該酶能將體內(nèi)有害的過氧化物還原為無毒的羥基化合物,從而保護(hù)生物膜免受過氧化物的氧化損傷。硒作為GSH-Px中氧化-還原作用的唯一原子,在GSH-Px催化作用中具有關(guān)鍵作用。
磷脂過氧化氫谷胱甘肽過氧化物酶(PHG-Px)是哺乳動(dòng)物體內(nèi)的另一個(gè)含硒酶。該酶被意大利Padova大學(xué)的Ursini教授于20世紀(jì)80年代初發(fā)現(xiàn),該酶活性中心可能與GSH-Px相同。該酶也是通過抑制膜磷脂過氧化而發(fā)揮保護(hù)生物膜的作用。
1.1.2 非酶硒抗氧化作用
非酶硒化合物的抗氧化作用,主要是多種硒蛋白的抗氧化作用。硒化合物的抗氧化作用可以歸納為以下幾個(gè)方面:清除脂質(zhì)過氧化自由基中間產(chǎn)物;分解脂質(zhì)過氧化物;修復(fù)水化自由基(HO、H等)引起硫化合的分子損傷;在水化自由基破壞生命物質(zhì)前將其清除或轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定化合物;催化巰基化合物作為保護(hù)劑的反應(yīng)。
1.1.3 硒與VE的協(xié)同抗氧化作用
在抗氧化方面,硒和VE起協(xié)同作用,補(bǔ)充硒或VE可達(dá)到互補(bǔ)和糾正各自的缺乏癥。但在有些情況,VE不能代替硒,而硒則在很大程度上可代替VE。據(jù)測(cè)定,一個(gè)硒原子能代替700~1000個(gè)分子VE;含硒蛋白的抗氧化能力比VE的抗氧化能力高500倍。
大量的研究發(fā)現(xiàn),硒與機(jī)體免疫功能密切相關(guān)。硒可以改善機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫功能,影響免疫器官的結(jié)構(gòu)。
1.2.1 增強(qiáng)體液免疫
硒能增強(qiáng)體液免疫,刺激免疫球蛋白的生成,提高機(jī)體合成抗體的能力。高建忠等 (2004)在含硒 0.11mg/kg的基礎(chǔ)日糧中添加 0.2mg/kg和 0.4mg/kg硒均顯著提高了雛雞血清中IgG水平。李敬璽、王俊東(1995)在給18~20kg的仔豬接種豬瘟疫苗的同時(shí)肌肉注射0.2%亞硒酸鈉1mL, 可使豬血液中的B淋巴細(xì)胞增數(shù)、豬瘟抗體水平提高,且抗體出現(xiàn)時(shí)間較早、維持時(shí)間較長(zhǎng)。袁施彬等(2008)在日糧中添加0.6mg/kg的硒,能使豬日增重提高,料肉比降低;IgG、IgA和IgM提高,豬瘟抗體滴度隨著試驗(yàn)期的延長(zhǎng),幾乎呈直線上升,在免疫后28天,陽(yáng)性保護(hù)率達(dá)到100%。
1.2.2 增強(qiáng)細(xì)胞免疫
研究表明,硒可以明顯提高淋巴細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平,同時(shí)提高IL-6的活性。補(bǔ)硒能使動(dòng)物對(duì)致敏劑的敏感性提高,而缺硒時(shí),動(dòng)物巨噬細(xì)胞減少,淋巴細(xì)胞增殖能力下降,自然殺傷細(xì)胞 (NK)數(shù)目減少,抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)毒素清除能力下降。補(bǔ)硒可使母豬外周血吞噬細(xì)胞的吞噬活性顯著增強(qiáng)。
許多研究表明,硒對(duì)柯薩奇病毒、人類免疫缺陷病毒、鼠乳腺腫瘤病毒、流感病毒及甲型肝炎病毒等病毒的感染有不同程度的抑制作用,硒與這些疾病的發(fā)生、發(fā)展及防治等都有密切的聯(lián)系。鄧岳松、陳權(quán)軍(2009)報(bào)道,將納米元素硒設(shè)置0、1、2、5、10、15和20pmol/L六個(gè)濃度梯度,分別添加到細(xì)胞分散液中,在1~20umol/L范圍內(nèi),納米元素硒對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒有影響,但對(duì)豬狂犬病毒的體外復(fù)制呈現(xiàn)顯著的抑制作用 (P<0.05),且隨著濃度的增加,其抑制作用增強(qiáng)。魏戰(zhàn)勇等(2005)將亞硒酸鈉、硒蛋氨酸、海藻硒多糖,分別設(shè)0、2、4、8和16mol/L等五個(gè)濃度梯度,將各濃度藥物加入到PK-15細(xì)胞的分散液中 (細(xì)胞含量約10個(gè)/mL,每孔1 mL),并加入100病毒蝕斑形成單位(PFU)豬細(xì)小病毒,每個(gè)處理做3個(gè)樣,另設(shè)3個(gè)空白細(xì)胞對(duì)照,37℃培養(yǎng)48小時(shí),收取上清液,測(cè)定PFU。結(jié)果發(fā)現(xiàn)亞硒酸鈉、硒蛋氨酸和海藻硒多糖對(duì)豬細(xì)小病毒的增殖均有不同程度的抑制作用,并隨著濃度的增高其抑制作用增強(qiáng);在相同的濃度下,硒蛋氨酸對(duì)病毒增殖的抑制作用最強(qiáng),其次是亞硒酸鈉,海藻硒多糖最弱。
隨著現(xiàn)代文明的發(fā)展,人畜的消化道疾病越來越多,而消化道的病征直接影響到人畜對(duì)營(yíng)養(yǎng)的消化吸收,關(guān)系到人畜的身體健康。硒在控制消化道潰瘍疾病的過程中也發(fā)揮著重要的作用。在消化道潰瘍治療過程中,同時(shí)使用富硒康和雷尼替丁比單獨(dú)使用雷尼替丁治愈率明顯提高(P<0.01)。 譚子燕(1996)用富含硒及VE的生肌玉露飲治療氣血兩虛型潰瘍病18例,結(jié)果治愈11例,總有效率88.9%。邵世和等(2005)分別用生理鹽水、1.0 ug/g bw亞硒酸鈉、幽門螺桿菌、幽門螺桿菌-1.0 ug/g bw亞硒酸鈉各對(duì)10只小鼠灌胃10天,飼養(yǎng)8周后對(duì)胃組織切片,觀察胃粘膜組織變化,結(jié)果灌服生理鹽水和亞硒酸鈉的小鼠胃粘膜組織未發(fā)現(xiàn)病理改變;灌服幽門螺桿菌的10只小鼠中有9只胃粘膜組織有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、血管擴(kuò)張,病理診斷為淺表性胃炎或伴有糜爛、萎縮性胃炎;灌服幽門螺桿菌-亞硒酸鈉的10只小鼠中有6只胃粘膜有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),病變主要以淺表性胃炎為主。表明1.0ug/gbw亞硒酸鈉對(duì)幽門螺桿菌感染誘發(fā)的胃粘膜組織病變有保護(hù)作用。
如何減少畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)激,提高畜禽對(duì)應(yīng)激的耐受力,是近年來養(yǎng)殖業(yè)一直在探求的問題。趙洪進(jìn)、郭定宗(2005) 在平均溫度為 (34.89±5.62℃)的豬舍內(nèi),選擇100日齡長(zhǎng)大二元雜交商品生長(zhǎng)豬 (去勢(shì)公豬)40頭,隨機(jī)分為4組,通過日糧添加不同水平的硒和VE作為對(duì)照組、低水平組、中水平組和高水平組,測(cè)定與自由基代謝有關(guān)的血清丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性。結(jié)果表明,補(bǔ)充Se和VE可降低 (P<0.05)或顯著降低 (P<0.01)血清MDA含量;升高 (P<0.05)或顯著升高 (P<0.01)血清 SOD和GSH-Px活性,從而證明Se和VE可減少熱應(yīng)激豬體內(nèi)自由基的數(shù)量,緩解豬熱應(yīng)激時(shí)的自由基損傷,提高豬抗熱應(yīng)激的能力。
硒能與體內(nèi)的砷(As)、 鎘(Cd)、汞(Hg)、 鎳(Ni)、 鉛(Pb) 等重金屬結(jié)合,形成金屬硒蛋白復(fù)合物而解毒、排毒。研究表明:硒對(duì)鐮刀菌所產(chǎn)生的T-2毒素有拮抗作用,對(duì)T-2毒素所致的關(guān)節(jié)軟骨損傷具有一定的保護(hù)作用。
硒最重要的生理功能是增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力,調(diào)節(jié)人體的免疫功能。對(duì)于維持甲狀腺正常功能和調(diào)節(jié)甲狀腺激素代謝,硒也同樣起著重要的作用。譚武紅、華羅明等(1998)給低硒克山病病區(qū)居民每日口服200ug亞硒酸鈉12周,測(cè)定紅細(xì)胞硒含量,谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和血漿T3、T4及rT3水平,探討硒對(duì)甲狀腺激素水平的影響。結(jié)果表明:補(bǔ)硒顯著提高紅細(xì)胞硒含量和GSH-Px活性;補(bǔ)硒組血漿T3明顯升高,rT2明顯降低,而T4無明顯改變。紅細(xì)胞硒含量與血漿T3呈明顯正相關(guān)(r=0.547, n=38, P<0.001)和血漿rT3呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.425,n=40, P<0.001)。
研究表明,種公豬缺硒可使睪丸的曲精細(xì)管生殖細(xì)胞與精囊腺發(fā)育不良,造成睪丸退化,影響種用;母豬缺硒時(shí)發(fā)情無規(guī)律或不發(fā)情,受胎率低,會(huì)產(chǎn)生死胎或弱胎,產(chǎn)乳減少,免疫能力下降,嚴(yán)重時(shí)甚至能使豬的蹄殼從冠狀環(huán)脫落。蘇惠龍等(2009)在成年長(zhǎng)白種公豬的飼料中,以0.3mg/kg(以硒濃度計(jì)算)添加富硒益生菌,研究富硒益生菌對(duì)種公豬精液品質(zhì)的影響。結(jié)果顯示,試驗(yàn)組種公豬精液中的精子活率、頂體完整率、還原型谷胱甘肽過氧化物酶的活性均比對(duì)照組高。但精液中的精子畸形率比對(duì)照組低,說明富硒益生菌能明顯改善種公豬的精液品質(zhì)。妊娠期間母豬飼料中添加亞硒酸納VE或產(chǎn)前20天給母豬注射亞硒酸納VE注射液可以增加產(chǎn)仔數(shù),減少死胎率,并且哺乳仔豬發(fā)病少。
于乳豬7日齡用0.1%亞硒酸鈉VE注射液,每千克體重0.15mL肌肉注射,斷乳時(shí)重復(fù)注射一次,母豬在分娩前21天注射亞硒酸鈉VE注射液5mL,能有效預(yù)防仔豬白肌病、水腫病、營(yíng)養(yǎng)性肝壞死和桑葚心病。
一般認(rèn)為,在改善肉質(zhì)方面,有機(jī)硒明顯優(yōu)于亞硒酸鈉。占秀安等選用108頭體重60kg左右的杜長(zhǎng)大三元雜種肥育豬,按飼養(yǎng)試驗(yàn)要求分成3組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12頭。對(duì)照組不添加硒 (基礎(chǔ)飼糧中硒的實(shí)測(cè)值為0.045mg/kg),亞硒酸鈉組和硒代蛋氨酸組均添加硒 0.30mg/kg, 試驗(yàn)期 40天。然后屠宰并取樣測(cè)定,研究不同硒源對(duì)肥育豬鮮肉肉色和滴水損失的影響及機(jī)理。結(jié)果表明:硒代蛋氨酸使豬宰后第0.75、8、16小時(shí)肉色Huntera值顯著升高 (P<0.05),而亞硒酸鈉僅使第0.75小時(shí)肉色Huntera值明顯提高 (P<0.05);硒代蛋氨酸使豬宰后第8、16小時(shí)鮮肉的滴水損失顯著減少 (P<0.01),而亞硒酸鈉有這一作用趨勢(shì),但效果不明顯 (P>0.05);硒代蛋氨酸和亞硒酸鈉均使血清和組織中硒含量增加 (P<0.01),但硒代蛋氨酸的這一作用較亞硒酸鈉明顯。
缺硒會(huì)使得仔豬對(duì)鐵劑的敏感性增強(qiáng),因此,缺硒仔豬在補(bǔ)鐵時(shí)容易發(fā)生過敏。張新華、宋士英(1996)給30頭25kg左右仔豬每天每頭豬加5mg亞硒酸鈉,混在飼料內(nèi)喂飼。補(bǔ)硒3天后開始防疫注射,結(jié)果補(bǔ)硒組的仔豬防疫注射后無一頭死亡,對(duì)照組30頭沒補(bǔ)硒的仔豬防疫注射后死亡11頭。
硒是動(dòng)物體必需的微量元素之一,自從1973年硒被證實(shí)為谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH-Px)的活性成分,以后有關(guān)硒的生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等基礎(chǔ)性研究層出不窮。這些研究成果為更有目的、準(zhǔn)確地防治硒缺乏癥提供了理論基礎(chǔ)。目前硒在生物學(xué)領(lǐng)域中仍受到高度重視。如何正確的使用硒作為動(dòng)物飼料營(yíng)養(yǎng)性添加劑,在當(dāng)今動(dòng)物疾病控制中有著非常重要的意義。