西蘭花莖葉粉對(duì)仙居三黃蛋雞蛋品質(zhì)、受精率和孵化率的影響

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（1.浙江省臺(tái)州市畜牧局,浙江臺(tái)州 318000；2.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,浙江杭州 310029）

西蘭花Brassica oleacea又名綠菜花、意大利芥藍(lán)等,為十字花科蕓薹屬甘藍(lán)種中以綠色花球?yàn)楫a(chǎn)品的一個(gè)變種,是一年生或越年生草本植物。2008年臺(tái)州市西蘭花種植面積達(dá)8 000多hm2,是全國(guó)規(guī)模最大的西蘭花生產(chǎn)基地,總產(chǎn)量占全國(guó)的1/3。由于西蘭花的主要食用部位是花球,臺(tái)州市每年可收獲26萬(wàn)t西蘭花莖葉,僅有約20%的莖葉以鮮葉方式飼喂畜禽,大部分莖葉（20多萬(wàn)t）在田里腐敗,并引起空氣污染及水體富營(yíng)養(yǎng)化等環(huán)境問(wèn)題；此外,開(kāi)發(fā)西蘭花莖葉作為非常規(guī)飼料原料,來(lái)代替部分常規(guī)飼料,可降低飼料成本,獲得可觀的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,亦可緩解人畜爭(zhēng)糧矛盾和糧食供給壓力,促進(jìn)我國(guó)飼料工業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)西蘭花莖葉飼料化利用的研究還沒(méi)有報(bào)道。為此,研究了西蘭花莖葉粉對(duì)三黃蛋雞蛋品質(zhì)、受精率和孵化率的影響,旨在為西蘭花莖葉的飼料化利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料西蘭花莖葉粉由臺(tái)州市北洋植物粉有限公司提供。經(jīng)測(cè)定其常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量為：粗蛋白 23%,粗纖維 7.4%,粗脂肪 4.25%,粗灰分12.2%,鈣1.76%,總磷0.59%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組選取384只240日齡健康三黃蛋雞,隨機(jī)分成4個(gè)處理,即對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)32只。

1.3 試驗(yàn)日糧與設(shè)計(jì)試驗(yàn)飼糧參照我國(guó)地方三黃雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制。日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。各處理組日糧中西蘭花莖葉粉的添加量分別為0、4%、6%和8%。

1.4 飼養(yǎng)管理試驗(yàn)在浙江省仙居種雞場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)雞自由采食和飲水。舍內(nèi)有通風(fēng)窗,光照時(shí)間16 h,光照強(qiáng)度10 lx,舍內(nèi)溫度25～34℃。飼養(yǎng)方式采用階梯式籠養(yǎng)。其他各項(xiàng)日常管理措施按雞場(chǎng)常規(guī)管理進(jìn)行。預(yù)試期7 d,正試期30 d。

1.5 樣品采集試驗(yàn)第30天,每個(gè)重復(fù)收集雞蛋4枚,每組12個(gè)雞蛋,4℃冰箱保存,待做蛋品質(zhì)分析和蛋黃膽固醇含量檢測(cè)。

試驗(yàn)結(jié)束后連續(xù)收集5 d的雞蛋,直接剔除破損、畸形、過(guò)大、過(guò)小及其他不適的蛋。溫度15～17℃、相對(duì)濕度70%～80%的條件下保存,用于孵化率測(cè)定。

表1 日糧配方和營(yíng)養(yǎng)水平

在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每個(gè)處理隨機(jī)抽取6只試驗(yàn)雞（每個(gè)重復(fù)2只）,共24只,給水不給料,禁食12 h,屠宰,取肝臟樣品,待做HMG-CoA還原酶活性分析。

1.6 孵化管理每組設(shè)3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)90只蛋。所有蛋在同一孵化機(jī)里。入孵前預(yù)溫8 h,同時(shí)用福爾馬林熏蒸消毒30 min,然后進(jìn)入孵化階段,整個(gè)孵化過(guò)程采用變溫孵化：第1～6天38.5 ℃,第7～12天35.1 ℃,第 13～18天37.5℃,第19～21天37.2℃。相對(duì)濕度采用兩高一低：即前期（第1～12天）65%,中期（第 13～18天）55%～60%,后期（第19～21天）65%～70%,入孵后第10天照蛋,剔除無(wú)精蛋和死胚蛋,第19天落盤。翻蛋每2 h一次,一晝夜12次,孵化滿18 d后停止翻蛋。整個(gè)孵化過(guò)程中做好溫度、濕度、無(wú)精蛋、死胚蛋和出雛情況等項(xiàng)的記錄。

1.7 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.7.1產(chǎn)蛋性能 每日以重復(fù)為單位,測(cè)定產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋質(zhì)量,記錄飼料消耗量,并注意記錄當(dāng)日淘汰雞所在組。

1.7.2蛋品質(zhì) 蛋品質(zhì)包括蛋黃顏色、蛋白高度、哈氏單位、蛋殼厚度和蛋殼強(qiáng)度。采用高精度數(shù)碼測(cè)蛋儀（DET-6000,NABEL,日本）對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。蛋黃膽固醇含量測(cè)定采用CHO-PAP試劑盒法,按產(chǎn)品說(shuō)明書提供的方法進(jìn)行。試劑盒由北京北化康泰臨床試劑有限公司生產(chǎn)。

1.7.3孵化 孵化以受精率和入孵孵化率描述。

受精率=（入孵蛋數(shù)-無(wú)精蛋數(shù)）/入孵蛋數(shù)。

入孵孵化率=出雛數(shù)/孵化率×100%。

1.8 數(shù)據(jù)處理與分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SAS（6.12版）軟件中的一般線性模式（GLM）對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素分析,各處理間平均值的比較采用 Duncan's多重比較進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加西蘭花莖葉粉對(duì)蛋品質(zhì)的影響由表2可知,添加西蘭花莖葉粉30 d后,試驗(yàn)組各組蛋白高度、蛋黃顏色、哈氏單位、蛋殼強(qiáng)度和蛋殼厚度均與對(duì)照組相比顯著提高（P＜0.05）；相比對(duì)照組,試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組蛋黃膽固醇含量下降顯著（P＜0.05）,試驗(yàn)Ⅰ組蛋黃膽固醇含量下降不顯著（P＞0.05）。

2.2 肝臟中HMG-CoA還原酶活性由表3可見(jiàn),與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組仙居三黃蛋雞肝臟中HMG-CoA還原酶活性分別降低了3.02%（P＞0.05）、8.51%（P＜0.05）和11.38%（P＜0.05）。

2.3 添加西蘭花莖葉粉對(duì)孵化率的影響由表4可知,相比對(duì)照組,試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的受精率顯著提高（P＜0.05）,試驗(yàn)Ⅲ組受精率提高不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)組孵化率有所下降,試驗(yàn)Ⅰ組相比對(duì)照組下降不顯著（P＞0.05）,試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組顯著下降（P＜0.05）。試驗(yàn)組間受精率和孵化率均差異不顯著（P＞0.05）。

表2 添加西蘭花莖葉粉對(duì)蛋品質(zhì)的影響

表3 西蘭花莖葉粉對(duì)肝臟HMG-CoA還原酶活性的影響

表4 添加西蘭花莖葉粉對(duì)受精率和孵化率的影響 %

3 討論

3.1 西蘭花莖葉粉對(duì)生產(chǎn)性能的影響試驗(yàn)表明,添加西蘭花莖葉粉對(duì)仙居三黃蛋雞的生產(chǎn)性能與對(duì)照組比較沒(méi)有顯著差異,但蛋質(zhì)量、產(chǎn)蛋率增加、采食量和料蛋比有下降的趨勢(shì)。這可能與日糧纖維在大腸發(fā)酵產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸有關(guān)。大量研究報(bào)道[1-2],在小腸內(nèi)沒(méi)有被完全消化的纖維類物質(zhì)可以被大腸內(nèi)的大量微生物降解生成揮發(fā)性脂肪酸,隨后被腸壁直接吸收,從而為動(dòng)物提供能量。本試驗(yàn)各組間日糧能量水平基本一致,粗纖維水平增加。纖維經(jīng)大腸微生物發(fā)酵,產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸,可滿足維持能量需要的10%～30%[3]。本試驗(yàn)與何欣等[4]用5%苜蓿粉飼喂海蘭褐商品蛋雞試驗(yàn)結(jié)果一致。

3.2 西蘭花莖葉粉對(duì)蛋品質(zhì)的影響哈氏單位是衡量雞蛋蛋白品質(zhì)的重要指標(biāo),哈氏單位越高,蛋白質(zhì)越粘稠,蛋白品質(zhì)越好。研究發(fā)現(xiàn)：試驗(yàn)組雞蛋的蛋白高度、哈氏單位均顯著性提高。決定哈氏單位的因素是蛋質(zhì)量和蛋白高度,較小的蛋質(zhì)量、較高的蛋白高度造成了哈氏單位的差異。

研究認(rèn)為：蛋黃顏色的深淺取決于家禽從飼糧中攝取的類胡蘿卜素的數(shù)量和種類,用于形成和改善蛋黃顏色的類胡蘿卜素物質(zhì),家禽自身不能合成,需從外界輸入[5]。西蘭花莖葉粉中含有類胡蘿卜素高達(dá)187 mg/kg,大量的類胡蘿卜素被吸收后沉積在蛋黃中,加深蛋黃顏色。研究發(fā)現(xiàn)：添加西蘭花莖葉粉后,蛋黃顏色顯著提高。

飼喂西蘭花莖葉粉后提高蛋殼厚度和蛋殼強(qiáng)度,可能是因?yàn)槲魈m花莖葉粉中的鈣含量高、可溶性好。此外維生素D與鈣的吸收利用、轉(zhuǎn)運(yùn)關(guān)系密切,經(jīng)快速干燥調(diào)制的西蘭花莖葉粉是很好的維生素D的來(lái)源,維生素D的活性形式（1,25-二羥膽鈣化醇）能夠提高蛋殼腺中Ca2+-ATPase的活性,使得鈣的吸收利用率高,從而提高蛋殼質(zhì)量,與張敬標(biāo)等[6]用苜蓿替代部分豆粕飼喂伊莎蛋雞能增加蛋殼厚度的結(jié)果一致。

試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn),隨著西蘭花莖葉粉添加量的增加,蛋黃膽固醇含量逐漸降低。相比對(duì)照組和試驗(yàn)I組,試驗(yàn)Ⅱ組、試驗(yàn)Ⅲ組蛋黃膽固醇下降達(dá)到顯著水平。雞體內(nèi)膽固醇來(lái)自日糧中吸收和機(jī)體自身合成,但以自身合成途徑為主,3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶是膽固醇合成的限速酶。試驗(yàn)中,試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組仙居三黃蛋雞肝臟HMG-CoA還原酶活性顯著降低,表明添加西蘭花莖葉粉抑制肝臟膽固醇合成。研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加丙酸、靜脈注射或腹腔注射丙酸使豬[7]和大鼠[8]血清中膽固醇水平以及大鼠[8]肝臟中HMG-CoA還原酶活性顯著降低。丙酸可使體外培養(yǎng)的肝細(xì)胞合成膽固醇的量[9]顯著下降。Hara等[10]報(bào)道,乙酸可抑制外周組織膽固醇的合成。Levrat等[7]報(bào)道,大腸發(fā)酵產(chǎn)生的丁酸很少吸收,大部分被腸壁利用。筆者認(rèn)為,西蘭花莖葉粉降低蛋黃膽固醇主要是通過(guò)其發(fā)酵產(chǎn)物丙酸和乙酸抑制肝HMG-CoA還原酶活性和抑制外周組織膽固醇的合成引起的。

3.3 西蘭花莖葉粉對(duì)受精率、孵化率的影響研究發(fā)現(xiàn)：相比對(duì)照組,試驗(yàn)組受精率均提高,其中試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的受精率顯著提高。表明西蘭花莖葉粉中可能含有某種物質(zhì)可以提高受精率。馬進(jìn)勇在種雞飼養(yǎng)中適量搭配苜蓿草粉,用5%苜蓿草粉代替麩皮,受精率提高了1.8%,90%以上產(chǎn)蛋率可維持4個(gè)多月,試驗(yàn)表明,飼料中適量搭配苜蓿草粉,不但不影響產(chǎn)蛋率,而且還能提高種雞的繁殖性能[11]。本研究還發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)組的孵化率均下降,其中試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組相比對(duì)照組顯著下降。影響孵化率的因素較多,其中種蛋質(zhì)量是影響孵化率的首要因素,蛋殼質(zhì)量是判斷種蛋質(zhì)量的最佳方法。蛋殼是禽胚胎發(fā)育過(guò)程中氣體交換以及水分蒸發(fā)的場(chǎng)所。楊恒東[12]研究發(fā)現(xiàn),蛋殼質(zhì)地差及造成蛋殼質(zhì)地差的因素是孵化率低和母雞繁殖力低的重要原因。Mcdaniel[13]指出在一定殼厚范圍內(nèi),蛋的孵化率較高。過(guò)厚、過(guò)薄均會(huì)降低孵化率。筆者認(rèn)為：添加西蘭花莖葉粉后,種蛋的蛋殼厚度顯著增加。蛋殼過(guò)厚,孵化后期胚胎難以散熱和破殼,這是導(dǎo)致胚胎后期死亡、孵化率低的主要原因。李昂等[13]研究番鴨蛋殼對(duì)出雛效果的影響,證實(shí)死胚蛋蛋殼厚度（0.395～0.401 mm）極顯著高于正常出雛蛋（0.363 mm）,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

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