N F-κ B p65在子宮腺肌病中的表達(dá)及與其痛經(jīng)相關(guān)性的研究

呂敬媛,趙東旭,盧北燕,吳雅冬

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003)

當(dāng)子宮內(nèi)膜腺體及間質(zhì)侵入子宮肌層時,稱為子宮腺肌病 (Adenomyosis,AM)。近年來 ,由于此病的發(fā)病率不斷上升,已成為婦科常見病。其中,繼發(fā)性痛經(jīng)為最主要的臨床表現(xiàn)以及就診原因。AM藥物治療效果不理想且易復(fù)發(fā),如手術(shù)切除子宮,患者將喪失生育功能,這已成為婦科的熱點(diǎn)和難點(diǎn)問題。本文用免疫組化的方法研究 N F_κ B p65與子宮腺肌病及其痛經(jīng)的關(guān)系,希望對子宮腺肌病非手術(shù)治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2007— 01～ 2010— 01在我院婦 科病房行 子宮切除術(shù) ,術(shù)后經(jīng)病理檢查證實為子宮腺肌病患者共62例?；颊呔缓喜⒆訉m內(nèi)膜異位癥;術(shù)前半年未使用過激素類藥物及宮內(nèi)節(jié)育器;術(shù)前半年無孕產(chǎn)史;不合并免疫及代謝性疾病;不合并內(nèi)分泌疾病;不合并全身其他系統(tǒng)惡性腫瘤;不合并神經(jīng)系統(tǒng)疾病及心理障礙;年齡 35～ 53歲,平均(44.19±5.51)歲。對照組為因子宮肌瘤行子宮切除術(shù)的住院病人,術(shù)后病理證實為子宮肌瘤 ,年齡 30～ 59歲 ,平均 (45.45±8.11)歲。

1.2 疼痛分級

所有患者術(shù)前按照疼痛問卷調(diào)查評分法對疼痛嚴(yán)重程度進(jìn)行評分：無痛 (0分);輕度疼痛 (1～ 3分)：雖有疼痛但可忍受,并能正常生活,睡眠不受影響;中度疼痛 (4～ 6分)：疼痛明顯,不能忍受 ,要求使用鎮(zhèn)痛藥,睡眠受到干擾;重度疼痛(7～ 9分 )：疼痛劇烈,不能忍受,必須使用鎮(zhèn)痛藥 ,睡眠受到嚴(yán)重干擾,可伴有植物神經(jīng)功能紊亂表現(xiàn)或被動體位。

子宮腺肌病病理分級：

按照術(shù)后病理提示子宮內(nèi)膜侵入子宮肌層的深度分三度：I度：距子宮內(nèi)膜基底層下一個低倍視野中發(fā)現(xiàn)內(nèi)膜間質(zhì)或腺體;II度：侵入深度超出 I度范圍到子宮肌層中部;III度：侵入深度超過子宮肌層中部[1]。

按照術(shù)后病理提示子宮內(nèi)膜間質(zhì)和腺體在肌層中的密度將子宮內(nèi)膜的侵入深度分為三級：輕度：每一個低倍視野下可見1～ 3個宮內(nèi)膜腺體小島;中度：每一個低倍視野下可見 4～ 9個;重度：每一個低倍視野下可見≥10個宮內(nèi)膜腺體小島[1]。

1.3 方法及步驟

病理切片后 SABC法進(jìn)行免疫組化染色;對照：陰性對照為 N F_kB PBS緩沖液代替一抗 ,陽性對照選取已知組織陽性片

1.4 結(jié)果判定

觀察陽性反應(yīng),以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為其陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)著色的程度將強(qiáng)度表達(dá)為：陰性(-)：細(xì)胞無著色,記分為 0分。弱陽性 (+ )：細(xì)胞輕度著色染成淡黃色 ,陽性細(xì)胞數(shù) ＜25%,記分為1分。陽性(++)：細(xì)胞著色染成黃色,陽性細(xì)胞數(shù)25%～ 50%,記分為2分。強(qiáng)陽性 (+++)：細(xì)胞明顯著色,呈棕黃色,陽性細(xì)胞數(shù)＞ 50%,記分為 3分。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

采用檢驗秩和檢驗和多層分析 Cochran-Mantel-Haenszel法檢驗。所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計均在 SAS9.1.3軟件上進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 N F_κ B p65在子宮腺肌病中的表達(dá)

子宮腺肌病組 62例,陽性率為74.19%,對照組陽性率32.50%,NF_κB p65在子宮腺肌病中的陽性表達(dá)率顯著高于對照組,說明 NF_κB p65在子宮腺肌病中特異性高。

表1 NF_κB p65在子宮腺肌病中的表達(dá)

2.2 N F_κ B p65在子宮腺肌病在位內(nèi)膜不同月經(jīng)周期中的表達(dá)

子宮腺肌病組中增生期38例,分泌期24例,增生期陽性率36.36%,分泌期陽性率33.3%,無顯著差異,提示 NF_κ B p65的表達(dá)無周期性變化,不受卵巢激素的調(diào)節(jié)。

表2 NF_κ B p65在子宮腺肌病在位內(nèi)膜不同月經(jīng)周期中的表達(dá)

2.3 N F_κ B p65在子宮腺肌病不同程度痛經(jīng)中的表達(dá)

子宮腺肌病組中不同痛經(jīng)程度中陽性率分別為：無疼痛組16.67%、輕度疼痛組80.77%、中度疼痛組93.75%、重度疼痛組100%,隨著疼痛程度的增高表達(dá)增強(qiáng) ,NF_κB p65與子宮腺肌病不同程度痛經(jīng)正相關(guān)。

表3 NF_κ B p65在子宮腺肌病不同程度痛經(jīng)中的表達(dá)(問卷)

2.4 N F_κ B p65在不同病理分級的子宮腺肌病中的表達(dá)

按浸潤深度的病理分級中浸潤深度越深,陽性表達(dá)越強(qiáng),即 N F_κB p65與子宮腺肌病不同浸潤深度的病理分級正相關(guān)。

表4 NF_κ B p65在不同病理浸潤深度的子宮腺肌病中的表達(dá)

按浸潤密度的病理分級中浸潤密度越大,陽性表達(dá)越強(qiáng),即 N F_κ B p65與子宮腺肌病不同浸潤密度的病理分級正相關(guān)。

表5 NF_κ B p65在不同病理浸潤密度的子宮腺肌病中的表達(dá)

3 討論

在本研究中,NF_κB p65在子宮腺肌病病灶中高表達(dá),與對照組相比,差別有顯著性 (P ＜0.01)。這與預(yù)計結(jié)果相符合 ,這可能與 N F_κB上調(diào)多種細(xì)胞因子的表達(dá)[2]有關(guān),如細(xì)胞因子、黏附分子、細(xì)胞外基質(zhì)蛋白水解酶、趨化因子及血管內(nèi)皮生長因子、生長因子等,這些因子的過度表達(dá)參與了炎性疾病及腫瘤發(fā)生的病理過程。而子宮腺肌病是一種具有腫瘤特性的良性疾病。另外,受 NF_κ B調(diào)控的因子如TN F_ α、IL_1B、GM-CSF、MM P2、MM P9、INF- γ等都已證實與子宮腺肌病的發(fā)生密切相關(guān)[1]。在本研究中,在位內(nèi)膜的增生期、分泌期都有 N F_κB的表達(dá),但表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義 ,說明 NF_κ B的表達(dá)與月經(jīng)周期無關(guān)。在本研究中,NF_κBp65在不同程度痛經(jīng)中的表達(dá)隨疼痛程度加重而表達(dá)增強(qiáng),N F_κ Bp65表達(dá)強(qiáng)度與痛經(jīng)程度正相關(guān)的機(jī)理可能與此有關(guān)。NF_kB p65在不同病理分級中亦隨病理分級增高表達(dá)增強(qiáng),提示可能在子宮腺肌病發(fā)生、發(fā)展過程中N F_kB p65發(fā)揮了一定作用。另外 ,病理閱片過程中發(fā)現(xiàn)有些痛經(jīng)程度嚴(yán)重的病例異位病灶的腺腔巨大,可能過度擴(kuò)大的腺腔導(dǎo)致的機(jī)械張力增大而導(dǎo)致痛經(jīng)嚴(yán)重。我們可以以N F_κ B p65抑制劑如 NF_Κb ASODN為切入點(diǎn),在臨床探尋非手術(shù)治療子宮腺肌病的新方法。

[1]王世閬.子宮肌瘤與子宮腺肌病 [M].北京：人民軍醫(yī)出版社,2007,163-164

[2]Bours V,Dejardin E.The N F-kappaB transcription factor and cancer.H igh ex pression of NF-kappaB And I kappaB-related proteins in tumor cell lines[J].Biochem Pharmcol,1994,47(1)：145-152