抵抗素、脂聯(lián)素濃度與高血壓病血瘀證關(guān)系的研究1)

陳貴海,武 麗,鄧 巍,陳 娟,曾曉艷,運晨霞

選擇與肥胖密切相關(guān)的原發(fā)性高血壓病患者為研究對象,通過對血清抵抗素、脂聯(lián)素、瘦素等脂肪因子及血漿內(nèi)皮素等血瘀證相關(guān)指標(biāo)的觀察,分析肥胖與血瘀證之間的相互關(guān)系,為活血化瘀治療肥胖及預(yù)防肥胖相關(guān)性疾病提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 病例均來源于2006年6月—2007年5月廣西壯族自治區(qū)南寧市中醫(yī)醫(yī)院內(nèi)科病房住院病例。其中符合納入標(biāo)準(zhǔn)的原發(fā)性高血壓病例共57例。根據(jù)患者臨床表現(xiàn)分為血瘀證組與非血瘀證組。血瘀證診斷按中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會活血化瘀專業(yè)委員會于1982年制定、1986年修訂的血瘀證診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中血瘀證組 14例,血瘀證檢出率為 25%,男 6例,女 8例,年齡(55.12±6.67)歲,病程(7.29±3.24)年;非血瘀證組43例,男23例,女20例,年齡(53.17±13.47)歲,病程(6.68±4.29)年。兩組年齡、性別、職業(yè)構(gòu)成等無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。研究過程中無病例脫落。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 高血壓病診斷采用1999年10月中華人民共和國衛(wèi)生部、高血壓聯(lián)盟制定《中國高血壓防治指南(試行本)》:收縮壓≥18.7 kPa或舒張壓≥12.0 kPa為高血壓;年齡45歲～75歲。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 繼發(fā)性高血壓;合并心肌梗死、腦出血等嚴(yán)重并發(fā)癥者;伴重度心肺功能不全、重度心律失常,肝臟、腎臟、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者;精神病患者,妊娠、哺乳期婦女;年齡不滿45歲或超過75歲者;拒絕參加研究者。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器 TDL-5000B放免專用冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);SN-695B型智能放免γ測量儀(上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠);MK3酶標(biāo)儀(熱電上海儀器有限公司)。

1.2.2 試劑 脂聯(lián)素、抵抗素ELISA試劑盒由美國ADL公司生產(chǎn),上海卓康生物科技有限公司代理;腫瘤壞死因子、內(nèi)皮素放免試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所生產(chǎn);胰島素放免試劑盒由天津協(xié)和醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn);瘦素放免試劑盒由解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所生產(chǎn)。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本制作 全部操作過程中,室內(nèi)溫度控制在18℃～25℃。空腹測體質(zhì)量、身高后,取靜脈血5 mL,于含有 30 μ L EDTA和40μL抑肽酶的試管中加入2 mL血液,混勻,于空試管中加入血液3 mL自凝。抗凝血立即以4℃、3 000 r/min離心10 min,取血漿 1 mL,置-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。自凝管在室溫下自凝析出血清?以 4 000 r/min,4℃離心20 min,取血清1.5 mL,分為 2份,酶法檢測血清空腹血糖、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C),另一份置-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 檢測分析 取血漿或血清一份,室溫下復(fù)融,置4℃,3 000 r/min離心5 min,取上清液測定。根據(jù)藥盒說明書提供的加液程序操作,由MK3酶標(biāo)儀檢測,或SN-695B型智能放免γ測量儀預(yù)先編制程序,直接給出有關(guān)參數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算樣品濃度。酶免分析在廣西中醫(yī)學(xué)院微生物與免疫學(xué)實驗室進(jìn)行,放免檢測在廣西中醫(yī)學(xué)院附屬瑞康醫(yī)院同位素實驗室完成。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SAS 9.1 for windows軟件包完成。計數(shù)資料采用χ2檢驗、等級資料采用 Ridit分析;計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,方差齊性檢驗采用方差分析,組間比較采用t檢驗(方差不齊時采用t'檢驗),并作總體樣本多元線性相關(guān)分析。P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清抵抗素、脂聯(lián)素、瘦素、胰島素水平比較(見表1) 與非血瘀證組比較,血瘀證組瘦素濃度升高,脂聯(lián)素水平降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);血清抵抗素、胰島素均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。詳見表1。

表1 兩組血清抵抗素、脂聯(lián)素、瘦素、胰島素水平比較(±s)

表1 兩組血清抵抗素、脂聯(lián)素、瘦素、胰島素水平比較(±s)

組別 n 抵抗素(μ g/L) 脂聯(lián)素(mg/L) 瘦素(μ g/L) 胰島素(mIU/L)非血瘀證組 43 99.510 2±60.707 1 15.565 5±6.576 3 3.651 2±1.442 8 16.311 1±8.300 3血瘀證組 14 106.674 5±52.445 8 11.030 9±6.133 4 7.440 1±4.135 2 12.530 4±6.137 6 P＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05

2.2 兩組患者血漿內(nèi)皮素、腫瘤壞死因子水平比較(見表2)與非血瘀證組比較,血瘀證組血漿內(nèi)皮素濃度升高(P＜0.05),血漿腫瘤壞死因子水平無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

表2 兩組患者血漿內(nèi)皮素、腫瘤壞死因子水平比較(±s)

表2 兩組患者血漿內(nèi)皮素、腫瘤壞死因子水平比較(±s)

組別 n 內(nèi)皮素(ng/L) 腫瘤壞死因子(μ g/L)非血瘀證組 43 41.246 5±25.601 6 11.812 4±6.745 2血瘀證組 14 58.286 1±27.922 4 14.092 4±5.621 4 P＜0.05 ＞0.05

2.3 多元線性相關(guān)分析 以抵抗素為因變量,以瘦素等脂肪因子、糖脂代謝指標(biāo)為自變量,進(jìn)行總樣本多元線性相關(guān)分析。由簡單相關(guān)系數(shù)矩陣發(fā)現(xiàn):原發(fā)性高血壓病患者抵抗素與脂聯(lián)素、瘦素、胰島素等均未見顯著相關(guān)關(guān)系(P＞0.05);脂聯(lián)素與瘦素(r=-0.150 8,P=0.085 3)、胰島素(r=-0.203 2,P=0.106 8)呈負(fù)相關(guān)趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義;與HDL-C正相關(guān)(r=0.260 6,P＜0.05);瘦素與胰島素呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.714 2,P＜0.01)。

3 討 論

抵抗素是2000年由Steppan發(fā)現(xiàn)的一種由脂肪細(xì)胞分泌的蛋白激素。其生物學(xué)效應(yīng)仍不完全清楚,主要是對抗胰島素,使血糖水平升高、脂肪細(xì)胞增生而致肥胖。許多研究結(jié)果表明,抵抗素降低糖耐量,與中心型肥胖、胰島素抵抗有關(guān),從而在糖尿病的發(fā)病中具有重要作用。近期研究結(jié)果顯示,抵抗素參與血管內(nèi)皮細(xì)胞功能穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)。因此推測抵抗素在2型糖尿病和心血管病變發(fā)生發(fā)展過程中可能有重要病理生理學(xué)作用。但是本研究未發(fā)現(xiàn)原發(fā)性高血壓患者抵抗素與瘦素、胰島素等脂肪因子之間的相關(guān)關(guān)系,也未見到其與內(nèi)皮素之間存在著某種必然聯(lián)系,與何玉娟等[1,2]的研究結(jié)果不一致?？赡艿挚顾夭皇窃l(fā)性高血壓病發(fā)病和血瘀證形成的關(guān)鍵因素,有待進(jìn)一步研究。

脂聯(lián)素是1995年由Scherer發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細(xì)胞特異性分泌的一種蛋白激素。血清含量與體質(zhì)量指數(shù)呈負(fù)相關(guān),糖尿病患者血漿含量降低,而伴有動脈粥樣硬化的糖尿病患者含量更低,表明脂聯(lián)素在調(diào)節(jié)糖代謝中具有重要作用。脂聯(lián)素還有抗動脈粥樣硬化的效應(yīng),并參與血管損傷的修復(fù)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),高血壓患者脂聯(lián)素,在血瘀證與非血瘀證之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,而且與HDL-C呈正相關(guān),表明脂聯(lián)素具有防止高血壓及高血壓病患者血瘀證形成的作用;發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素與瘦素、脂聯(lián)素與胰島素呈負(fù)相關(guān)趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與目前大多數(shù)研究結(jié)果基本一致[1,3]。

瘦素是一種脂肪組織源激素。給予肥胖基因發(fā)生突變而缺乏瘦素的肥胖鼠外源性重組瘦素,可使其攝食減少,能量消耗增多,體質(zhì)量下降,高血糖得以糾正。但是對于大多數(shù)肥胖患者而言,瘦素抵抗導(dǎo)致糖利用障礙,脂肪量進(jìn)一步增加,甚至誘發(fā)代謝綜合征乃至糖尿病。本研究結(jié)果顯示:瘦素與內(nèi)皮素相關(guān),二者在血瘀證與非血瘀證之間均有統(tǒng)計學(xué)意義,表明瘦素與血瘀證的聯(lián)系可能是通過調(diào)節(jié)相關(guān)血管活性因子表達(dá)實現(xiàn)的。與蘇彤春等[4]及我們既往的研究結(jié)果[5-7]基本一致,但與陸紅等[3]研究結(jié)果不同,還有待進(jìn)一步研究。

[1] 何玉娟,王衛(wèi)民,崔永生.原發(fā)性高血壓與血清抵抗素、脂聯(lián)素水平的關(guān)系[J].中國實用神經(jīng)疾病雜志,2009,12(9):84-85.

[2] 董平栓,王紹欣,李志鵑,等.肥胖高血壓患者血清抵抗素水平與代謝紊亂的臨床研究[J].醫(yī)藥論壇雜志,2008,29(14):84-86.

[3] 陸紅,朱翠鳳,周薇.脂肪內(nèi)分泌激素在糖尿病、高血壓患者中的表達(dá)[J].中華全科醫(yī)學(xué),2009,7(5):451-453.

[4] 蘇彤春,霍海洋.原發(fā)性高血壓血清瘦素水平變化[J].山東醫(yī)藥,2008,48(19):101-102.

[5] 陳利國,陳貴海,李永峰,等.高血壓病血瘀證與非血瘀證患者血清瘦素水平的比較[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2002,22(10):745-747.

[6] 陳貴海,孫建,陳利國.肥胖與血瘀證的相關(guān)性[J].中國臨床康復(fù),2005,9(11):206-209.

[7] 陳利國,屈援,陳貴海,等.高血壓和Ⅱ型糖尿病患者血清瘦素水平分析[J].高血壓雜志,2002,10(4):307-309.