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    高膽固醇血癥患者血漿對氧磷酯酶1活性變化的研究

    2010-06-20 08:38:56蔣興亮劉素蘭張均王光華
    中國臨床醫(yī)學(xué) 2010年1期
    關(guān)鍵詞:過氧化物脂蛋白血癥

    蔣興亮 劉素蘭 張均 王光華

    (川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科,四川 南充 637000)

    高膽固醇血癥是導(dǎo)致動脈粥樣硬化(atherosclerosis,As)的危險因素之一。高膽固醇導(dǎo)致體內(nèi)自由基代謝平衡失調(diào),脂蛋白極易被自由基及脂質(zhì)過氧化物氧化修飾,其結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變有關(guān)[1]。對氧磷酯酶1(paraoxonase1,PON1)是肝臟合成和分泌的一種能夠水解脂質(zhì)過氧化物的抗氧化酶[2],本研究測定高膽固醇血癥患者PON1活性及血脂、氧化修飾低密度脂蛋白(ox-LDL)和丙二醛(MDA)水平,了解PON1活性在高膽固醇血癥患者中的變化及與高膽固醇血癥之間的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 研究對象 2007年10月—2008年10月在我院門診就診的高膽固醇(TC)[血漿 TC≥6.22 mmol?L-1,三酰甘油(TG)<1.70 mmol?L-1)]患者109例。其中男性71例,女性38例,年齡35~6957.8±8.1歲。正常膽固醇[血漿TC <5.18 mmol?L-1,且低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)<3.37 mmol?L-1,TG <1.70 mmol?L-1]組為 66例健康體檢者,其中男性43例,女性23例,年齡34~65歲,平均55.1±7.7歲。所有受檢者均無影響脂肪代謝的疾病(如糖尿病、甲狀腺功能減低或肝腎功能不全等);近2個月無急性心肌梗死、心絞痛和腦血管意外,血壓穩(wěn)定在正常水平;至少1個月內(nèi)未用過降脂藥、抗血小板藥及鈣離子拮抗劑。

    1.2 方法

    1.2.1 標本收集 所有受檢者禁食12 h,于清晨采集靜脈血液,肝素抗凝,分離血漿,置-20℃保存?zhèn)錂z。

    1.2.2 血漿PON1活性測定 以對氧磷為底物,通過測定對氧磷的水解產(chǎn)物對硝基苯酚的產(chǎn)生速率來計算PON1活性[3]。

    1.2.3 血漿MDA測定 用硫代巴比妥酸法。試劑盒由南京建成生物工程公司提供。

    1.2.4 血漿ox-LDL的測定 用單抗ELISA法。試劑盒由上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供。

    1.2.5 血脂測定 采用酶法測定TG、TC,用一步酶法分別測定高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C),透射免疫濁度法分別測定載脂蛋白A(apoA)、載脂蛋白B(apoB)和脂蛋白(a)[LP(a)]。試劑盒由浙江東甌生物工程公司提供。所有生化項目均在日立7170S生化分析儀上完成。

    2 結(jié) 果

    2.1 高膽固醇血癥組和對照組血脂水平的比較高膽固醇血癥組TC、LDL-C濃度顯著高于對照組(P<0.01),LP(a)、apoB高于對照組(P<0.05),其他血脂指標差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表1)。

    表1 高膽固醇血癥組與對照組血脂水平的比較()

    表1 高膽固醇血癥組與對照組血脂水平的比較()

    注:與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01

    項目 高T C組(n=109)對照組(n=66)TG(mmol? L-1) 1.39±0.52 1.32±0.44 TC(mmol?L-1) 6.98±1.38** 4.49±0.51 HDL-C(mmol?L-1) 1.24±0.30 1.26±0.32 LDL-C(mmol?L-1) 5.02±0.92** 2.50±0.71 apoA(g?L-1) 1.20±0.21 1.22±0.24 apoB(g?L-1) 1.18±0.51* 0.81±0.32 LP(a)(mg?L-1) 192.3±129.0* 160.3±103.1

    2.2 高膽固醇血癥組與對照組血漿PON1、MDA、ox-LDL的水平 高膽固醇血癥組患者血漿PON1活性顯著低于對照組(P<0.01),而血漿MDA、ox-LDL水平顯著高于對照組(P<0.01)(表2)。

    表2 高膽固醇血癥患者血漿PON1、ox-LDL、MDA()

    表2 高膽固醇血癥患者血漿PON1、ox-LDL、MDA()

    注:與對照組比較,*P<0.05

    組別 例數(shù) PON1(kU?L-1)MDA(μmol?L-1)ox-LDL(μg?L-1)對照組 66 171.4±66.2 9.7±2.3 455.1±178.2高 TC組 109 138.1±62.4*12.8±3.8*589.1±198.2*

    2.3 高膽固醇血癥患者血漿PON1與 ox-LDL、MDA的關(guān)系 PON1分別與血脂、ox-LDL、MDA進行直線相關(guān)分析,結(jié)果顯示PON1活性與MDA(r=-0.441,P<0.01)及 ox-LDL(r=-0.402,P<0.01)呈顯著負相關(guān),與血脂無相關(guān)性。

    3 討 論

    高膽固醇血癥通過多種機制誘導(dǎo)心腦大血管和微血管系統(tǒng)的致炎癥和致血栓狀態(tài)、氧化應(yīng)激損傷、損害血管內(nèi)皮細胞代謝和功能,最終導(dǎo)致As的發(fā)生和發(fā)展[4]。高膽固醇血癥時抗氧化能力下降,氧自由基(OFR)生成增加,通過損傷血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)及功能,誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞粘附分子基因表達,促進局部炎性反應(yīng)和細胞增殖,增強白細胞與內(nèi)皮細胞的粘附,滅活一氧化氮(NO)生物活性,從多方面作用參與 As的發(fā)生發(fā)展。本研究采用MDA及ox-LDL作為評價高膽固醇血癥氧化應(yīng)激的指標,檢測MDA及ox-LDL水平可間接反映體內(nèi)過氧化物的水平及受氧化損傷的程度。結(jié)果顯示,高膽固醇血癥患者血漿MDA及ox-LDL水平較正常對照組顯著升高(P<0.01),提示在高膽固醇血癥狀態(tài)時體內(nèi)氧化與抗氧化的平衡被破壞,導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化物的聚積。

    本研究結(jié)果顯示,高膽固醇血癥組患者血漿PON1活性較對照組顯著降低(P<0.01),且PON1活性與MDA水平及ox-LDL水平呈顯著負相關(guān)(P<0.01)。PON1作為一種抗氧化酶,與體內(nèi)其他抗氧化酶或物質(zhì)一樣,在水解過氧化物的過程中活性逐步下降,機體抗氧化能力降低,使其直接參與血中脂質(zhì)過氧化物的水解能力減弱,不能有效清除過氧化物,特別是脂質(zhì)過氧化物。過氧化物使 LDL、HDL發(fā)生氧化修飾,其結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,尤其是低密度脂蛋白氧化后,通過多種機制可引發(fā)及促進As病變,這是As的始動和關(guān)鍵環(huán)節(jié)[5]。因此,在高膽固醇血癥的治療中,不僅要加強血脂的調(diào)節(jié),而且應(yīng)重視提升包括PON1在內(nèi)的機體的抗氧化能力。

    總之,高膽固醇血癥患者產(chǎn)生大量的過氧化物,使包括PON1在內(nèi)的抗氧化酶活性降低,導(dǎo)致機體的抗氧化能力下降,氧化與抗氧化平衡被打破,最終對機體造成不利影響。

    1 T aniyama Y,G riendling KK.Reactive oxygen species in the vasculature:M olecular and cellular mechanisms[J].Hypertension,2003,42(6):1075-1081.

    2 Mackness B,Hine D,McElduff P,et al.High C-reactive protein and low paraox onase 1 in diabetes as risk factors for coronary heart disease[J].Atherosclerosis,2006,186(2):396-401.

    3 蔣興亮,龔國忠,周京國,等.血漿對氧磷酯酶1活性在各類肝損害病程中的變化及意義[J].中國臨床醫(yī)學(xué),2006,13(4):584-586.

    4 Kitayama J,Faraci M R,Lentz SR,et al.Cerebral vascular dysfunction during hypercholesterolemia[J].Stroke,2007,38(7):2136-2141.

    5 Shimada K,M okuno H,Matsunaga E,et al.Circulating oxidized low-density lipoprotein is an independent predictor for cardiac event in patients with coronary artery disease[J].A therosclerosis,2004,174(2):343-347.

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