川射干的化學(xué)成分研究

楊勇勛，董小萍

川射干是鳶尾科鳶尾屬植物鳶尾Iris tectorum Maxim.的干燥根莖，為四川道地藥材。本品具有清熱解毒，消痰利咽之功效，用于咽喉腫痛，痰咳氣喘。收載于《中國藥典》2010年版一部。為尋找川射干的活性成分，闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，作者對該中藥材進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，現(xiàn)從95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位，分離并鑒定出9個化合物的結(jié)構(gòu)，均為已知化合物，其中Aurantiamide acetate為一個二肽化合物?，F(xiàn)代化學(xué)成分研究發(fā)現(xiàn)，鳶尾科植物含有黃酮類、鳶尾三萜類，苯醌類、以及酚類等化合物[1]，但未有肽化合物的報(bào)道，因此，本實(shí)驗(yàn)分離得到的二肽類化合物Aurantiamide acetate是首次從本科植物分得，它具有抗織織蛋白酶、抗氧化等作用[2～3]。

1 材料與儀器

川射干采購于成都市荷花池藥材市場，經(jīng)本校藥學(xué)院中藥品種質(zhì)量與資源教研室嚴(yán)鑄云博士鑒定為鳶尾科鳶尾屬植物鳶尾Iris tectorum Maxim.的干燥根莖。

Varian Union 400/54和Burker AV－600核磁共振儀，Bruker BioToF Q高分辨質(zhì)譜儀，柱色譜硅膠、薄層色譜硅膠H、薄層色譜硅膠GF254(青島海洋化工廠產(chǎn)品)，Lichroprep Rp－18 gel(Merck公司產(chǎn)品)，其余均為分析純試劑。

2 提取與分離

取去除雜質(zhì)的川射干藥材4.6 kg，粉碎成粗粉，分別用6倍、6倍、4倍的95%乙醇回流提取3次，第一、二次每次1.5 h，第三次1 h，稍冷后趁熱過濾。提取液減壓回收乙醇至無醇味，得浸膏3209 g，浸膏用適量水分散后依次用石油醚(60～90℃)、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取液減壓濃縮回收溶劑，得石油醚(60～90℃)部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏(840 g)、正丁醇部位浸膏，剩余的水層濃縮得水部位浸膏。

取乙酸乙酯浸膏210 g拌樣上硅膠柱，以三氯甲烷－甲醇梯度洗脫，其洗脫餾分再經(jīng)反復(fù)硅膠、反相硅膠柱色譜等分離，得12個單體化合物，經(jīng)理化檢識和1HNMR、13C－NMR、HR－MS波譜鑒定手段，鑒定出其中9個單體化合物，分別為:Aurantiamide acetate(Ⅰ，8 mg)，鼠李秦素(Ⅱ，3 mg)，Kanzakiflavone －2(Ⅲ，6 mg)，鳶尾苷元(Ⅳ，＞5 g)，鳶尾甲黃素 B(Ⅴ，100 mg)，鳶尾甲黃素 A(Ⅵ，100 mg)，二甲基鳶尾苷元(Ⅶ，6 mg)，茶葉花寧(Ⅷ，100 mg)，β －谷甾醇(Ⅸ，30 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物Ⅰ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。HR-ESI-MS m/z:[M+Na]+467.1951，[M+K]+483.1703，[給出的最佳分子式為C27H28N2NaO4(理論值:467.1941)]。1H －NMR(600 MHz，CDCl3):δ 2.03(3H，s，C2″'－ H)，2.75(2H，m，C3'－ H)，3.05(1H，dd，J=13.8，8.4 Hz，C3－ H)，3.22(1H，dd，J=13.8，6.0 Hz，C3－ H)，3.82(1H，dd，J=11.3，4.2 Hz，C1'－ H)，3.94(1H，dd，J=11.4，5.1 Hz，C1'－ H)，4.35(1H，m，C2'－ H)，4.75(1H，dd，J=14.6，7.9 Hz，C2－H)，5.89(1H，d，J=7.9 Hz，Nα － H)，6.70(1H，d，J=8.0 Hz，Nβ － H)，7.07(2H，d，J=7.5 Hz，C5'，9'－H)，7.16(3H，m，C6'，7'，8'－ H)，7.44(2H，t，J=8.1 Hz，C4″，6″－ H)，7.52(1H，t，J=7.2 Hz，C5″－ H)，7.71(2H，d，J=8.0 Hz，C3″，7″－ H)。13C － NMR(600 MHz，CDCl3):δ 170.7(C －1″')，170.2(C － 1)，167.1(C－1″)，136.7(C －4')，136.6(C －4)，133.7(C －2″)，131.9(C － 5″)，129.3(C － 5，9)，129.1(C － 6'，8')，128.8(C － 4″，6″)，128.6(C － 6，8)，128.6(C － 3″，7″)，127.1(C － 7')，127.0(C － 5'，9')，126.7(C －7)，64.6(C －1')，55.0(C －2)，49.5(C －2')，38.4(C－3)，37.4(C －3')，20.8(C －2″')。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4－5]一致，故鑒定化合物Ⅰ為 Aurantiamide acetate，其結(jié)構(gòu)式見圖1。

圖1 化合物Ⅰ(aurantiamide acetate)的結(jié)構(gòu)式

化合物Ⅱ 黃色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H －NMR(600 MHz，DMSO －d6):δ 12.45(1H，s，C5－OH)，9.74(1H，s，C3－OH)，9.51(1H，s，C4'－ OH)，7.78(1H，d，J=1.8 Hz，C2'－ H)，7.74(1H，dd，J=8.4，2.2 Hz，C6'－ H)，6.94(1H，d，J=8.3 Hz，C5'－ H)，6.78(1H，d，J=2.4 Hz，C8－ H)，6.35(1H，d，J=2.2 Hz，C6－H)，3.87(3H，s)與 3.85(3H，s)為 C7，3'－ OCH3信號。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]一致，故鑒定化合物Ⅱ?yàn)槭罄钋厮?rhamnazin)。

化合物Ⅲ 黃色粉末(三氯甲烷－甲醇)。1HNMR(600 MHz，DMSO － d6):δ 6.86(1H，s，C3－H)，10.35(1H，s，C4'－ OH)，13.02(1H，s，C5－ OH)，6.93(2H，d，J=8.7 Hz，C3'，5'－ H)，7.94(2H，d，J=8.4 Hz，C2'，6'－ H)，6.95(1H，s，C8－ H)，6.17(2H，s，C6，7－OCH2O－)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]一致，故鑒定化合物Ⅲ為Kazakiflavone－2。

化合物Ⅳ 無色針晶(甲醇);UVλmax(甲醇):266 nm。1H －NMR(400 MHz，DMSO －d6):δ 8.33(1H，s，C2－ H)，13.06(1H，s，C5－ OH)，9.59(1H，s，C4'－ OH)，10.77(1H，s，C7－ OH)，6.82(2H，d，J=8.4 Hz，C3'，5'－ H)，7.37(2H，d，J=8.8 Hz，C2'，6'－H)，6.50(1H，s，C8－ H)，3.75(3H，s，C6－ OCH3)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]一致，故鑒定化合物Ⅳ為鳶尾苷元(tectorigenin)。

化合物Ⅴ 無色針晶(甲苯－甲醇)。1H－NMR(600 MHz，DMSO － d6):δ 8.34(1H，s，C2－ H)，13.05(1H，s，C5－ OH)，9.11(1H，s，C4'－ OH)，10.72(1H，s，C7－OH)，6.48(1H，s，C8－ H)，7.12(1H，d，J=1.7 Hz，C2'－ H)，6.97(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，C6'－ H)，6.81(1H，d，J=8.2 Hz，C5'－ H)，3.78(3H，s)與 3.74(3H，s)為 C6，3'－ OCH3信號。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]一致，故鑒定化合物Ⅴ為鳶尾甲黃素B(iristectorigenin B)。

化合物Ⅵ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H －NMR(600 MHz，DMSO －d6):δ 8.33(1H，s，C2－H)，13.06(1H，s，C5－ OH)，10.75(1H，s，C7－OH)，9.03(1H，s，C3'－ OH)，6.50(1H，s，C8－ H)，7.03(1H，d，J=2.0 Hz，C2'－ H)，6.97(1H，d，J=8.5 Hz，C5'－ H)，6.94(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，C6'－ H)，3.75(3H，s)與 3.80(3H，s)為 C6，4'－OCH3信號。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]一致，故鑒定化合物Ⅵ為鳶尾甲黃素A(iristectorigenin A)。

化合物Ⅶ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H －NMR(600 MHz，DMSO －d6):δ 8.49(1H，s，C2－ H)，12.88(1H，s，C5－ OH)，7.02(2H，d，J=8.8 Hz，C3'，5'－ H)，7.53(2H，d，J=8.5 Hz，C2'，6'－H)，6.83(1H，S，C8－ H)，3.74(3H，s)、3.80(3H，s)與 3.93(3H，s)為 C6，7，4'－ OCH3質(zhì)子信號。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]基本一致，故鑒定化合物Ⅶ為二甲基鳶尾苷元(dimethyltectorigenin)。

化合物Ⅷ 無色片狀結(jié)晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]。1H － NMR(600 MHz，CDCl3)δ 2.52(3H，s，C1－ COCH3)，3.88(3H，s，C3－ OCH3)，6.55(1H，s，C4－OH)，6.91(1H，d，J=8.6 Hz，C5－ H)，7.49(2H，t，C2'，6'－ H)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]一致，故鑒定化合物Ⅷ為茶葉花寧(apocynin)。

化合物Ⅸ 無色針晶[石油醚(60～90℃)－丙酮]，硅膠TLC色譜經(jīng)三種不同展開劑展開，噴香草醛硫酸溶液，加熱，均與β－谷甾醇對照品在相同位置顯相同的紫紅色斑點(diǎn)。1H－NMR(600 MHz，CDCl3):δ 3.53(1H，m，C3－ OH)，5.35(1H，d，J=2.8 Hz，C6－H)。根據(jù)以上理化性質(zhì)與光譜數(shù)據(jù)，鑒定化合物Ⅸ為β－谷甾醇(β－sitosterol)。

4 致謝

中科院成都生物研究所的李國友老師對化合物Ⅰ的波譜解析給予了很大的幫助，在此表示最誠摯的謝意。

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