抗炎合劑質(zhì)量控制的初步探討

李洪兵

江蘇省淮安市中醫(yī)院（223002）

抗炎合劑是由金銀花、連翹、丹皮、赤芍等10味藥材加工而成的制劑。筆者通過查閱文獻(xiàn)[1]，采用TLC法鑒別制劑中的連翹，采用HPLC法測(cè)定綠原酸的含量，所建立的方法快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好、結(jié)果滿意，為有效控制該制劑的質(zhì)量提供好的方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

METTLER、TOLEDO、AG135型電子分析天平；LC-20AD高效液相色譜儀。

1.2 試藥

綠原酸對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所；批號(hào)：200413）；連翹苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所；批號(hào)：200610 ）；連翹對(duì)照藥材（中國(guó)藥品生物制品檢定所；批號(hào)：200506 ）；甲醇為色譜純；三氯甲烷、冰醋酸均為分析純；硅膠G：青島海洋；抗炎合劑：樣品均為淮安市中醫(yī)院制劑；金銀花、連翹、丹皮、赤芍、皂刺等均為淮安市中醫(yī)院飲片。

2 定性鑒別方法和結(jié)果

取本品5mL，加甲醇10mL搖勻，作為供試品溶液。另取連翹對(duì)照藥材，作為對(duì)照藥材溶液，再取連翹苷對(duì)照品加甲醇制成1mg/mL的溶液，作為對(duì)照品溶液。根據(jù)該藥處方組成，按比例稱取除連翹的藥材，按制法制成陰性對(duì)照溶液。吸取上述4種溶液各5μL點(diǎn)于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（5∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫色斑點(diǎn)。缺連翹的陰性對(duì)照品無干擾，見圖1。

圖1 色譜對(duì)照?qǐng)D

3 含量測(cè)定

3.1 色譜條件

3.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

取對(duì)照品溶液和供試品溶液進(jìn)行紫外掃描，測(cè)定其最大吸收波長(zhǎng)，確定檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm，見圖2和圖3。

圖2

圖3

3.1.2 試驗(yàn)條件

色譜柱：Phenomenex C18柱，250mm×4.60mm，5μm 流動(dòng)相：甲醇-水-冰醋酸（20∶80 ∶1）[2]；檢測(cè)波長(zhǎng)：324nm；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：10μL；理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算不低于2000。

3.2 對(duì)照品的制備

精密稱取綠原酸對(duì)照品15.42mg置20mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，制成對(duì)照品濃溶液。精密吸取2mL置40mL量瓶中，加甲醇制成38.55μg/mL的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.3 供試品的制備

精密量取本品5mL，置25mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

3.4 陰性對(duì)照溶液的制備

根據(jù)該藥處方組成，按比例稱取除金銀花的藥材，按制法制成陰性對(duì)照溶液。

3.5 線性關(guān)系

精密稱取綠原酸對(duì)照品15.42mg，置20mL量瓶中，再精密吸取2mL置40mL量瓶中，加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度。精密吸取上述溶液2、5、10、20、50μL分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y=4.138×108X+1.580×104，r=0.9999，線性范圍為0.0771～1.9275μg。

3.6 精密度

精密吸取綠原酸對(duì)照品溶液10μL注入液相色譜儀，RSD =0.1%（n=6）。

3.7 穩(wěn)定性

分別取綠原酸對(duì)照品溶液在配制后0、0.5、1、2、4、6、8h進(jìn)樣，測(cè)得峰面積，結(jié)果表明二者均在8h內(nèi)穩(wěn)定，RSD為0.2%。

3.8 回收率試驗(yàn)

取已知含量的供試品5mL分別加入綠原酸對(duì)照品濃溶液1mL，置50mL量瓶中，加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度，濾過，精密吸取續(xù)濾液10μL注入液相色譜儀，測(cè)定，見表1。

表1 綠原酸回收率測(cè)定結(jié)果

3.9 供試品測(cè)定

分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液10μL進(jìn)樣，測(cè)得峰面積，計(jì)算得制劑中乙酰水楊酸、水楊酸的含量，測(cè)定結(jié)果見表1和圖4～圖6。

表2 抗炎合劑中綠原酸的含量測(cè)定結(jié)果

圖4 綠原酸對(duì)照品

圖5 供試品

圖6 缺金銀花陰性對(duì)照

4 小結(jié)與結(jié)論

抗炎合劑為淮安市中醫(yī)院制劑，市場(chǎng)沒有銷售，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單，不能對(duì)其進(jìn)行有效的質(zhì)量控制，此方法簡(jiǎn)便，快速，準(zhǔn)確，為提高和完善該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)[3]。

[1]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(中藥成方制劑第十一冊(cè))[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:405-406.

[3]趙志軍,王連水,張楠.菊藍(lán)抗流感片薄層鑒別及綠原酸含量測(cè)定方法[J].中成藥,2005,27(9):1111-1113.