復(fù)方曲安奈德乳膏的處方篩選及穩(wěn)定性考察

蘇 華，潘，夏曙輝，王有潔，倪 陽，王曙東

(中國人民解放軍南京軍區(qū)南京總醫(yī)院制劑科，江蘇 南京 210002)

醋酸曲安奈德是一種中強效氟化糖皮質(zhì)激素，具有抗炎、抗過敏和降低血管通透性的作用[1]，對風(fēng)濕性或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肌腱炎、肩周炎、肌肉損傷等多種炎癥均具有很好的療效[2-3]，在眼科局部應(yīng)用還能治療和控制黃斑水腫、糖尿病視網(wǎng)膜病變、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞等[4]。復(fù)方醋酸曲安奈德乳膏以醋酸曲安奈德、樟腦為主藥，方中醋酸曲安奈德局部應(yīng)用抑制炎癥浸潤和滲出，樟腦清涼止癢、止痛、改善局部血液循環(huán)、促進肉芽新生，二者合用具有獨特療效[5]。為了更好保證該制劑的臨床療效，筆者對其進行了穩(wěn)定性考察及處方篩選，報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀，包括四元泵、VWD紫外檢測器、Chemstation色譜工作站;KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);Mettler AE240型十萬分之一電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);pHS-2C型精密酸度計(上海雷磁);LRHS系列恒溫恒濕培養(yǎng)箱(上海博泰實驗設(shè)備有限公司)。醋酸曲安奈德(天津天藥藥業(yè)股份有限公司，批號為070701);樟腦(蘇州合成化工有限公司，批號為090510);單硬脂酸甘油酯(廣州美晨藥業(yè)有限公司，批號為080708);液體石蠟(南昌白云藥業(yè)有限公司，批號為090905);氮酮(山西芮城興慶化工廠，批號為200902160);三乙醇胺(固安希星藥業(yè)有限公司，批號為081201);尼泊金乙酯(臺山市新寧制藥有限公司，批號為070703);十八醇(批號為090201)，硬脂酸(批號為080605)、甘油(批號為090625)、十二烷基硫酸鈉(批號為071102)均由湖南爾康制藥有限公司生產(chǎn)。以上試劑均為藥用級。純化水為自制，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

取處方量的十八醇、單硬脂酸甘油酯、液體石蠟、氮酮、尼泊金乙酯混合，置水浴上加熱，80℃保溫，作為油相。另取甘油、十二烷基硫酸鈉、純化水混合，置水浴加熱，80℃保溫，作為水相。攪拌下將水相加入油相，乳化成初乳，加入醋酸曲安奈德、樟腦攪拌至冷凝，即得。

2.2 一般質(zhì)量控制

性狀:本品為白色乳膏。

鑒別:取本品約8 g，加無水乙醇60 mL，超聲提取，冰浴冷卻，濾過，濾液濃縮至0.5 mL，加堿性酒石酸銅試液2 mL，混勻，置水浴上加熱約10 min，油層水層界面及油層管壁有磚紅色的顆粒產(chǎn)生(醋酸曲安奈德)。取本品約2 g，加無水乙醇30 mL，超聲提取，冰浴冷卻，濾過，濾液濃縮至0.5 mL，加硫酸5滴及適量香草醛，溶液呈紫紅色(樟腦)。

檢查:應(yīng)符合2005年版《中國藥典(二部)》附錄ⅠF乳膏劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。

2.3 含量測定

2.3.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱:Hedera-ODS-3柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇 -水 -乙醚(70∶30∶2);流速:1.0 mL/min;進樣量:20 μL;檢測波長:240 nm;柱溫:室溫。在此條件下，醋酸曲安奈德的保留時間為13.3 min。色譜圖見圖1。

2.3.2 溶液制備

精密稱取105℃干燥至恒重的醋酸曲安奈德對照品10 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。精密稱取樣品5 g，加甲醇約40 mL，攪勻，超聲攪拌 30 min，80℃水浴提取2 min，取出，用甲醇洗至50 mL量瓶中，定容，過濾，棄去初濾液，續(xù)濾液作為供試品溶液。取不含曲安奈德的陰性樣品，同法制得陰性對照品溶液。

2.3.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:精密量取對照品溶液 0.5，1.0，2.0，5.0，8.0 mL，置 10 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按擬訂的色譜條件分別進樣，記錄色譜圖，以峰面積(Y)對質(zhì)量濃度(C)作線性回歸，得回歸方程 Y=43 361.98 C+26.03，r=0.999 9(n=5)。結(jié)果表明，醋酸曲安奈德質(zhì)量濃度在0.01～0.16 g/L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

圖1 高效液相色譜圖

回收率試驗:分別精密量取對照品溶液10.0，12.5，15.0 mL，各加入空白基質(zhì)5 g，再加甲醇至40 mL，按供試品溶液制備方法制備溶液(0.04，0.05，0.06 g/L)，按擬訂的色譜條件進樣。結(jié)果高、中、低質(zhì)量濃度的平均回收率分別為101.75%，99.10%，98.83%，RSD分別為1.52%，0.96%，1.61%(n=3)。

精密度試驗:取對照品溶液(0.05 g/L)，依法進樣測定。結(jié)果平均含量為100.38%，RSD為0.13%(n=5)。

重復(fù)性試驗:取同一批樣品，依法測定。結(jié)果的 RSD為2.85%(n=3)。

2.3.4 樣品含量測定

取樣品，依法制備供試品溶液，按擬訂的色譜條件進樣、檢測。

2.4 醋酸曲安奈德溶液穩(wěn)定性初步考察

配制醋酸鈉緩沖液，pH分別為3.0，5.0，7.1，8.5。精密稱取醋酸曲安奈德0.1 g，置100 mL棕色量瓶中，分別加入不同pH的醋酸鈉緩沖液，溶液，搖勻，定量。將不同pH的醋酸曲安奈德溶液分為2份，密封，分別置25℃和4℃下保存，定時取出進行含量測定，結(jié)果見圖2。結(jié)果顯示，室溫25℃下，醋酸曲安奈德溶液pH為3.0和5.0時，3月內(nèi)含量基本不變;pH為7.1時，含量緩慢下降，3個月后降為92%;pH為8.5時，1 d后含量即有明顯下降，1周后迅速降至51%，1月后基近于0;4℃下，醋酸曲安奈德溶液pH為3.0，5.0，7.1時，隨著時間的延長3月內(nèi)含量基本不變，pH為8.5時含量有明顯下降，3月后降至45%，但下降幅度明顯小于25℃條件下。

圖2 不同溫度下醋酸曲安奈德溶液的穩(wěn)定性考察

2.5 復(fù)方曲安奈德乳膏處方篩選

采用單因素試驗考察處方中乳化劑、輔助乳化劑及油相有關(guān)物質(zhì)的使用量，通過對乳膏外觀、色澤、黏稠度及穩(wěn)定性的觀察進行復(fù)方曲安奈德乳膏處方篩選。結(jié)果見表1及圖3?？梢?，處方1的pH為8，乳膏性狀較好，但穩(wěn)定性差，6月后醋酸曲安奈德含量由101.08%降至44.10%。處方2-6的pH均為5左右。處方2中新生有機銨皂和十二烷基硫酸鈉為乳化劑，乳膏性狀較好，但穩(wěn)定性較差，6月后含量自100.54%降至81.85%;處方3乳膏較稠，色澤略暗，穩(wěn)定性好，6月后含量由100.09%微升至103.76%;處方4乳膏較稀，穩(wěn)定性較差，6月后含量由101.08%降至86.68%;處方5、處方6乳膏性狀較好，6月后含量分別由103.28%和104.26%降至91.50%和95.68%，在6個月的效期內(nèi)，可滿足質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。

圖3 不同處方樣品穩(wěn)定性初步考察結(jié)果

3 討論

以醋酸曲安奈德為主藥的乳膏研究較多[6-7]，但系統(tǒng)的穩(wěn)定性研究較少，結(jié)論基本多為穩(wěn)定[8-9]。本研究發(fā)現(xiàn)，醋酸曲安奈德溶液受pH影響大，室溫下，醋酸曲安奈德降解速度隨pH的增大而加快，pH為3和5時較穩(wěn)定，當(dāng)pH升至8時降解迅速，1月內(nèi)含量則基本降為0;同時，醋酸曲安奈德溶液的穩(wěn)定性還受溫度影響，低溫貯存條件有利于減緩醋酸曲安奈德的降解。Allen等[10]研究發(fā)現(xiàn)，腎上腺皮質(zhì)類固醇有2條降解路徑，C-17鏈?zhǔn)芄舳伤嵝晕?，A環(huán)受攻擊解環(huán)而生成中性物質(zhì)。除pH、溫度外，醋酸曲安奈德的降解還受不同溶劑以及離子強度的影響，相同pH條件下，乙醇溶劑優(yōu)于聚乙二醇，若沒有pH和離子強度的影響，甘油溶劑則更優(yōu)，色譜中基本無降解峰[11]。

本研究發(fā)現(xiàn)，處方1的配方并不合理，三乙醇胺作為有機堿獨立存在時只有調(diào)節(jié)乳膏pH至8的作用，曲安奈德在堿性條件下降解加速的性質(zhì)必然導(dǎo)致乳膏的高度不穩(wěn)定性，6月后含量即降為44.10%。處方2中，加入了硬脂酸，形成的新生有機銨皂作為乳化劑之一，使膏體更加細膩、光亮、美觀，但可能因為三乙醇胺的活潑氨基對曲安奈德仍有影響，穩(wěn)定性仍然不高，6月后含量降為81.85%;處方3中，十八醇、單硬脂酸甘油酯都有輔助乳化及穩(wěn)定作用，能增加油相的吸水能力，所得乳膏偏黏稠，6月內(nèi)的穩(wěn)定性很好，但顏色較其他處方暗淡而不夠美觀，且過于黏稠而不便于使用;處方4中，將硬脂酸代替單硬脂酸甘油酯，同時減少十八醇用量，所得膏體顏色白，但黏稠度偏低，穩(wěn)定性較處方3下降，6月后含量約降至86.68%;處方5調(diào)整了硬脂酸和十八醇用量，黏稠度適中，顏色白且膏體光亮，穩(wěn)定性較好，但成本在前5個處方中最高;處方6中用單硬脂酸甘油酯代替部分十八醇，制得相同的稠度及色澤乳膏，6月內(nèi)穩(wěn)定性亦較好，成本在各處方中較低，在6個月的效期內(nèi)滿足質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，更適合醫(yī)院制劑生產(chǎn)。

表1 復(fù)方曲安奈德乳膏各處方組成及穩(wěn)定性考察結(jié)果

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