白花蛇舌草配方顆粒薄層色譜鑒別方法研究

陳培勝 廖彩震 成守玲 郭洋 曹勇

白花蛇舌草配方顆粒是茜草科植物白花蛇舌草(OldenlandiadiffusaWilld)的干燥全草制成的配方顆粒[1]，具有清熱解毒、活血消腫、利濕退黃的作用；用于肺熱咳嗽、肺癰、咽喉腫痛、腸癰、癰腫瘡瘍、毒蛇咬傷、熱淋澀痛、水腫、痢疾腸炎、濕熱黃疸、癌腫[2]。中藥配方顆粒是傳統(tǒng)中藥湯劑的劑型改革，配方顆粒在不具備中藥飲片外形后的鑒別方法研究尤為重要。為此安徽省中藥配方顆粒工程技術(shù)研究中心根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的《中藥配方顆粒管理暫行規(guī)定》要求，以白花蛇舌草中有效成分齊墩果酸為對照品，進行白花蛇舌草配方顆粒的薄層鑒別方法實驗研究。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

硅膠G薄層自制板(10 cm×10 cm)，硅膠由青島海洋化工有限公司提供；薄層攝像儀：瑞士CAMAG DigiStore 2；試驗所用試劑均為分析純。

1.2 試驗藥品

齊墩果酸對照品，購自中國藥品生物制品檢定所，批號：110709-200505；白花蛇舌草對照藥材購自安徽亳州中藥材交易市場，產(chǎn)地江西，經(jīng)安徽中醫(yī)學(xué)院生藥教研室楊俊教授鑒定為白花蛇舌草(OldenlandiadiffusaWilld)；白花蛇舌草配方顆粒由安徽省中藥配方顆粒工程技術(shù)研究中心提供。

1.3 供試品溶液的制備

取本品粉末1 g，加乙酸乙酯20 ml，回流提取30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加乙酸乙酯1 ml使溶解，即得。

1.4 對照藥材溶液的制備

取白花蛇舌草對照藥材5 g，加水100 ml，煮沸30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯20 ml，同供試品溶液制備法制成對照藥材溶液[3]。

1.5 對照品溶液的制備

取齊墩果酸對照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，即得。

1.6 顯色條件的改進

本實驗試用了甲苯-丙酮-冰醋酸(10∶1∶0.9)[4]，展開，噴10%硫硫酸乙醇溶液，置紫外光燈(254 nm)下檢視，結(jié)果Rf值太?。缓笳{(diào)整冰醋酸比例如下：甲苯—丙酮—冰醋酸(10∶2∶0.2)，結(jié)果見圖1，在Rf值為0.9處有兩斑點分離不清晰，分析總結(jié)認(rèn)為該展開系統(tǒng)不適合用于對白花蛇舌草配方顆粒的薄層鑒別；另外試用以下系統(tǒng)展開：三氯甲烷—丙酮(7∶1)，三氯甲烷—乙酸乙酯(5∶3)，結(jié)果均不理想；又以甲苯—丙酮(0.5∶1)為展開劑，另槽用少量冰醋酸熏，展開后Rf值適中，斑點清晰。所以最終確定以甲苯—丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)為白花蛇舌草配方顆粒薄層鑒別的展開劑。

2 結(jié)果

照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液各15 μl、對照品溶液4 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯—丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，對照品色譜未見熒光斑點；再噴以10%硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，置日光下檢視：供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。實驗結(jié)果見下圖2、圖3。(彩圖見彩插3)

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3 討論與結(jié)論

本實驗在試用了甲苯—丙酮—冰醋酸(10∶2∶0.2)，甲苯—丙酮—冰醋酸(10∶2∶0.9)，三氯甲烷—丙酮(7∶1)與三氯甲烷—乙酸乙酯(5∶3)等多種溶劑系統(tǒng)展開結(jié)果均不理想的基礎(chǔ)上，再試用甲苯—丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)為展開劑展開，結(jié)果供試品與對照藥材、對照品斑點對應(yīng)良好，Rf值適中。所以最終確定以甲苯-丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)為白花蛇舌草配方顆粒薄層鑒別的展開劑。采用該方法重復(fù)試驗表明，該薄層鑒別方法重現(xiàn)性好，專屬性強，可以作為白花蛇舌草配方顆粒的薄層鑒別方法，用于白花蛇舌草配方顆粒的質(zhì)量控制。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄21.

[2]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(下冊)[M] .上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2006：1039.

[3]謝培山.中藥配方顆粒薄層色譜彩色圖集[M]．江蘇：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2004：49.

[4]鄭虎占，董澤宏，佘靖．中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用[M]．北京：學(xué)苑出版社，1997：1533.