王日升 張 曼 方鋒學(xué) 劉文君 楊麗濤 李楊瑞
(1廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所,廣西 南寧 530007;2廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院,廣西 南寧 530005;3廣西作物遺傳改良生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,廣西 南寧 530007)
苦瓜(Momordica charantia L.)為葫蘆科苦瓜屬一年生雌雄同株的草本植物。不同品種苦瓜在性別表現(xiàn)方面的共性:雄花一般先于雌花發(fā)生,并在較低節(jié)位形成,雄花數(shù)也顯著多于雌花數(shù)(汪俏梅 等,1995);苦瓜性別分化首先要經(jīng)過兩性期,然后再分別向雌或雄的方向發(fā)育(汪俏梅和曾廣文,1997c),性別分化既受品種本身遺傳基因控制,又與自然環(huán)境條件(溫度和光照等)和化學(xué)調(diào)控有關(guān)。應(yīng)用硝酸銀誘導(dǎo)黃瓜(Beyer,1976)、節(jié)瓜(陳清華 等,1999)、西葫蘆(戚藝軍 等,2004)、瓠瓜(李曙軒,1981)和苦瓜(楊? 等,2004)雄性分化的研究均已報(bào)道,但苦瓜雌性系的誘雄方法在實(shí)際應(yīng)用中存在誘雄率低和成本高的問題。為了使全雌系苦瓜分化最大數(shù)量的兩性花,本試驗(yàn)采用不同濃度硝酸銀對不同苗齡全雌系苦瓜進(jìn)行不同噴施次數(shù)的誘雄試驗(yàn),該研究結(jié)果為降低全雌系苦瓜的繁殖成本、提高繁殖率和揭示雌雄同株植物兩性花分化機(jī)理奠定基礎(chǔ)。
X黑-d-d是高度穩(wěn)定的全雌系苦瓜,由廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所提供。
2006年6月9日催芽,6月11日播種,6月23日定植于廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所中試基地塑料大棚,常規(guī)管理。大棚溫度白天30~45 ℃(14~15 h),夜間25~29 ℃(9~10h)。選擇健壯整齊幼苗作為處理對象,用普通手握噴壺向葉面輕輕噴施AgNO3,以葉面布滿霧滴,不滴流為準(zhǔn)。以噴施蒸餾水為對照。設(shè)3個因素試驗(yàn):苗齡、AgNO3濃度和噴施次數(shù);濃度設(shè)150、300、450mg·L-13個水平;苗齡設(shè)一、二、三和四葉期4個水平;噴施次數(shù)為1次和2次,2次間隔5 d。共10個處理,3次重復(fù),完全隨機(jī)設(shè)計(jì),每個處理20株。調(diào)查處理和對照植株25節(jié)位內(nèi)每一節(jié)位花性型,并將誘導(dǎo)獲得的兩性花自交,根據(jù)收獲苦瓜中是否有可萌發(fā)種子判斷其雌雄蕊的育性。
計(jì)算各處理平均單株兩性花數(shù)、兩性花平均開放天數(shù)和平均始/末兩性花節(jié)位。應(yīng)用 SAS(Version8.1)統(tǒng)計(jì)軟件對各處理平均單株兩性花數(shù)進(jìn)行方差分析。
300mg·L-1AgNO3噴施2次不同苗齡全雌系苦瓜 X黑-d-d所獲兩性花的結(jié)果表明(表1),在二至四葉期噴施對兩性花始花節(jié)位無極顯著影響。一葉期噴施的誘雄率最低,平均單株兩性花數(shù)也最少;雖然二、三和四葉期噴施的誘雄率均為100%,但平均單株兩性花數(shù)從7.0朵增加到13.3朵,表明苗齡越大誘導(dǎo)兩性花數(shù)越多;三和四葉期噴施的平均單株兩性花數(shù)均極顯著高于一和二葉期,而三和四葉期噴施的平均單株兩性花數(shù)差異不顯著,表明三葉期是全雌系苦瓜X黑-d-d性別分化的關(guān)鍵時期。
表1 苗齡對全雌系苦瓜兩性花分化的影響
不同濃度AgNO3噴施2次三葉期全雌系苦瓜X黑-d-d所獲兩性花的結(jié)果顯示(表2),AgNO3濃度對兩性花始花節(jié)位有極顯著影響,不同濃度的單株兩性花數(shù)有極顯著差異。隨著AgNO3濃度增大,誘雄率、兩性花末花節(jié)位和平均單株兩性花數(shù)表現(xiàn)出先升后降的趨勢,表明在一定范圍內(nèi),AgNO3濃度越高誘雄效果越好,當(dāng)超過濃度閾值后,誘雄效果下降。300和450mg·L-1AgNO3誘導(dǎo)的平均單株兩性花數(shù)均極顯著高于 150mg·L-1AgNO3處理,而 300和 450mg·L-1AgNO3誘導(dǎo)的單株兩性花數(shù)差異不顯著,表明300mg·L-1AgNO3是苦瓜X黑-d-d誘雄的適宜濃度,這與AgNO3濃度為300mg·L-1時的誘雄率為100%、兩性花始花節(jié)位最低、末花節(jié)位最高、兩性花開放天數(shù)和單株兩性花數(shù)都為最高值的結(jié)果相一致。
表2 AgNO3濃度對全雌系苦瓜兩性花分化的影響
300mg·L-1AgNO3噴施三葉期全雌系苦瓜X黑-d-d不同次數(shù)所獲兩性花的結(jié)果表明(表3),噴施次數(shù)對兩性花始花節(jié)位無極顯著影響,但誘雄率和平均單株兩性花數(shù)隨著噴施次數(shù)增加而增加,而且噴施2次誘導(dǎo)的平均單株兩性花數(shù)與噴施1次達(dá)到極顯著差異,說明噴施次數(shù)越多誘導(dǎo)兩性花數(shù)越多。
試驗(yàn)結(jié)果表明,300mg·L-1AgNO3在三葉期噴施全雌系苦瓜X黑-d-d 2次為最佳誘雄方法。以此方法處理的苦瓜植株低節(jié)位兩性花雄蕊發(fā)育不良,有小花藥1~2個,花粉數(shù)量少甚至無花粉;隨著節(jié)位的升高,3枚花藥發(fā)育良好,花粉量大的雄蕊分布在柱頭周圍。將誘導(dǎo)所獲兩性花自交授粉后苦瓜子房能正常發(fā)育,并獲得有發(fā)芽力的種子,表明誘導(dǎo)的兩性花雌雄蕊育性正常。將發(fā)育良好兩性花花粉授粉對照植株雌花,獲得比同類型苦瓜自交所得種子數(shù)稍少且有發(fā)芽力的種子,多次試驗(yàn)結(jié)果一致,表明該方法可用于全雌系苦瓜X黑-d-d的大量繁殖。
表3 不同噴施次數(shù)對全雌系苦瓜兩性花分化的影響
在一至四葉期使用300mg·L-1AgNO3處理苦瓜植株,一葉期的誘雄率為37 %,二至四葉期為100%,不過平均單株兩性花數(shù)以二葉期最少,三葉期居中,四葉期最多,可能是因?yàn)橐蝗~期植株尚未完全進(jìn)入兩性期,造成誘導(dǎo)率低,而且苗齡越小經(jīng)AgNO3處理后營養(yǎng)生長越不良甚至死亡,從而導(dǎo)致誘雄率低。
對于雌雄同株的瓜類蔬菜而言,在性別還沒有決定時,可以使用植物激素類物質(zhì)控制性別表達(dá),以期改變原定程序的表達(dá)而出現(xiàn)相反程序的表達(dá)(汪俏梅 等,1997a)。徐勛志和吳九根(1996)認(rèn)為三葉期是黃瓜誘雄最好時期,陳清華等(1999)認(rèn)為三葉期是節(jié)瓜誘雄最好時期;汪俏梅和曾廣文(1997b)認(rèn)為四至六葉期、現(xiàn)蕾 5 d之內(nèi)的苦瓜花處于兩性期,所以三葉期的X-黑-d-d苦瓜植株還處于性別決定之前,正是化學(xué)誘雄的適宜時期。
本試驗(yàn)表明,AgNO3誘導(dǎo)的兩性花數(shù)在一定濃度范圍內(nèi)隨著濃度增加呈上升趨勢,這與在苦瓜(楊? 等,2004)和黃瓜(徐勛志和吳九根,1996)雌性系上誘導(dǎo)效果具有相同趨勢。楊?等(2004)研究表明,200mg·L-1AgNO3可誘導(dǎo)全雌系苦瓜OHB61-5單株產(chǎn)生15.13朵兩性花。在本試驗(yàn)中300mg·L-1AgNO3是全雌系苦瓜X黑-d-d誘雄的適宜濃度,至于該濃度是否適用于所有全雌系苦瓜誘雄,尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。
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