免疫介導(dǎo)再生障礙性貧血?jiǎng)游锬Ｐ偷慕?/h1>
2010-05-20 08:04:05陳國(guó)安
實(shí)用臨床醫(yī)學(xué) 2010年10期
盧 瑋,陳國(guó)安
(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液科,南昌 330006)
再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA),是一種獲得性的骨髓造血功能衰竭綜合征。主要表現(xiàn)為骨髓造血功能低下,全血細(xì)胞減少和貧血、出血、感染。其發(fā)病機(jī)制尚不明確。雖然一些AA的病例是繼發(fā)于理化致病因子的接觸,但大部分的病例是特發(fā)性的。隨著研究的深入,AA免疫學(xué)機(jī)制的異常成為了研究的熱點(diǎn)。而大部分的病例對(duì)免疫抑制劑治療有效也提示免疫異常為AA發(fā)生發(fā)展的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。
AA免疫異常主要表現(xiàn)在T淋巴細(xì)胞功能異常[1]和IFN-γ、T NF-α等造血負(fù)調(diào)控因子的分泌異常[2]。根據(jù)人類AA發(fā)生過(guò)程復(fù)制出相似的動(dòng)物模型將對(duì)學(xué)者深入了解AA的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制,指導(dǎo)免疫治療起到很大的幫助。本文將對(duì)免疫介導(dǎo)建立的動(dòng)物模型作一綜述,根據(jù)其誘導(dǎo)方法的不同分為病毒感染和淋巴細(xì)胞輸注。
1 病毒感染介導(dǎo)動(dòng)物模型建立
持續(xù)的病毒感染可以使得機(jī)體免疫系統(tǒng)在清除病毒過(guò)程中發(fā)生異常而導(dǎo)致骨髓的衰竭。早在1955年就有肝炎并發(fā)AA的報(bào)道。隨后陸續(xù)發(fā)現(xiàn)可能與AA發(fā)病有關(guān)的病毒,還有巨細(xì)胞病毒(CMV)、人類微小病毒B19、EB病毒、登革熱病毒及艾滋病病毒(HIV)等[3-7]。
Mayer A.等[4]建立了“巨細(xì)胞病毒相關(guān) AA(CMV-AA)”的動(dòng)物模型,用巨細(xì)胞病毒持續(xù)感染小鼠,出現(xiàn)重要骨髓網(wǎng)狀間質(zhì)細(xì)胞的缺失及功能的損害。同時(shí)檢測(cè)到編碼必需的造血因子粒細(xì)胞集落刺激因子(CSF)和白介素-6的基因表達(dá)下降。人在感染了巨細(xì)胞病毒后也常常伴隨暫時(shí)性的中性粒細(xì)胞和血小板的減少,可能是由于病毒的感染干擾了骨髓間質(zhì)細(xì)胞的功能而導(dǎo)致造血因子的生成減少。人類微小病毒B19也可以特異性地選擇抑制紅系造血,出現(xiàn)暫時(shí)的紅系造血停滯。而體液免疫缺陷患者會(huì)因?yàn)椴《镜某掷m(xù)存在而發(fā)生純紅細(xì)胞AA,慢性溶血性病人則會(huì)因?yàn)榧t系造血受抑制而發(fā)生AA 危象[5]。
病毒引起的AA病例有CD8+T細(xì)胞增加,CD4+T細(xì)胞減少,CD4+/CD8+T細(xì)胞比例失調(diào),導(dǎo)致CD4+T細(xì)胞對(duì)造血的刺激活性下降。用淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒(LCMV)持續(xù)感染小鼠也表現(xiàn)出T細(xì)胞對(duì)造血的抑制活性增加[6]。Binder D.等[7]用淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒(LCMV)持續(xù)感染缺乏穿孔素的小鼠,小鼠表現(xiàn)出了強(qiáng)烈的T細(xì)胞反應(yīng),但是不能清除病毒。通過(guò)14 d的持續(xù)感染后,這些小鼠出現(xiàn)進(jìn)行性的全血細(xì)胞減少,最終因粒細(xì)胞缺乏和血小板減少而死亡。主要效應(yīng)細(xì)胞為CD8+T細(xì)胞。這種LCMV-AA小鼠模型與人血清陰性肝炎病毒感染后AA表現(xiàn)出一些共同的血液學(xué)和免疫學(xué)的特征。同樣是用LCMV感染 2種CBA/Ht和C3HeB/FeJ小鼠,雖然都產(chǎn)生相同的貧血癥狀,但是發(fā)生貧血的機(jī)制確有所不同。提示小鼠的品系可能會(huì)對(duì)同一病毒感染介導(dǎo)的AA產(chǎn)生影響[8]。
2 淋巴細(xì)胞輸注介導(dǎo)動(dòng)物模型建立
類似移植相關(guān)的移植物抗宿主病(GVHD)的免疫機(jī)制,當(dāng)供者血液中的淋巴細(xì)胞滲入到易感受者的體內(nèi)會(huì)引起骨髓增生不良,這使得淋巴細(xì)胞輸注誘導(dǎo)AA具有可行性,現(xiàn)在也是最常用的造模方法。最早利用此方法誘導(dǎo)小鼠AA的是在1967年,Barnes D.W.等[9]給照射6 Gy的CBA/H小鼠1×107個(gè)C3H/He小鼠的淋巴結(jié)細(xì)胞,AA發(fā)生率為63%,發(fā)病時(shí)間在18～70 d。姚 軍等[10]用照射6 Gy的BALB/c小鼠輸DBA/2小鼠的胸腺淋巴結(jié)混合細(xì)胞來(lái)誘導(dǎo)AA,發(fā)生率達(dá)到96.2%,發(fā)病時(shí)間為8～14 d。但由于模型小鼠在短時(shí)間就全部死亡,推測(cè)由于射線劑量過(guò)大,故現(xiàn)常用5.5 Gy的劑量處理小鼠。
將正常親代小鼠的淋巴細(xì)胞輸注到雜交第一代小鼠體內(nèi)也可以誘導(dǎo)AA,經(jīng)過(guò)和未經(jīng)過(guò)非致死劑量照射的子代小鼠會(huì)在2～3個(gè)星期內(nèi)發(fā)生致命性的全血細(xì)胞減少[11-12]。但經(jīng)過(guò)照射所建立的模型更加符合人類AA的發(fā)病特點(diǎn)。對(duì)AA小鼠的骨髓進(jìn)行檢查,發(fā)現(xiàn)AA小鼠的骨髓腔基本上空了。在骨髓衰竭小鼠的殘余骨髓細(xì)胞中含有大量供體小鼠的T細(xì)胞浸潤(rùn)及Fas表達(dá)的上調(diào)。在進(jìn)一步的移植實(shí)驗(yàn)中,這些殘余的骨髓細(xì)胞可以破壞正常小鼠的骨髓造血干細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞,被稱為“旁觀者的破壞效應(yīng)”[12]。AA小鼠血清中IFN-γ的濃度相比對(duì)照組增加了2～3倍,用抗T NF-α抗體則能提高受者小鼠的存活率。A A患者外周血T淋巴細(xì)胞可分泌過(guò)量的IFN-γ,IFN-γ主要是通過(guò)阻止細(xì)胞周期進(jìn)行抑制造血。此外IFN-γ和T NF-α均可上調(diào)CD+34細(xì)胞上的Fas受體,通過(guò)Fas/FasL增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)凋亡的敏感性,誘導(dǎo)造血干(祖)細(xì)胞過(guò)度凋亡[13]。Risitano A.M.等[14]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AA患者有多種異常的TCRVβ亞家族的優(yōu)勢(shì)擴(kuò)增,形成寡克隆T細(xì)胞亞群。而在Chen J.等[11]復(fù)制的模型中表現(xiàn)出了供者的T淋巴細(xì)胞在受者體內(nèi)寡克隆的特點(diǎn),從而可以進(jìn)一步研究這種異常擴(kuò)增的寡克隆T淋巴細(xì)胞是否參與了AA的免疫學(xué)發(fā)病。因?yàn)樵诮邮苡H代淋巴細(xì)胞輸注的子代小鼠沒(méi)有發(fā)生移植物抗宿主現(xiàn)象,Chen J.等[15]將小鼠的淋巴結(jié)細(xì)胞輸入到經(jīng)非致死劑量照射的主要組織相容性抗原(MHC)不相合的小鼠體內(nèi),2～3個(gè)星期后同樣建立AA模型。AA小鼠血清中的CD8+T細(xì)胞異常增多,并在10～12 d內(nèi)達(dá)到頂峰。
近來(lái)研究發(fā)現(xiàn),AA患者末梢血中的T h1細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子T-bet表達(dá)上調(diào)[16]。T ang Y.等[17]分別用T-bet基因敲除小鼠和未敲除小鼠的淋巴細(xì)胞與MHC不合的小鼠的骨髓細(xì)胞混合進(jìn)行培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)T-bet-/-淋巴細(xì)胞的骨髓細(xì)胞毒性缺陷;而接受T-bet-/-淋巴細(xì)胞輸入的受者小鼠骨髓中的CD4+和CD8+細(xì)胞及IFN-γ水平要比T-bet+/+組低且跟對(duì)照組相近。這個(gè)動(dòng)物模型也證實(shí)了T-bet在AA的發(fā)病過(guò)程中扮演著重要角色。除此之外,T-bet與疾病活動(dòng)和免疫抑制治療療效有關(guān)。經(jīng)免疫抑制治療,獲得緩解的AA患者T-bet表達(dá)降低,與正常對(duì)照者相比差異無(wú)顯著性,但疾病復(fù)發(fā)時(shí),T-bet表達(dá)再度升高[18]。
隨著對(duì)AA發(fā)病機(jī)制的研究深入,T-bet表達(dá)增高是由于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞調(diào)節(jié)缺陷所致。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞主要分CD4+CD25+、CD8+CD28-兩類,它們可通過(guò)分泌細(xì)胞因子,或通過(guò)與其他T細(xì)胞或抗原遞呈細(xì)胞的直接接觸發(fā)揮其免疫抑制作用。CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)具有獨(dú)特的免疫調(diào)節(jié)作用,其功能的缺失可導(dǎo)致多種自身免疫性疾病的發(fā)生[19]。Foxp3是CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞發(fā)育和功能維持的關(guān)鍵性調(diào)節(jié)基因,其特異性地表達(dá)于CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞[20]。而在絕大部分的AA患者里,CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是減少的[21]。在MHC相合但是次要抗原不合介導(dǎo)的小鼠AA模型中也證實(shí)恢復(fù)Treg的功能是可以改善骨髓衰竭的情況[22],提示輸入調(diào)節(jié)性T細(xì)胞AA來(lái)說(shuō)可能是一種有效的細(xì)胞療法。
綜上所述,AA存在著復(fù)雜的免疫學(xué)反應(yīng)異常。T細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞毒性及其釋放的抑制性細(xì)胞因子,直接抑制造血或經(jīng)凋亡導(dǎo)致骨髓衰竭。通過(guò)病毒感染和淋巴細(xì)胞輸入等免疫介導(dǎo)的方式可以誘導(dǎo)出AA動(dòng)物模型,此類模型具有復(fù)制成功率高、穩(wěn)定性好的特點(diǎn)。并且還能和人類AA表現(xiàn)出相似的病理生理過(guò)程,使得研究者可以動(dòng)態(tài)觀察病情發(fā)展,更好地了解發(fā)病機(jī)制。AA動(dòng)物模型的建立更是為治療藥物的研發(fā)和新的治療方法的研究提供了平臺(tái)。
[1] Zeng W,Kajigaya S,Chen G,et al.T ranscript profile of CD4+and CD8+T cells from the bone marrow of acquired aplastic anemia patients[J].Exp Hematol,2004,32(9):806-814.
[2] Du bey S,Shu kla P,Nityanand S.Ex pression of interferon-gamma and tum or necrosis factor-alpha in bone marrow T cells and their levels in b on e marrow plasma in patien ts w ith aplastic anem ia[J].Ann Hematol,2005,84(9):572-577.
[3] Sasaki T,Okayama A,Eizuru Y,et al.Progressive retin itis encephalitis due to ganciclovir-resistant cytom egalovirus associated w ith aplastiv anemia[J].Intern Med,1997,36(5):375-379.
[4] Mayer A,Podlech J,Kurz S,et al.Bone marrow failu re by cytom egalovirus is associated w ith an in vivo deficiency in the expression of essen tial stromal hemopoietin gen es[J].J Virol,1997,71(6):4589-4598.
[5] Van E,Niele A M,Kroes A C.Human parvovirus B19:relevance in in ternal medicine[J].Neth J M ed,1999,54(6):221-230.
[6] Broun K E,Tisdale J,Barrett A J,et al.Hepatitis-associated aplastic an emia[J].N Engl J Med,1997,336(15):1059-1064.
[7] Bin der D,van den Broek M F,Kagi D,et al.Aplastic anemia rescued by ex hau stion of cytokine-secreting CD8+T cells in persistent infection w ith lymph ocytic choriomeningitis virus[J].J Exp Med,1998,187(11):1903-1920.
[8] E I Azami E I Idrissi M,Franquin S,Day M J,et al.Distinct host-depen dent pathogenic mechan isms leading to a similar clinical anemia after infection w ith lymph ocytic choriomen ing-i tis virus[J].Exp BiolM ed,2005,230(11):865-871.
[9] Barnes D W,Mole R H.Aplastic anaemia in sub lethally irrad-i ated m ice given allog eneic lym ph node cells[J].Br J Haematol,1967,13(4):482-491.
[10] 姚軍,李樹(shù)濃.淋巴細(xì)胞與再生障礙性貧血關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華血液學(xué)雜志,1991,12(5):229.
[11] C hen J,Lip ovsky K,Ellison F M,et al.Bystand er destruction of h ematopoietic progen itor and stem cells in a mouse model of infu sion-induced b one marrow failu re[J].Blood,2004,104(6):1671-1678.
[12] Bloom M L,Wolk A G,Sim on Stoos K L,et al.A mouse model of lymphocyte in fusion-in duced bone marrow failu re[J].Exp Hematol,2004,32(12):1163-1172.
[13] Kakagianni T,Giannakoulas N C,Thanopoulou E,et al.A probable role for trai-l indu ced apoptosis in the pathogenesis of marrow failure.Implications from an in vitro model and from m arrow of aplastic an emia patients[J].Leuk Res,2006,30(6):713-721.
[14] Risitano A M,M aciejew ski J P,Green S,et al.In-vivo dom-i nant immune responses in aplastic anaemia:m olecu lar tracking of pu tatively path ogenetic T-cell clones b y TCR b eta-CDR3 sequen cing[J].Lancet,2004,364(9431):355-364.
[15] C hen J,Ph D,Young N.A murin e m odel of b on e m arrow failu re mediated by disparity in minor histocompatibility antigen s[J].Blood,2005,106(16):132.
[16] Solomou E E,Keyvanfar K,Youn g N S.T-b et,a Th1 transcription factor,is up-regulated in T cells from patients w ith aplastic anem ia[J].Blood,2006,107(10):3983-3991.
[17] T ang Y,Ch en J,Ph D,et al.Criticalrole of the Th 1 tran scription factor T-Bet in an anim al model of immun e-mediated bone marrow failure[J].Blood,2008,112(11):1037.
[18] Szabo S J,Kim S T,Cos ta G L,et al.A novel tran scription factor,T- bet,directs T h1 lineage commitment[J].Cell,2000,100(6):655-666.
[19] S ak aguchi S,Ono M,Setoguchi R,et al.Foxp3+CD25+CD4+natural regulatory T cells in dominant self-toleran ce and au toim mune disease[J].Imm unol Rev,2006,212(8):8-27.
[20] Morgan M E,van Bilsen J H,Bakker A M,et al.Expression of Foxp3 m RNA is not confined to CD4+CD25+T regulatory cells in hu man s[J].Hum Immun ol,2005,66(1):13-20.
[21] Solom ou E E,Rezvani K,Mielke S,et al.Deficient CD4+CD25+FOXP3+T regulatory cells in acquired aplastic anemia[J].Blood,2007,110(5):1603-1606.
[22] Chen J,Ellison F M,Eckhaus M A,et al.Minor antigen H 60-Mediated aplastic an emia is ameliorated by imm unosuppression and the in fusion of regulatory T Cells[J].J Immunol,2007,1789(4):4159-4168.
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AA免疫異常主要表現(xiàn)在T淋巴細(xì)胞功能異常[1]和IFN-γ、T NF-α等造血負(fù)調(diào)控因子的分泌異常[2]。根據(jù)人類AA發(fā)生過(guò)程復(fù)制出相似的動(dòng)物模型將對(duì)學(xué)者深入了解AA的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制,指導(dǎo)免疫治療起到很大的幫助。本文將對(duì)免疫介導(dǎo)建立的動(dòng)物模型作一綜述,根據(jù)其誘導(dǎo)方法的不同分為病毒感染和淋巴細(xì)胞輸注。
1 病毒感染介導(dǎo)動(dòng)物模型建立
持續(xù)的病毒感染可以使得機(jī)體免疫系統(tǒng)在清除病毒過(guò)程中發(fā)生異常而導(dǎo)致骨髓的衰竭。早在1955年就有肝炎并發(fā)AA的報(bào)道。隨后陸續(xù)發(fā)現(xiàn)可能與AA發(fā)病有關(guān)的病毒,還有巨細(xì)胞病毒(CMV)、人類微小病毒B19、EB病毒、登革熱病毒及艾滋病病毒(HIV)等[3-7]。
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2 淋巴細(xì)胞輸注介導(dǎo)動(dòng)物模型建立
類似移植相關(guān)的移植物抗宿主病(GVHD)的免疫機(jī)制,當(dāng)供者血液中的淋巴細(xì)胞滲入到易感受者的體內(nèi)會(huì)引起骨髓增生不良,這使得淋巴細(xì)胞輸注誘導(dǎo)AA具有可行性,現(xiàn)在也是最常用的造模方法。最早利用此方法誘導(dǎo)小鼠AA的是在1967年,Barnes D.W.等[9]給照射6 Gy的CBA/H小鼠1×107個(gè)C3H/He小鼠的淋巴結(jié)細(xì)胞,AA發(fā)生率為63%,發(fā)病時(shí)間在18～70 d。姚 軍等[10]用照射6 Gy的BALB/c小鼠輸DBA/2小鼠的胸腺淋巴結(jié)混合細(xì)胞來(lái)誘導(dǎo)AA,發(fā)生率達(dá)到96.2%,發(fā)病時(shí)間為8～14 d。但由于模型小鼠在短時(shí)間就全部死亡,推測(cè)由于射線劑量過(guò)大,故現(xiàn)常用5.5 Gy的劑量處理小鼠。
將正常親代小鼠的淋巴細(xì)胞輸注到雜交第一代小鼠體內(nèi)也可以誘導(dǎo)AA,經(jīng)過(guò)和未經(jīng)過(guò)非致死劑量照射的子代小鼠會(huì)在2～3個(gè)星期內(nèi)發(fā)生致命性的全血細(xì)胞減少[11-12]。但經(jīng)過(guò)照射所建立的模型更加符合人類AA的發(fā)病特點(diǎn)。對(duì)AA小鼠的骨髓進(jìn)行檢查,發(fā)現(xiàn)AA小鼠的骨髓腔基本上空了。在骨髓衰竭小鼠的殘余骨髓細(xì)胞中含有大量供體小鼠的T細(xì)胞浸潤(rùn)及Fas表達(dá)的上調(diào)。在進(jìn)一步的移植實(shí)驗(yàn)中,這些殘余的骨髓細(xì)胞可以破壞正常小鼠的骨髓造血干細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞,被稱為“旁觀者的破壞效應(yīng)”[12]。AA小鼠血清中IFN-γ的濃度相比對(duì)照組增加了2～3倍,用抗T NF-α抗體則能提高受者小鼠的存活率。A A患者外周血T淋巴細(xì)胞可分泌過(guò)量的IFN-γ,IFN-γ主要是通過(guò)阻止細(xì)胞周期進(jìn)行抑制造血。此外IFN-γ和T NF-α均可上調(diào)CD+34細(xì)胞上的Fas受體,通過(guò)Fas/FasL增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)凋亡的敏感性,誘導(dǎo)造血干(祖)細(xì)胞過(guò)度凋亡[13]。Risitano A.M.等[14]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AA患者有多種異常的TCRVβ亞家族的優(yōu)勢(shì)擴(kuò)增,形成寡克隆T細(xì)胞亞群。而在Chen J.等[11]復(fù)制的模型中表現(xiàn)出了供者的T淋巴細(xì)胞在受者體內(nèi)寡克隆的特點(diǎn),從而可以進(jìn)一步研究這種異常擴(kuò)增的寡克隆T淋巴細(xì)胞是否參與了AA的免疫學(xué)發(fā)病。因?yàn)樵诮邮苡H代淋巴細(xì)胞輸注的子代小鼠沒(méi)有發(fā)生移植物抗宿主現(xiàn)象,Chen J.等[15]將小鼠的淋巴結(jié)細(xì)胞輸入到經(jīng)非致死劑量照射的主要組織相容性抗原(MHC)不相合的小鼠體內(nèi),2～3個(gè)星期后同樣建立AA模型。AA小鼠血清中的CD8+T細(xì)胞異常增多,并在10～12 d內(nèi)達(dá)到頂峰。
近來(lái)研究發(fā)現(xiàn),AA患者末梢血中的T h1細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子T-bet表達(dá)上調(diào)[16]。T ang Y.等[17]分別用T-bet基因敲除小鼠和未敲除小鼠的淋巴細(xì)胞與MHC不合的小鼠的骨髓細(xì)胞混合進(jìn)行培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)T-bet-/-淋巴細(xì)胞的骨髓細(xì)胞毒性缺陷;而接受T-bet-/-淋巴細(xì)胞輸入的受者小鼠骨髓中的CD4+和CD8+細(xì)胞及IFN-γ水平要比T-bet+/+組低且跟對(duì)照組相近。這個(gè)動(dòng)物模型也證實(shí)了T-bet在AA的發(fā)病過(guò)程中扮演著重要角色。除此之外,T-bet與疾病活動(dòng)和免疫抑制治療療效有關(guān)。經(jīng)免疫抑制治療,獲得緩解的AA患者T-bet表達(dá)降低,與正常對(duì)照者相比差異無(wú)顯著性,但疾病復(fù)發(fā)時(shí),T-bet表達(dá)再度升高[18]。
隨著對(duì)AA發(fā)病機(jī)制的研究深入,T-bet表達(dá)增高是由于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞調(diào)節(jié)缺陷所致。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞主要分CD4+CD25+、CD8+CD28-兩類,它們可通過(guò)分泌細(xì)胞因子,或通過(guò)與其他T細(xì)胞或抗原遞呈細(xì)胞的直接接觸發(fā)揮其免疫抑制作用。CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)具有獨(dú)特的免疫調(diào)節(jié)作用,其功能的缺失可導(dǎo)致多種自身免疫性疾病的發(fā)生[19]。Foxp3是CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞發(fā)育和功能維持的關(guān)鍵性調(diào)節(jié)基因,其特異性地表達(dá)于CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞[20]。而在絕大部分的AA患者里,CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是減少的[21]。在MHC相合但是次要抗原不合介導(dǎo)的小鼠AA模型中也證實(shí)恢復(fù)Treg的功能是可以改善骨髓衰竭的情況[22],提示輸入調(diào)節(jié)性T細(xì)胞AA來(lái)說(shuō)可能是一種有效的細(xì)胞療法。
綜上所述,AA存在著復(fù)雜的免疫學(xué)反應(yīng)異常。T細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞毒性及其釋放的抑制性細(xì)胞因子,直接抑制造血或經(jīng)凋亡導(dǎo)致骨髓衰竭。通過(guò)病毒感染和淋巴細(xì)胞輸入等免疫介導(dǎo)的方式可以誘導(dǎo)出AA動(dòng)物模型,此類模型具有復(fù)制成功率高、穩(wěn)定性好的特點(diǎn)。并且還能和人類AA表現(xiàn)出相似的病理生理過(guò)程,使得研究者可以動(dòng)態(tài)觀察病情發(fā)展,更好地了解發(fā)病機(jī)制。AA動(dòng)物模型的建立更是為治療藥物的研發(fā)和新的治療方法的研究提供了平臺(tái)。
[1] Zeng W,Kajigaya S,Chen G,et al.T ranscript profile of CD4+and CD8+T cells from the bone marrow of acquired aplastic anemia patients[J].Exp Hematol,2004,32(9):806-814.
[2] Du bey S,Shu kla P,Nityanand S.Ex pression of interferon-gamma and tum or necrosis factor-alpha in bone marrow T cells and their levels in b on e marrow plasma in patien ts w ith aplastic anem ia[J].Ann Hematol,2005,84(9):572-577.
[3] Sasaki T,Okayama A,Eizuru Y,et al.Progressive retin itis encephalitis due to ganciclovir-resistant cytom egalovirus associated w ith aplastiv anemia[J].Intern Med,1997,36(5):375-379.
[4] Mayer A,Podlech J,Kurz S,et al.Bone marrow failu re by cytom egalovirus is associated w ith an in vivo deficiency in the expression of essen tial stromal hemopoietin gen es[J].J Virol,1997,71(6):4589-4598.
[5] Van E,Niele A M,Kroes A C.Human parvovirus B19:relevance in in ternal medicine[J].Neth J M ed,1999,54(6):221-230.
[6] Broun K E,Tisdale J,Barrett A J,et al.Hepatitis-associated aplastic an emia[J].N Engl J Med,1997,336(15):1059-1064.
[7] Bin der D,van den Broek M F,Kagi D,et al.Aplastic anemia rescued by ex hau stion of cytokine-secreting CD8+T cells in persistent infection w ith lymph ocytic choriomeningitis virus[J].J Exp Med,1998,187(11):1903-1920.
[8] E I Azami E I Idrissi M,Franquin S,Day M J,et al.Distinct host-depen dent pathogenic mechan isms leading to a similar clinical anemia after infection w ith lymph ocytic choriomen ing-i tis virus[J].Exp BiolM ed,2005,230(11):865-871.
[9] Barnes D W,Mole R H.Aplastic anaemia in sub lethally irrad-i ated m ice given allog eneic lym ph node cells[J].Br J Haematol,1967,13(4):482-491.
[10] 姚軍,李樹(shù)濃.淋巴細(xì)胞與再生障礙性貧血關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華血液學(xué)雜志,1991,12(5):229.
[11] C hen J,Lip ovsky K,Ellison F M,et al.Bystand er destruction of h ematopoietic progen itor and stem cells in a mouse model of infu sion-induced b one marrow failu re[J].Blood,2004,104(6):1671-1678.
[12] Bloom M L,Wolk A G,Sim on Stoos K L,et al.A mouse model of lymphocyte in fusion-in duced bone marrow failu re[J].Exp Hematol,2004,32(12):1163-1172.
[13] Kakagianni T,Giannakoulas N C,Thanopoulou E,et al.A probable role for trai-l indu ced apoptosis in the pathogenesis of marrow failure.Implications from an in vitro model and from m arrow of aplastic an emia patients[J].Leuk Res,2006,30(6):713-721.
[14] Risitano A M,M aciejew ski J P,Green S,et al.In-vivo dom-i nant immune responses in aplastic anaemia:m olecu lar tracking of pu tatively path ogenetic T-cell clones b y TCR b eta-CDR3 sequen cing[J].Lancet,2004,364(9431):355-364.
[15] C hen J,Ph D,Young N.A murin e m odel of b on e m arrow failu re mediated by disparity in minor histocompatibility antigen s[J].Blood,2005,106(16):132.
[16] Solomou E E,Keyvanfar K,Youn g N S.T-b et,a Th1 transcription factor,is up-regulated in T cells from patients w ith aplastic anem ia[J].Blood,2006,107(10):3983-3991.
[17] T ang Y,Ch en J,Ph D,et al.Criticalrole of the Th 1 tran scription factor T-Bet in an anim al model of immun e-mediated bone marrow failure[J].Blood,2008,112(11):1037.
[18] Szabo S J,Kim S T,Cos ta G L,et al.A novel tran scription factor,T- bet,directs T h1 lineage commitment[J].Cell,2000,100(6):655-666.
[19] S ak aguchi S,Ono M,Setoguchi R,et al.Foxp3+CD25+CD4+natural regulatory T cells in dominant self-toleran ce and au toim mune disease[J].Imm unol Rev,2006,212(8):8-27.
[20] Morgan M E,van Bilsen J H,Bakker A M,et al.Expression of Foxp3 m RNA is not confined to CD4+CD25+T regulatory cells in hu man s[J].Hum Immun ol,2005,66(1):13-20.
[21] Solom ou E E,Rezvani K,Mielke S,et al.Deficient CD4+CD25+FOXP3+T regulatory cells in acquired aplastic anemia[J].Blood,2007,110(5):1603-1606.
[22] Chen J,Ellison F M,Eckhaus M A,et al.Minor antigen H 60-Mediated aplastic an emia is ameliorated by imm unosuppression and the in fusion of regulatory T Cells[J].J Immunol,2007,1789(4):4159-4168.
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