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    不同豬瘟免疫程序?qū)ψ胸i母源抗體水平的影響

    2010-05-18 08:40:48吳家強(qiáng)張學(xué)武徐紹建王金寶
    中國動(dòng)物檢疫 2010年11期
    關(guān)鍵詞:母源豬瘟日齡

    吳家強(qiáng) ,張學(xué)武 ,李 俊 ,徐紹建 ,李 坤 ,于 江 ,劉 洋 ,周 順 ,王金寶

    (1.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,山東 濟(jì)南 250100;2.山東省畜禽疫病防治與繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南 250100;3.諸城市畜牧獸醫(yī)管理局,山東 諸城 271000;4.青島農(nóng)業(yè)大學(xué),山東 青島 266109)

    豬瘟(HC),又稱古典豬瘟(CSF),俗稱“爛腸瘟”,是豬的一種高度接觸傳染性病毒病,在世界上許多養(yǎng)豬的國家都有流行[1]。由于其傳播快、病死率高,給養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,因此,受到世界各國的高度重視。疫苗免疫接種是防治豬瘟積極有效的措施之一。我國研制的豬瘟兔化弱毒細(xì)胞苗具有性能穩(wěn)定、安全性好、免疫原性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),是消滅和控制豬瘟的有力武器[2-4]。另外,近年來我國又研制成功豬瘟脾淋苗(兔源),其優(yōu)點(diǎn)是抗原含量足、產(chǎn)生保護(hù)力快,而且在生產(chǎn)過程中能夠避免牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)污染。仔豬通過胎盤或乳汁(尤其是初乳)從母體獲得的抗體稱為母源抗體。豬瘟母源抗體的存在,一方面能夠保護(hù)新生仔豬避免早期感染,但另一方面卻又在很大程度上干擾仔豬的豬瘟疫苗免疫效果,造成免疫失敗[5-8]。本研究旨在對(duì)應(yīng)用不同豬瘟免疫程序的豬場(chǎng)進(jìn)行仔豬母源抗體水平檢測(cè),為豬場(chǎng)豬瘟免疫程序的制定尤其是仔豬首免日齡的確定提供參考建議。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試驗(yàn)豬場(chǎng)與試驗(yàn)動(dòng)物

    選擇山東4個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng):A場(chǎng)存欄227頭母豬,B場(chǎng)存欄153頭母豬,兩場(chǎng)均使用豬瘟脾淋苗;C場(chǎng)存欄540頭母豬,D場(chǎng)存欄312頭母豬,兩場(chǎng)均使用豬瘟細(xì)胞苗。選取每個(gè)豬場(chǎng)各5頭母豬及其所產(chǎn)的201頭仔豬為試驗(yàn)動(dòng)物,仔豬品種均為杜長(zhǎng)大三元雜交豬。試驗(yàn)日齡為仔豬出生后第5天至第50天,試驗(yàn)期間仔豬不注射豬瘟疫苗,按照免疫程序正常防疫豬氣喘病、副豬嗜血桿菌、偽狂犬病、豬藍(lán)耳病、口蹄疫等商品化疫苗。

    1.1.2 豬瘟疫苗類型與使用方法

    豬瘟脾淋苗由上海某生物制品廠家提供,產(chǎn)品批號(hào)為20090818,20頭份/瓶;豬瘟細(xì)胞苗由山東某生物制品廠家提供,產(chǎn)品批號(hào)為0907026,50頭份/瓶。疫苗于-20℃冷凍保存,母豬免疫使用方法見表1。

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    1.1.3 檢測(cè)試劑與儀器

    豬瘟病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒購自武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司;酶標(biāo)分析儀購自深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司,機(jī)器型號(hào)為RT-6100。

    1.2 方法

    1.2.1 試驗(yàn)仔豬臨床觀察

    每天觀察試驗(yàn)仔豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便等有無異常狀況,從第20日齡起,飲水中定期添加電解多維、葡萄糖和小蘇打,以減輕保定、采血、打針等造成的仔豬應(yīng)激反應(yīng)。

    1.2.2 采血與抗體檢測(cè)

    在仔豬5日齡、10日齡、20日齡、30日齡、40日齡、50日齡時(shí)分別前腔頸靜脈采血3mL,4000 r/min離心3min,分離血清,于-20℃冷凍保存。全程采血結(jié)束后,通過豬瘟抗體ELISA抗體檢測(cè)試劑盒集中進(jìn)行抗體檢測(cè)。

    1.2.3 樣品陽性或陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)

    在酶標(biāo)儀上檢測(cè)各孔OD630值。試驗(yàn)成立的條件是陽性血清對(duì)照孔OD630值大于或等于1.0,陰性血清對(duì)照孔OD630值必須小于0.3。樣品OD630值大于0.35(相當(dāng)于間接血凝試驗(yàn)效價(jià)1:16),判為豬瘟抗體陽性;樣品OD630值小于0.35,判為豬瘟抗體陰性。

    2 試驗(yàn)結(jié)果

    2.1 仔豬生長(zhǎng)發(fā)育的臨床觀察

    A、B、C、D四個(gè)豬場(chǎng)的試驗(yàn)仔豬在哺乳期間共有12頭因?yàn)槿踝?、擠壓或腹瀉致死,保育期間因?yàn)楦篂a、瘦弱等原因淘汰6頭,其它試驗(yàn)仔豬精神狀態(tài)良好,體溫、食欲正常,試驗(yàn)期間未見不良反應(yīng)。

    2.2 母源抗體檢測(cè)結(jié)果

    對(duì)應(yīng)用不同豬瘟免疫程序的四個(gè)豬場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在20日齡以內(nèi)仔豬母源抗體的平均OD630值(0.503~1.587) 和陽性率 (62.2%~95.7%)均維持較高的水平,仔豬能夠獲得較好的母源抗體保護(hù),避免豬瘟病毒的早期感染。隨著日齡增長(zhǎng),仔豬母源抗體逐漸下降,尤其在斷奶后一周(30~40日齡)下降趨勢(shì)最為顯著。但D場(chǎng)的仔豬母源抗體在40日齡以后又出現(xiàn)反彈,抗體陽性率從13.3%升高至37.8%(見表2)。

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    3 結(jié)論與討論

    豬瘟病毒屬黃病毒科、瘟疫病毒屬,基因組為單股線狀的RNA,與牛黏膜病病毒、羊邊界病病毒有共同的抗原。豬瘟病毒可以劃分為三個(gè)基因型(Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型),我國豬瘟病毒的流行毒株屬于基因Ⅱ型,占80%以上,而使用比較廣泛的豬瘟兔化弱毒疫苗毒株屬于基因Ⅰ型,各個(gè)基因型之間存在交叉免疫保護(hù)作用[1]。在我國,隨著豬瘟疫苗的推廣應(yīng)用,特別是國家實(shí)施強(qiáng)制性免疫以來,豬瘟的防控取得了很大成效和進(jìn)步。但也不可否認(rèn),由于不同生物制品廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗質(zhì)量(生產(chǎn)工藝、抗原含量、外源病原污染、質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)等)參差不齊,冷鏈運(yùn)輸和保存環(huán)節(jié)不健全,疫苗免疫程序不合理,豬瘟疫苗免疫失敗的現(xiàn)象仍然時(shí)有發(fā)生,給本病的綜合防治造成很大障礙[9-10]。建議國家相關(guān)部門加大生物制品的檢查力度,改進(jìn)免疫監(jiān)測(cè)方法[11],提高售后服務(wù)質(zhì)量(包括冷鏈運(yùn)輸和配送),杜絕不合格疫苗產(chǎn)品的市場(chǎng)準(zhǔn)入和流通,保障豬瘟等生物制品的免疫效果。

    另外,在本研究中也發(fā)現(xiàn),斷奶行為對(duì)仔豬的應(yīng)激反應(yīng)除了體現(xiàn)在飲食改變、合群打架、環(huán)境適應(yīng)性等方面,還表現(xiàn)在斷奶前后母源抗體的變化非常顯著,這也能夠從一個(gè)側(cè)面解釋為什么仔豬斷奶后疾病多發(fā)的原因。試驗(yàn)中的四個(gè)豬場(chǎng),仔豬均于25~28日齡斷奶,由于離開母豬失去了母源抗體來源,仔豬在30~40日齡母源抗體的下降幅度非常大,已基本接近或低于臨界值。如果此時(shí)不及時(shí)進(jìn)行免疫接種,將出現(xiàn)免疫空白期,對(duì)豬瘟野毒無抵御能力。D場(chǎng)仔豬40~50日齡的豬瘟抗體水平不繼續(xù)降低反而升高,恰恰說明此時(shí)仔豬遭受了豬舍環(huán)境中的豬瘟野毒侵襲,應(yīng)當(dāng)引起養(yǎng)豬生產(chǎn)管理者的重視。

    疫苗的免疫接種,對(duì)防制豬瘟至關(guān)重要,在養(yǎng)豬生產(chǎn)中母豬群有兩種常見的豬瘟免疫程序。(1)普遍防疫(普防):每年普防3次,每4個(gè)月免疫一次,每頭母豬每次接種2頭份豬瘟脾淋苗或3頭份細(xì)胞苗。此法主要在一些大型種豬場(chǎng)應(yīng)用,優(yōu)點(diǎn)是便于在短時(shí)間內(nèi)集中豬場(chǎng)的人力、物力進(jìn)行防疫,提高豬瘟的防疫密度,但個(gè)別母豬懷孕期間注射豬瘟弱毒疫苗出現(xiàn)過敏反應(yīng),有流產(chǎn)現(xiàn)象發(fā)生。(2)跟胎次免疫:在一些種豬場(chǎng)和許多中小規(guī)模豬場(chǎng),通常于母豬產(chǎn)后21天左右接種豬瘟疫苗,由于產(chǎn)后消耗和仔豬吸吮等原因,此時(shí)母豬自身的抗體水平呈下降趨勢(shì),接種疫苗后可獲得較好的免疫效果,而且按此法接種母豬不易漏防。本研究結(jié)果顯示,母豬采用不同免疫程序的豬場(chǎng),其所產(chǎn)仔豬的豬瘟母源抗體持續(xù)時(shí)間不完全等同。母豬免疫狀況一般的豬群(譬如D場(chǎng)),仔豬20日齡時(shí),其豬瘟母源抗體的平均OD630值和陽性率已接近臨界值,此時(shí)應(yīng)及時(shí)進(jìn)行豬瘟疫苗免疫,以免出現(xiàn)豬瘟抗體空白期。母豬免疫較好的豬群(譬如B場(chǎng)),仔豬30日齡時(shí),其豬瘟母源抗體的平均OD630值仍維持在0.68,抗體陽性率達(dá)80%以上,對(duì)豬瘟野毒具有較強(qiáng)的防御能力。如果此時(shí)注射豬瘟疫苗,將受到母源抗體的干擾而導(dǎo)致免疫失敗。因此,建議規(guī)?;i場(chǎng)定期開展母源抗體監(jiān)測(cè)工作,以抗體陽性率接近70%、平均OD630值0.35~0.45(相當(dāng)于間接血凝試驗(yàn)效價(jià)1:16~1:32),作為仔豬的豬瘟首免日齡(見表2),制定科學(xué)合理的個(gè)性化豬瘟免疫程序,以確保豬瘟疫苗免疫質(zhì)量。

    [1]涂長(zhǎng)春.豬瘟國際流行態(tài)勢(shì)、我國現(xiàn)狀及防制對(duì)策 [J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2003,36(8):955-960.

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