乙肝五項(xiàng)定量和定性檢測(cè)結(jié)果分析

劉清銀，馬 麗

乙型肝炎是目前已確認(rèn)的所有病毒性肝炎中對(duì)人類(lèi)健康危害最為嚴(yán)重的一種肝炎，我國(guó)位居首位。過(guò)去人們認(rèn)為無(wú)法治愈的觀點(diǎn)已被取締，通過(guò)乙肝五項(xiàng)定量分析，聯(lián)合基因檢測(cè)可動(dòng)態(tài)觀察藥物治療的效果?，F(xiàn)常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），只能提供定性結(jié)果（陽(yáng)性或陰性），無(wú)法動(dòng)態(tài)觀察病情和療效變化以及注射乙肝疫苗后抗體產(chǎn)生情況，且易出現(xiàn)假陰性，干擾臨床治療?！按翱谄凇睍r(shí)ELISA檢測(cè)往往為陰性結(jié)果，而定量檢測(cè)可表現(xiàn)為陽(yáng)性。定量檢測(cè)乙肝“兩對(duì)半”能提供各指標(biāo)的精確含量，在方法學(xué)上更加靈敏，彌補(bǔ)了定性檢測(cè)的不足，在臨床上有較大的實(shí)用性?，F(xiàn)就筆者所在醫(yī)院乙肝五項(xiàng)定性檢測(cè)與定量檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象 100例均為筆者所在醫(yī)院2008-10～2009-03住院或門(mén)診就診乙型肝炎患者。其中男67例，女33例，年齡11～65歲。

1.2 方法 分別使用促凝管抽取靜脈血5 ml，立即分離血清，置2～8℃保存。定量（CLIA法）試劑由北京科美生物技術(shù)有限公司提供，定性（ELISA法）試劑由廈門(mén)英科新創(chuàng)生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 主要儀器 酶標(biāo)儀 （美國(guó)Bio-Rad公司，550型號(hào)），化學(xué)發(fā)光免疫分析儀 （石家莊康普生科技有限公司，KPS-KM型號(hào)），洗板機(jī)（上?？迫A生物技術(shù)有限公司，ST-36W）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用χ2配對(duì)檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

乙肝五項(xiàng)指標(biāo)中，定量檢測(cè)HBsAg、HBsAb、HBeAg、HbcAb優(yōu)于定性檢測(cè)，但無(wú)顯著性差異（P＞0.05），HbeAb結(jié)果有顯著性差異（P＜0.01）。 見(jiàn)表1。

3 討 論

運(yùn)用CLIA法對(duì)乙肝五項(xiàng)進(jìn)行定量檢測(cè)，是將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記于抗原或抗體上，經(jīng)氧化劑或催化劑激發(fā)后，即可快速穩(wěn)定的發(fā)光，其產(chǎn)生的光量子的強(qiáng)度與所測(cè)抗原抗體的濃度成比例。該方法特異性好，靈敏度高，試劑穩(wěn)定，操作簡(jiǎn)便，無(wú)污染，便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，極大地彌補(bǔ)了酶標(biāo)法定性檢測(cè)的不足，并提高了檢測(cè)的靈敏度。用CLIA在HBsAg濃度為0.5 ng/ml時(shí)即可檢出，而用ELISA檢測(cè)HBsAg達(dá)2 ng/ml時(shí)才出現(xiàn)陽(yáng)性。從表1可以看出，定量的HBsAg陽(yáng)性例數(shù)高于定性的陽(yáng)性例數(shù)。高出的5例中，在2 ng/ml以下時(shí)，定性陰性，而定量表現(xiàn)為陽(yáng)性。因此，定量法在急性乙肝早期能及早檢出HBsAg，確證HBV感染，縮短窗口期；其次可發(fā)現(xiàn)低濃度HBsAg攜帶者，在部分慢性乙型肝炎患者中，由于機(jī)體缺乏對(duì)HBV包膜蛋白的免疫應(yīng)答，HbsAg表達(dá)較低，ELISA檢測(cè)可出現(xiàn)HBsAg和HbsAb均陰性的情況，CLIA技術(shù)則可避免這些情況的發(fā)生。定量分析HBsAg和HbsAb的濃度變化，可預(yù)見(jiàn)急性乙型肝炎是否處于恢復(fù)期，若HBsAg濃度降低，HbsAb濃度逐漸升高，可說(shuō)明病情已向恢復(fù)期發(fā)展，反之，HBsAg濃度處于較高水平或上升趨勢(shì)，而HBsAb一直處于較低水平，則易發(fā)展為慢性乙型肝炎或病毒攜帶者，為正確判斷病情提供依據(jù)。

HBsAb的定量檢測(cè)對(duì)乙型肝炎的預(yù)防起到監(jiān)督作用。HBsAb的定量測(cè)定能夠?qū)贵w是否真正具有“中和”HBV的免疫力作出正確評(píng)價(jià)，對(duì)乙型肝炎的預(yù)防起到監(jiān)督作用。ELISA法HbsAb陽(yáng)性并不一定就有免疫力，研究表明，HbsAb含量在10 mIU/ml以上，患者ELISA定性可呈陽(yáng)性，但并不提示機(jī)體一定具有免疫力，而HbsAb在10～100mIU/ml的定性雖為陽(yáng)性，但此時(shí)對(duì)HBV的免疫力較弱，甚至不能預(yù)防HBV感染，仍有感染HBV的危險(xiǎn)。只有HbsAb含量達(dá)到100 mIU/ml以上時(shí)，才可確定具有抵抗HBV入侵的作用。根據(jù)HBsAb含量，可以判斷機(jī)體對(duì)HBV的免疫狀態(tài)及對(duì)乙肝疫苗的免疫效果。對(duì)乙肝疫苗的免疫力評(píng)價(jià)和高危人群預(yù)防免疫具有重要的意義，特別是在少年兒童預(yù)防乙型肝炎方面。

高濃度的HBeAg可間接提示病毒處于高復(fù)制狀態(tài)，具有較強(qiáng)的傳染性。定量分析在0.05 ng/ml時(shí)即能檢出，從表1中可以看出定量陽(yáng)性高于定性檢測(cè)，能及早發(fā)現(xiàn)患者是否具有傳染性，及時(shí)給予治療，減少交叉感染。定量分析HBeAg和HbeAb濃度變化，可反映病情變化和治療效果，能明確檢測(cè)HBeAg向HbeAb轉(zhuǎn)換的時(shí)期，既表現(xiàn)了HBeAg濃度下降和HBeAb濃度升高的過(guò)程。高濃度HBeAb一方面提示病情好轉(zhuǎn)，而在某些時(shí)候（如肝功能指標(biāo)很差）則可能與肝壞死、肝硬化、肝癌有關(guān)。定性與定量檢測(cè)的HbeAb差別大，由表1中可以看出，定性陽(yáng)性較定量陽(yáng)性的例數(shù)多，這與HbeAb定性檢測(cè)的假陽(yáng)性較高有關(guān)，而定量檢測(cè)避免了這一現(xiàn)象。

表1 乙肝五項(xiàng)指標(biāo)定性與定量檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果（n=100）

HBcAb濃度的高低，可反映病毒感染的狀態(tài)。高濃度的HBcAb提示乙型肝炎急性感染，恢復(fù)期的濃度降低。慢性乙型肝炎呈HBcAb持續(xù)高濃度，而低濃度的HBcAb一般為恢復(fù)期或既往感染。乙肝五項(xiàng)指標(biāo)有利于對(duì)慢性肝炎活動(dòng)或非活動(dòng)性的判斷。非活動(dòng)慢性乙型肝炎各指標(biāo)相對(duì)穩(wěn)定，活動(dòng)性往往呈現(xiàn)進(jìn)行性變化。因此，可以用于慢性乙型肝炎的分類(lèi)，若同時(shí)結(jié)合定量PCR技術(shù)，更能正確判斷預(yù)后及治療。

疾病的發(fā)生、發(fā)展、療效、預(yù)后是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程，定性檢測(cè)無(wú)法為臨床醫(yī)師動(dòng)態(tài)觀察療效和監(jiān)測(cè)病情提供依據(jù)，而定量檢測(cè)克服了這一現(xiàn)象,可準(zhǔn)確測(cè)出各項(xiàng)指標(biāo)的濃度變化。因此，臨床上采用定量測(cè)定乙肝五項(xiàng)指標(biāo)更能準(zhǔn)確地反映乙型肝炎臨床變化，使患者對(duì)自已病情有更清楚的了解，提高治療信心，同時(shí)也為醫(yī)師提供確切數(shù)據(jù)，指導(dǎo)臨床診治有重要意義。

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