轉(zhuǎn)錄因子EGR-3在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及意義

靳江，孫世仁，聶勇戰(zhàn)，劉杰，樊代明

轉(zhuǎn)錄因子EGR-3在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及意義

靳江，孫世仁，聶勇戰(zhàn)，劉杰，樊代明

【摘要】

目的研究早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因（EGR-3）在肝癌組織中的表達(dá)，并探討其在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

方法選取 125 例肝癌及癌旁組織、5 例正常肝組織標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)標(biāo)本中 EGR-3 的表達(dá)分布，并分析其與肝癌臨床病理因素的關(guān)系。另提取 15 例新鮮肝癌及相應(yīng)癌旁組織標(biāo)本和人肝癌 HepG2、HepG2.2.15、SMMC7721、FHCC98 細(xì)胞的總蛋白，采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè) EGR-3 的表達(dá)水平。

結(jié)果①免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)陽性率（30/125，24%）明顯低于癌旁組織（100/125，80%）（χ2= 72.5，P ＜ 0.001）；EGR-3 主要表達(dá)于肝癌組織的細(xì)胞質(zhì)中，而在癌旁組織的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核均有表達(dá)；此外，EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)強(qiáng)弱與患者年齡、性別以及腫瘤大小、腫瘤分化程度等均無明顯相關(guān)性（P ＞ 0.05）；②蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測(cè)結(jié)果也顯示 EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)水平均明顯低于相應(yīng)癌旁組織（P ＜ 0.05）；EGR-3 在4 種肝癌細(xì)胞系中都有表達(dá)，并在 HepG2.2.15 細(xì)胞中表達(dá)水平最高。

結(jié)論EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)明顯低于癌旁組織，推測(cè)其與肝癌的發(fā)生密切相關(guān)，為肝癌的臨床診斷提供了線索。

【關(guān)鍵詞】轉(zhuǎn)錄因子； 早期生長(zhǎng)反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子類； 癌，肝細(xì)胞； 印記法，蛋白質(zhì)

www.cmbp.net.cn 中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù), 2010, 5(3):191-195

肝癌是我國(guó)最常見的惡性腫瘤之一，是我國(guó)位居第二的癌癥“殺手”，但是其發(fā)病機(jī)制至今尚不明確[1]。早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因（EGR）是一類能被多種刺激比如缺氧、感染等快速誘導(dǎo)產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄因子[2-3]，是即刻早期基因轉(zhuǎn)錄因子（immediate early genes-transcription factors，IEG-TF）家族中的一員，該家族共包括 EGR-1、EGR-2、EGR-3、EGR-4 共4 個(gè)家庭成員，其共同特點(diǎn)是都含有一個(gè)高度保守的可以和 DNA 結(jié)合的結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域由三個(gè)Cys2His2 鋅指結(jié)構(gòu)組成，能特定識(shí)別并與其下游調(diào)控基因的啟動(dòng)子區(qū) GCG（G/T）GGGCG 序列結(jié)合，從而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用[4-5]。其中 EGR-1 與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和侵襲有著密切的關(guān)系，但 EGR-3與消化系統(tǒng)腫瘤的相關(guān)研究目前尚未見報(bào)道（根據(jù)PubMed 數(shù)據(jù)庫檢索）?；诖?，本研究應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子 EGR-3在人肝細(xì)胞肝癌組織中的表達(dá)狀況，以探討其在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及臨床診斷意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源 125 例肝癌及癌旁組織、5 例正常肝組織（2006 年 1 月至 2009 年 1 月手術(shù)切除標(biāo)本）和 15 例新鮮肝癌及相應(yīng)癌旁組織標(biāo)本均取自第四軍醫(yī)大學(xué)西京消化病醫(yī)院病理科。125 例患者中，男性 100 例，女性 25 例，年齡 35 ～ 84 歲，中位年齡 50 歲，平均年齡 54 歲。所有病例術(shù)前均未經(jīng)放療及化療，其中 125 例肝癌及癌旁組織、5 例正常肝組織標(biāo)本取材后經(jīng) 4% 甲醛固定、脫水，常規(guī)石蠟包埋，制成 5 μm 厚連續(xù)切片。

1.1.2 細(xì)胞系 人肝癌 HepG2、HepG2.2.15、SMMC7721、FHCC98 細(xì)胞均為第四軍醫(yī)大學(xué)西京消化病醫(yī)院腫瘤生物實(shí)驗(yàn)室保存，均培養(yǎng)在含 10%胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基中。

1.1.3 試劑 兔抗人 EGR-3 多克隆抗體（SC-191）、HRP 標(biāo)記的山羊抗兔 IgG 抗體和兔抗鼠 IgG 抗體均購自美國(guó) Santa Cruz 公司；En Vision 試劑購自丹麥 Dako 公司；小鼠抗 β-肌動(dòng)蛋白（β-actin）單克隆抗體購自美國(guó) Sigma 公司。

1.2 方法

1.2.1 EGR-3 的表達(dá)分布 采用免疫組織化學(xué)En Vision 法檢測(cè)。125 例肝癌及癌旁組織、5 例正常肝組織切片常規(guī)脫蠟脫水；EDTA 緩沖液微波修復(fù) 10 min，3% H2O2處理 15 min，消除內(nèi)源性過氧化物酶；PBS 洗 5 min × 3 次；室溫正常山羊血清封閉 1 h，甩干多余血清；滴加兔抗人 EGR-3多克隆抗體（1∶50），用 PBS 代替一抗作為陰性對(duì)照，4 ℃ 冰箱過夜。第 2 天用 PBST 洗 5 min × 2 次，再用 PBS 洗 5 min × 2 次；滴加 En Vision試劑（原液）室溫孵育 30 min，PBST 洗 5 min × 2 次，再用 PBS 洗 5 min × 2 次；經(jīng) DAB 顯色1 min 后，自來水沖洗 30 min，蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，自來水沖洗，梯度酒精水化，二甲苯透明，中性樹脂封片。

1.2.2 結(jié)果判定 以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中出現(xiàn)清晰的黃色、棕黃色顆粒為 EGR-3 表達(dá)陽性。鏡下觀察染色陽性細(xì)胞數(shù)和染色強(qiáng)度，根據(jù)染色陽性細(xì)胞數(shù)和染色強(qiáng)度評(píng)分之和判定各標(biāo)本的染色結(jié)果。染色陽性細(xì)胞數(shù)評(píng)分：0 分，陽性細(xì)胞比例為 0；1 分，陽性細(xì)胞比例為 1% ～ 25%；2 分，陽性細(xì)胞比例為 26% ～ 50%；3 分，陽性細(xì)胞比例為 51% ～100%。染色強(qiáng)度評(píng)分：0 分，陰性（細(xì)胞無著色）；1 分，弱陽性（著色顆粒呈黃色）；2 分，中等陽性（著色顆粒呈棕色）；3 分，強(qiáng)陽性（著色顆粒呈深褐色）。染色結(jié)果判定：≥ 3 分，強(qiáng)陽性（++）；＜ 3 分，弱陽性（–/+）。

1.2.3 組織總蛋白的提取 15 例新鮮肝癌組織及相應(yīng)癌旁組織分別添加蛋白裂解液（150 mmol/L NaCl、0.1% SDS、1% TritonX-100、5 μg/ml 抑肽酶、20 mmol/L Tris-HCl，pH7.4），該操作在冰上完成。4 ℃ 10 000 × g 離心 10 min，Bradford 法測(cè)定蛋白濃度。分裝后儲(chǔ)于 –70 ℃ 備用。

1.2.4 細(xì)胞總蛋白的提取 分別收獲對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人肝癌 HepG2、HepG2.2.15、SMMC7721、FHCC98細(xì)胞約 5 × 106，以 0.1 mol/L 冷 PBS（pH7.4）離心洗滌并重懸 2 次；加入 100 μl 細(xì)胞裂解液（含1% NP-40、50 mmol/L Tris-HCl、150 mmol/L NaCl、1% SDS、5% 去氧膽氨酸、0.1 mmol/L PMSF 和1 mg/L 抑肽酶）重懸細(xì)胞并反復(fù)吹打 3 ～ 5 min，混勻后于 4 ℃ 冰浴 30 min，4 ℃ 12 000 × g 離心10 min，取上清作為細(xì)胞總蛋白，采用 Bradford 法測(cè)定樣品蛋白濃度。分裝后儲(chǔ)于 –70 ℃ 備用，同時(shí)以牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品。

1.2.5 EGR-3 蛋白表達(dá)檢測(cè) 取蛋白行 10% SDS-PAGE 后，電轉(zhuǎn)移法將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素（NC）膜上，10% 脫脂奶粉室溫封閉 2 h。加入 2% 脫脂奶粉稀釋的兔抗人 EGR-3 多克隆抗體（1∶500），以加入小鼠抗 β-actin 單克隆抗體（1∶5000）作為內(nèi)參照，4 ℃ 孵育過夜。TBST（含10 mmol/L Tris-HCl、150 mmol/L NaCl、0.05% Tween-20，pH8.0）搖洗 3 次 × 15 min。分別加入2% 脫脂奶粉稀釋的 HRP 標(biāo)記的山羊抗兔 IgG抗體（1∶2000）和兔抗鼠 IgG 抗體（1∶3000），室溫孵育 1 ～ 2 h 后，TBST 搖洗 4 次 × 15 min；ECL 顯色。采用 Bandscan 5.0 凝膠圖像分析軟件測(cè)定計(jì)算目的蛋白條帶與對(duì)應(yīng) β-actin 條帶的吸光度積分灰度值之比，確定目的蛋白表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3 次。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用 SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。免疫組化與臨床病理因素之間關(guān)系采用 χ2檢驗(yàn)分析，以 P ＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖 1 肝癌及癌旁組織、正常肝組織標(biāo)本中 EGR-3 表達(dá)的免疫組織化學(xué)檢測(cè) En Vision × 200（A：癌旁組織細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中 EGR-3 呈陽性表達(dá)；B：肝癌組織細(xì)胞質(zhì)中 EGR-3 呈陽性表達(dá)；C：肝癌組織 PBS 陰性對(duì)照；D：正常肝組織細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中 EGR-3 呈強(qiáng)陽性表達(dá)）Figure 1 Immunohistochemistry of the expression of EGR-3 in HCC tissues, adjacent nontumor liver tissues, and normal liver tissues (En Vision × 200). A: Positive expression of EGR-3 in the cytoplasm and nucleus of adjacent nontumor liver tissues; B: Positive expression of EGR-3 in the cytoplasm of HCC tissues; C: Negative control of HCC tissues; D: Strong positive expression of EGR-3 in the cytoplasm and nucleus of normal liver tissues.

表 1 EGR-3在肝癌和癌旁組織中的表達(dá)Table 1 Expression of EGR-3 in HCC tissues and adjacent nontumor liver tissues

2 結(jié)果

2.1 EGR-3 在肝癌及癌旁組織中的表達(dá)分布

125 例肝癌組織中，30 例高表達(dá) EGR-3，約占總例數(shù)的 24%（30/125），其中 EGR-3 主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中，細(xì)胞核中幾乎沒有表達(dá)；95 例EGR-3 呈低表達(dá)或不表達(dá)。125 例癌旁組織中，100例高表達(dá) EGR-3，約占總例數(shù)的 80%（100/125），EGR-3 在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核均有表達(dá)，且大多呈強(qiáng)陽性顆粒樣染色；25 例 EGR-3 呈低表達(dá)或不表達(dá)。由此可見肝癌組織中 EGR-3 的表達(dá)明顯低于其在癌旁組織中的表達(dá)（χ2= 72.5，P ＜ 0.001）（圖 1，表 1）。

在 5 例正常肝組織中，EGR-3 在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均呈強(qiáng)陽性表達(dá)。

2.2 EGR-3 表達(dá)與肝癌臨床病理因素的關(guān)系

將患者按性別、年齡以及腫瘤大小、腫瘤分化程度分組進(jìn)行 EGR-3 表達(dá)陽性率比較，結(jié)果顯示EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)強(qiáng)弱與患者年齡、性別以及腫瘤大小、腫瘤分化程度等均無明顯相關(guān)性（P ＞ 0.05）（表 2）。

2.3 EGR-3 在肝癌及癌旁組織中的表達(dá)水平

應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測(cè) 15 例新鮮肝癌及相應(yīng)癌旁組織，結(jié)果顯示 EGR-3 在 13 例肝癌組織中的表達(dá)均明顯低于相應(yīng)癌旁組織（圖 2、3）（P ＜ 0.05），這與免疫組織化學(xué)的檢測(cè)結(jié)果相一致。

圖 2 4 例肝癌及相應(yīng)癌旁組織中EGR-3表達(dá)的蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)Figure 2 Expression of EGR-3 protein in four cases of HCC tissues and matched adjacent nontumor liver tissues detected by Western blot

圖 3 4 例肝癌及相應(yīng)癌旁組織中 EGR-3 的表達(dá)水平（a與相應(yīng)癌旁組織相比，P ＜ 0.05）Figure 3 Expression level of EGR-3 in four cases of HCC tissues and matched adjacent nontumor liver tissues.aCompared with the matched adjacent nontumor liver tissues, P ＜ 0.05

2.4 EGR-3 蛋白在肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)

應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測(cè)人肝癌 HepG2、HepG2.2.15、SMMC7721、FHCC98 細(xì)胞中 EGR-3蛋白的表達(dá)，結(jié)果顯示其在肝癌細(xì)胞系中都有表達(dá)；并在 HepG2.2.15 細(xì)胞中表達(dá)水平最高，F(xiàn)HCC98

細(xì)胞中表達(dá)水平最低（圖 4）。而 HepG2.2.15細(xì)胞是支持 HBV 復(fù)制的肝癌細(xì)胞系，說明 EGR-3與病毒復(fù)制有關(guān)。

圖 4 人肝癌細(xì)胞系中 EGR-3 表達(dá)的蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)Figure 4 Expression of EGR-3 protein in human liver cancer cell lines detected by Western blot

3 討論

IEG-TF 家族中 EGR-1、EGR-2、EGR-3、EGR-4 分子，除 DNA 結(jié)合區(qū)域以外的側(cè)翼序列并不相同，因此發(fā)揮的生物學(xué)功能也各不相同[3]。自 1991 年報(bào)道 EGR-3 至今，相關(guān)的研究主要集中在神經(jīng)科學(xué)、免疫學(xué)和病毒學(xué)方面[5]。有研究發(fā)現(xiàn) EGR-3 主要表達(dá)于大腦皮層、海馬、基底神經(jīng)節(jié)、視交叉神經(jīng)核以及肌梭中[6-7]。

本研究發(fā)現(xiàn) EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)明顯低于癌旁組織，其在肝癌組織主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中，而在正常組織的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均呈高表達(dá)。但還有研究發(fā)現(xiàn) EGR-3 在膽管細(xì)胞中也呈高表達(dá)，Yoo 和 Lee[8]報(bào)道乙型肝炎病毒 X（HBX）蛋白通過增強(qiáng) EGR-2、EGR-3 的轉(zhuǎn)錄活性進(jìn)而促進(jìn) fasL 在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)，誘導(dǎo) T 細(xì)胞凋亡，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的免疫逃避；同時(shí)證明了在HBV 相關(guān)的肝癌細(xì)胞誘導(dǎo) fasL 的表達(dá)方面，EGR-3 是最有潛力的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子。這也間接的解釋了本實(shí)驗(yàn)肝癌細(xì)胞系的蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)結(jié)果，即EGR-3 在 HepG2.2.15 細(xì)胞中表達(dá)水平最高。但是對(duì)于不含 HBX 的肝癌細(xì)胞，其發(fā)揮的作用及信號(hào)通路可能不同。本實(shí)驗(yàn)中，EGR-3 在 4 種肝癌細(xì)胞系都有表達(dá)，說明 EGR-3 普遍存在于肝癌細(xì)胞中，但以 HepG2.2.15 為最高，因?yàn)槠鋬?nèi)有 HBV復(fù)制及 HBX 的影響。這也與 Yoo和 Lee[8]的研究沒有沖突，他們所用是人肝臟 Chang 細(xì)胞和轉(zhuǎn)染 HBX 基因的人肝臟 ChangX-34 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞中 fasL 的表達(dá)升高，但他們并沒有檢測(cè)EGR-3 在 HepG2 細(xì)胞中的表達(dá)情況；另外他們主要對(duì)體外細(xì)胞系中機(jī)制進(jìn)行了研究，通過熒光素酶報(bào)告基因，證實(shí) pVP16-HBX 同 pGal4-EGR-2、pGal4-EGR-3 分別共轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞，熒光素酶活性顯著升高，說明 HBX 是通過 EGR-2 和EGR-3 發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)主要是在臨床標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)低于癌旁組織，并且其主要集中表達(dá)在肝癌組織的細(xì)胞質(zhì)中，而轉(zhuǎn)錄因子在核內(nèi)才能發(fā)揮作用，這一現(xiàn)象說明核轉(zhuǎn)位與腫瘤的形成可能相關(guān)。EGR-3 作為轉(zhuǎn)錄因子作用廣泛，不可能僅通過一條信號(hào)通路發(fā)揮作用，其可能的作用機(jī)制尚需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)探討。

此外，免疫組化結(jié)果還顯示 EGR-3 的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤的分化程度以及大小等無關(guān)。主要原因是 EGR-3 在肝癌組織中為低表達(dá)，故分析其表達(dá)與腫瘤分化程度不相關(guān)。

最新有文獻(xiàn)報(bào)道 EGR-3 與新生血管生成有密切關(guān)系，VEGF 可以激活 EGR-3，進(jìn)一步促使活化 T 細(xì)胞核因子（NFATc）、血清反應(yīng)因子（SRF）和 cAMP 效應(yīng)元件結(jié)合（CREB）因子分別與EGR-3 上游啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合，促進(jìn)新生血管的生成，而降低 EGR-3 表達(dá)可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和血管形成，表明 EGR-3 是 VEGF 激活內(nèi)皮細(xì)胞信號(hào)通路中的關(guān)鍵因子之一，并在黑色素瘤實(shí)驗(yàn)中得以驗(yàn)證[9-10]。本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象是消化道腫瘤，結(jié)果顯示 EGR-3 在肝癌組織中的表達(dá)低于癌旁組織，蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)和免疫組織化學(xué)染色的結(jié)果基本一致，這也進(jìn)一步肯定了本研究結(jié)果。比較其他腫瘤研究，認(rèn)為 EGR-3 發(fā)揮作用可能具有組織特異性，推測(cè)其在肝臟組織中可能是通過其他信號(hào)通路發(fā)揮功能，或者在腫瘤發(fā)展過程中具有雙重作用，可在不同環(huán)境下發(fā)揮抑癌或者促癌作用。

目前關(guān)于轉(zhuǎn)錄因子 EGR-3 與腫瘤的研究較少，其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制尚不清楚，這也促使我們對(duì)此有必要繼續(xù)深入探索。

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ObjectiveTo discuss the expression of early growth factor-3(EGR-3) in hepatocellular carcinoma(HCC), and investigate its role in the development of HCC.

MethodsImmunohistochemistry method was used to detect the expression and distribution of EGR-3 in 125 cases of HCC tissues and adjacent nontumor liver tissues samples, and 5 cases of normal liver tissues samples. To analyze the relationship between EGR-3 expression and clinicopathological factors in HCC. Western blot was also applied to detect the expression level of EGR-3 in the total protein of 15 cases of fresh HCC tissues and matched adjacent nontumour liver tissues samples, and four human hepatoma cell lines of HepG2, HepG2.2.15, SMMC7721, FHCC98 cells.

Results①The results of Immunohistochemistry showed that the positive expression ratio of EGR-3 in HCC tissues (30/125, 24%) was significantly lower than that in adjacent nontumor liver tissues (100/125, 80%) (χ2= 72.5, P ＜ 0.05); EGR-3 was mainly expressed in the cytoplasm of HCC tissues, and expressed both in the cytoplasm and nucleus of adjacent nontumor liver tissues; In addition, the expression of EGR-3 was not associated with patient’s gender, age, and tumor size and differentiation (P ＞ 0.05); ②The results of Western blot showed that the expression level of EGR-3 in HCC tissues was also significantly lower than that in matched adjacent nontumour liver tissues (P ＜ 0.05); EGR-3 expressed both in four human hepatoma cell lines, and it expressed at a higher level in HepG2.2.15 cell line than others.

ConclusionThe expression of EGR-3 in HCC tissues was significantly lower than that in adjacent nontumor liver tissues, EGR-3 may be closely associated with the development of HCC, and to provide a clue for clinical diagnosis of hepatocellular carcinoma.

【Key words】Transcription factors; Early growth response transcription factors; Carcinoma, hepatocellular; Blotting, western

Author Affiliation:State Key Laboratory of Tumor Biology (JIN Jiang, NIE Yong-zhan, LIU Jie, FAN Dai-ming), Department of Nephrology (SUN Shi-ren), Xijing Hospital of Digestive Diseases, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, China

Corresponding Authors: LIU Jie, Email: jieliu28@hotmail.com; FAN Dai-ming, Email: fandaim@fmmu.edu.cn www.cmbp.net.cn Chin Med Biotechnol, 2010, 5(3):191-195

作者單位：710032 西安，第四軍醫(yī)大學(xué)西京消化病醫(yī)院腫瘤生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（靳江、聶勇戰(zhàn)、劉杰、樊代明），腎臟內(nèi)科（孫世仁）

通訊作者：劉杰，Email：jieliu28@hotmail.com；樊代明，Email：fandaim@fmmu.edu.cn

收稿日期：2010-02-25

DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.03.006

The expression of transcription factor EGR-3 in hepatocellular carcinoma

JIN Jiang, SUN Shi-ren, NIE Yong-zhan, LIU Jie, FAN Dai-ming

【Abstract】