中醫(yī)藥防治腎間質(zhì)纖維化的機(jī)制研究進(jìn)展

于燕燕,郭兆安

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué),山東濟(jì)南250014;2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,山東濟(jì)南250011)

腎間質(zhì)纖維化(renal interstitial fibrosis,RIF)幾乎是各種慢性腎臟疾病進(jìn)展至終末期腎衰竭(ESRD)的共同途徑和主要病理基礎(chǔ)[1]。因此,對(duì)其發(fā)生、發(fā)展機(jī)制及其防治的研究越來(lái)越受到學(xué)者們的重視。RIF是多種細(xì)胞、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子共同參與,相互作用,最終導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成增多,降解減少,過(guò)度沉積的結(jié)果[2]。近年來(lái),有關(guān)單味中藥、有效成分及中藥復(fù)方抗RIF的研究取得了令人矚目的成果?，F(xiàn)代藥理研究表明中醫(yī)藥在防治RIF方面顯示出良好的前景,各種中藥從不同階段、不同靶點(diǎn)干預(yù)RIF?，F(xiàn)將有關(guān)中藥抗RIF的機(jī)制研究作一綜述。

1 單味中藥

1.1 三七 三七為五加科草本植物三七的干燥根,其主要有效成分為三七總皂甙(PNS)。在腎纖維化形成過(guò)程中,間充質(zhì)細(xì)胞活化是其核心環(huán)節(jié)。馮勝剛等[3]研究發(fā)現(xiàn),間充質(zhì)細(xì)胞表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)是其活化及損傷的標(biāo)志,PNS能有效下調(diào)單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)大鼠腎組織α-SMA及其mRNA的表達(dá),抑制EMT,具有抗RIF的作用,可以作為腎纖維化治療的有效藥物。另有研究表明[4]PNS能有效抑制腎小管間質(zhì)炎性細(xì)胞計(jì)數(shù)和小管間質(zhì)損傷。其研究亦表明[5]PNS能有效減輕UUO大鼠腎小管間質(zhì)的損傷,能從基因、蛋白水平抑制轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、P-Smad 2/3 的表達(dá),通過(guò)TGF-β1/p-Smad 2/3信號(hào)通路發(fā)揮抗RIF的作用。韋穎等[6]分別采用MTT法和ELISA法檢測(cè)PNS對(duì)體外培養(yǎng)人腎成纖維細(xì)胞增殖和分泌I型膠原的作用,結(jié)果表明PNS可明顯抑制人腎成纖維細(xì)胞增殖及I型膠原的分泌。在體外人腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)[7],PNS可明顯促進(jìn)細(xì)胞凋亡而導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)量減少,發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化作用。

1.2 冬蟲(chóng)夏草 冬蟲(chóng)夏草是傳統(tǒng)的補(bǔ)腎壯陽(yáng)藥物,常用于慢性腎臟病的治療。報(bào)道顯示[8]冬蟲(chóng)夏草可通過(guò)下調(diào)TGF-β,減輕腎小管間質(zhì)的損傷,防止腎間質(zhì)纖維化。百令膠囊是人工培養(yǎng)的冬蟲(chóng)夏草菌絲,經(jīng)生物工程方法制成的中藥制劑,它與天然蟲(chóng)草的化學(xué)組成與功效基本一致。郭嘯華等[9]在觀察百令及其提取液對(duì)環(huán)孢素A(CsA)對(duì)腎毒性的防治作用的研究中,表明百令能減少腎小管上皮細(xì)胞空泡變性和細(xì)胞壞死,減少間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及間質(zhì)纖維化;同時(shí)也抑制TGF-β在小血管的表達(dá),減少纖維連接蛋白在球囊壁和血管的沉積。李暖等[10]以腺嘌呤灌胃17周造成大鼠RIF,治療組給予百令膠囊,發(fā)現(xiàn)百令膠囊治療可抑制大鼠腎臟TGF-β表達(dá),減輕腎小管間質(zhì)纖維化;實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)百令膠囊也可能通過(guò)下調(diào)α-SMA表達(dá),抑制肌成纖維細(xì)胞增多,使細(xì)胞外基質(zhì)沉積減少,延緩腎小管間質(zhì)纖維化而發(fā)揮其腎臟保護(hù)作用[11]。

1.3 黃芪 陳清江等[12]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),黃芪注射液可抑制AngⅡ促進(jìn)腎成纖維細(xì)胞(KFB)增殖、刺激TGF-β的分泌等作用,且呈劑量依賴性,同時(shí)可通過(guò)抑制成纖維細(xì)胞增殖和TGF-β的分泌,延緩腎間質(zhì)纖維化進(jìn)展。左川等[13]黃芪能有效減輕UUO腎臟纖維化,在核酸和蛋白水平抑制CTGF表達(dá),從而抑制腎臟固有細(xì)胞轉(zhuǎn)分化可能是其主要作用途徑。左川等另一研究[14]以臨床廣泛應(yīng)用于腎臟疾病且實(shí)驗(yàn)證實(shí)能有效緩解UUO所致腎臟損害的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶受體抑制劑氯沙坦作為陽(yáng)性藥對(duì)照,來(lái)研究黃芪對(duì)UUO大鼠RIF的影響,發(fā)現(xiàn)其能抑制腎間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn),改善小管間質(zhì)損傷和小管萎縮,減少腎間質(zhì)膠原沉積,從而發(fā)揮腎組織的保護(hù)作用。另有研究表明[15]上調(diào)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)及其受體C-met表達(dá),抑制腎臟固有細(xì)胞轉(zhuǎn)分化可能是黃芪能有效減輕UUO大鼠腎臟間質(zhì)纖維化的主要作用途徑,但黃芪通過(guò)何種方式誘導(dǎo)和激活HGF/C-met表達(dá)的確切分子機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。

1.4 大黃 劉冠賢等[16]發(fā)現(xiàn)大黃素可明顯抑制人KFB分裂增殖,并通過(guò)促使C-myc蛋白高水平表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,從而達(dá)到減輕狼瘡性腎炎腎間質(zhì)纖維化病變,改善狼瘡性腎炎患者預(yù)后。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[17]大黃素100 μ g/mL能抑制Ang II刺激人腎成纖維細(xì)胞從G向S期轉(zhuǎn)化。

1.5 川芎 川芎的主要有效成分為川芎嗪。嚴(yán)儀昭等[18]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),川芎嗪對(duì)成纖維細(xì)胞I、II型前膠原的mRNA表達(dá)有明顯的抑制作用。而屈燧林等[19]則研究發(fā)現(xiàn)能提高人胎KFB分泌I型膠原酶活性,促進(jìn)人胎成纖維細(xì)胞凋亡,預(yù)防及逆轉(zhuǎn)腎間質(zhì)纖維化。

1.6 雷公藤 雷公藤多甙是雷公藤的主要藥效成分。楊汝春等[20]運(yùn)用經(jīng)典的UUO模型發(fā)現(xiàn)雷公藤多甙治療可顯著改善腎臟病理?yè)p傷,減輕UUO小鼠梗阻腎的間質(zhì)纖維化,降低腎小管間質(zhì)α-SMA的蛋白表達(dá),且雷公藤多甙效果顯著優(yōu)于蒙諾(ACEI)對(duì)照組。

2 中藥復(fù)方

2.1 黃芪當(dāng)歸合劑 黃芪當(dāng)歸合劑可通過(guò)抑制腎小管轉(zhuǎn)分化、下降ECM 的主要成分、下調(diào)TGF61、CTGF表達(dá)等途徑改善腎間質(zhì)纖維化[21];且能降低UUO大鼠α-SMA陽(yáng)性表達(dá)的腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)面積[22]。

2.2 腎衰泄?jié)釡?腎衰泄?jié)釡瓤赡芡ㄟ^(guò)誘導(dǎo)UUO小鼠HGF的表達(dá),抑制TGF-β的表達(dá),減少Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原及FN等ECM的過(guò)度沉積,加強(qiáng)腎臟保護(hù)作用,對(duì)抗RIF;腎衰泄?jié)釡m可顯著提高HGF、MMP-9表達(dá)量,但卻不能使ECM降解至正常,不能從根本上抑制ECM的過(guò)度沉積,逆轉(zhuǎn)腎間質(zhì)的纖維化[23]。

2.3 化瘀解毒湯 喻濟(jì)民等[24]采用UUO誘導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化動(dòng)物模型觀察化瘀解毒湯對(duì)RIF的改善作用,予以化瘀解毒湯進(jìn)行治療。結(jié)果顯示各治療組大鼠腎間質(zhì)TGF-β1mRNA表達(dá)及血漿AngⅡ濃度較模型組顯著降低,提示化瘀解毒湯具有抑制腎素-血管緊張素系統(tǒng)激活、抑制TGF-13分泌、抗腎間質(zhì)纖維化的作用。

2.4 腎衰膠囊 李淑菊等[25]通過(guò)組織形態(tài)學(xué)研究探討腎衰膠囊抗腎間質(zhì)纖維化的機(jī)制,發(fā)現(xiàn)腎衰膠囊治療后腎間質(zhì)纖維組織增生明顯減少,Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白在腎組織中的表達(dá)減弱,血清Ⅲ型前膠原含量下降,說(shuō)明腎衰膠囊可能是通過(guò)降低致纖維化因子的表達(dá),抑制膠原成分Ⅰ、Ⅲ型膠原的增生,降低細(xì)胞外基質(zhì)的合成,從而減輕腎間質(zhì)纖維化的程度,取得抗腎間質(zhì)纖維化的作用。

3 結(jié)語(yǔ)

RIF病理機(jī)制復(fù)雜多變,國(guó)內(nèi)外均無(wú)特效的拮抗藥物和防治手段。目前,對(duì)于中藥干預(yù)腎間質(zhì)纖維化的研究很多,有的已深入到分子生物學(xué)、蛋白表達(dá)水平,各種中藥針對(duì)不同階段,不同靶點(diǎn)而起作用。中藥因其多成分與多環(huán)節(jié)的作用特點(diǎn),往往具有綜合優(yōu)勢(shì)。但同時(shí)也要辨證、客觀地認(rèn)識(shí)到有些中藥可以導(dǎo)致RIF,如馬兜鈴酸導(dǎo)致的腎損害的病理特點(diǎn)就是廣泛的腎間質(zhì)纖維化。這就需要我們解放思想,創(chuàng)新思路,揚(yáng)長(zhǎng)避短,以期推動(dòng)中醫(yī)藥在抗腎纖維化研究中的發(fā)展。

[l]Eddy AA.Molecular basis of renal fibrosis[J].Pediatr Nephr01.2000,15(3-4)：290-301.

[2]Razzaque MS,Taguchi T.Cellular and molecular events leading to renal tubulointerstitial fibrosis[J].Med Electron Mierose,2002,5(2)：68-80.

[3]馮勝剛,李光明,樊均明,等.三七總皂甙抗腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的實(shí)驗(yàn)研究[J].西部醫(yī)學(xué),2008,20(4)：701-703.

[4]馮勝剛,謝席勝,鄧堯,等.三七總皂甙對(duì)TGF-β/Smads信號(hào)通路的作用[J].西部醫(yī)學(xué),2007,19(4)：526-529.

[5]馮勝剛,李光明,謝席勝,等.三七總皂甙對(duì)UUO大鼠腎小管間質(zhì)病理?yè)p害的作用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,34(18)：3449-3452.

[6].韋穎,樊均明,潘麗萍,等.三七總皂甙對(duì)人腎成纖維細(xì)胞的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2002,22(1)：47-49.

[7]葉任高,孔慶瑜.三七總甙誘導(dǎo)間質(zhì)纖維化人成纖維細(xì)胞凋亡及其分子機(jī)理初探[J].中華腎臟病雜志,1998,14(2)：93.

[8]程曉霞,王軍,周大為.人工蟲(chóng)草提取物對(duì)大鼠單側(cè)輸尿管梗阻致腎小管間質(zhì)損傷的保護(hù)作用[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2004,5(8)：440-442.

[9]郭嘯華,劉志紅,黃海東,等.百令膠囊及其提取液對(duì)大鼠環(huán)孢素腎毒性的防治作用[J].腎臟病與透析腎移植雜志,2003,12(3)：223-228.

[10]李暖,陳新德,楊達(dá)勝,等.百令膠囊對(duì)大鼠腎小管間質(zhì)纖維化的防治作用[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2007,8(4)：227-228.

[11]楊達(dá)勝.百令膠囊對(duì)腎小管間質(zhì)纖維化大鼠腎臟α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)的影響及意義[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2008,3(34)：24-26.

[12]陳清江,楊麗.黃芪對(duì)人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1表達(dá)的影響[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào),2005,40(5)：871-873.

[13]左川,謝席勝,鄧堯,等.黃芪對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎組織結(jié)締組織生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J].中藥材,2008,31(8)：1185-1189.

[14]左川,謝席勝,樊均明,等.黃芪對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎小管間質(zhì)病理?yè)p害的作用[J].西部醫(yī)學(xué),2008,20(2)：245-248.

[15]左川,邱紅渝,謝席勝,等.黃芪對(duì) UUO模型大鼠腎臟肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào),2009,40(1)：105.

[16]劉冠賢,葉任高,譚志明,等.大黃素延緩狼瘡性腎炎腎間質(zhì)纖維化作用的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)臨床免疫學(xué),1999,11(3)：24.

[17]張杰,屈燧林,王劍勤.大黃素對(duì)血管緊張素Ⅱ刺激人腎成纖維細(xì)胞增殖、膠原表達(dá)的抑制效應(yīng)研究[J].四川醫(yī)學(xué),2002,23(11)：1114.

[18]嚴(yán)儀昭,陳祥銀,吳康健,等.川芎嗪和764-3對(duì)成纖維細(xì)胞I、II型前膠原的mRNA表達(dá)的影響[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),1996,18(2)：126.

[19]屈燧林,方勤,陳高翔,等.漢防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙對(duì)人成纖維細(xì)胞的影響[J].中華腎臟病雜志,2000,16(3)：186.

[20]楊汝春,王永鈞,周大為,等.雷公藤多苷對(duì)單側(cè)輸尿管結(jié)扎小鼠腎小管間質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2007,25(2)：290-292.

[21]黃海長(zhǎng),閔亞麗,李驚子,等.黃芪當(dāng)歸合劑及依那普利對(duì)結(jié)締組織轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子在腎間質(zhì)纖維化中表達(dá)的比較研究[J].中華腎臟病雜志,2003,19(3)：133.

[22]張麗芬,黃文政,朱小棣,等.腎小球硬化中腎小管間質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化及腎疏寧的干預(yù)作用[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2005,6(1)：13.

[23]晏子友,趙海.腎衰泄?jié)釡珜?duì)腎間質(zhì)纖維化小鼠HGF調(diào)節(jié)的作用[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2007,8(4)：223-225.

[24]喻濟(jì)民,陳法根,曼子友,等.化瘀解毒湯TGF-β1及AngⅡ作用研究[J].河南中醫(yī)藥學(xué)刊,2001.16(3)：26-28.

[25]李淑菊,張佩青,遲繼銘,等.腎衰膠囊抗腎間質(zhì)纖維化的組織形態(tài)學(xué)研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2006,7(6)：350-353.