中藥誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬的研究

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(1.長春中醫(yī)藥大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，吉林 長春 130117；2.吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院 婦科，吉林 長春 130021)

自噬是真核細(xì)胞利用溶酶體降解長壽命蛋白質(zhì)或細(xì)胞器的一種方式。其降解過程主要表現(xiàn)為細(xì)胞漿中形成包裹著長壽命蛋白質(zhì)或細(xì)胞器的空泡結(jié)構(gòu)，這些空泡與溶酶體結(jié)合并對空泡內(nèi)成分降解。研究表明，許多中藥能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生自噬，闡述如下。

1 中藥研究

崔僑等[1]采用單丹磺酰尸胺(MDC)染色法觀察了冬凌草甲素對HeLa細(xì)胞的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)64 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后，HeLa細(xì)胞的自噬比率顯著提高。當(dāng)使用自噬特異性抑制劑3-MA預(yù)處理后，自噬水平下降至接近正常水平。 朱傳升等[2]使用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測了三氧化二砷(As2O3)對肝癌細(xì)胞系HepG-2的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)1.0，2.0，4.0，8.0 μmol/LAs2O3作用24 h后，HepG-2細(xì)胞均出現(xiàn)自噬，自噬百分率隨As2O3濃度增加而遞增。 占貞貞等[3]使用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測了紫杉醇誘導(dǎo)胃癌SGC-7901及BGC-2823細(xì)胞的自噬情況。結(jié)果0.1 μmol/L紫杉醇作用3,12，24 h后的SGC-7901/BGC-823細(xì)胞均發(fā)生自噬。自噬高峰期為紫杉醇作用3～6 h,且BGC-823細(xì)胞對紫杉醇誘導(dǎo)的自噬較為敏感。 付校等[4]應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測了長春瑞濱處理肺腺癌A549細(xì)胞后自噬特異性蛋白LC3的表達(dá)情況。結(jié)果5.5 μmol/L長春瑞濱在24 h內(nèi)能夠誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞出現(xiàn)明顯的自噬性變化,自噬高峰期出現(xiàn)在長春瑞濱作用6～12 h。 勞鳳學(xué)等[5]應(yīng)用電鏡和MDC染色熒光顯微鏡觀察了白藜蘆醇對BurkittB淋巴瘤Raji細(xì)胞的影響。結(jié)果0.23 mmol/L的白藜蘆醇處理Raji細(xì)胞48 h后，電鏡觀察到BurkittB淋巴瘤Raji細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)了大量的自噬小泡;熒光顯微鏡下可見MDC標(biāo)記的陽性細(xì)胞數(shù)量明顯增加，比率為38.6%；而未處理的Raji細(xì)胞只有很少部分呈MDC陽性，比率為4.2%。 張萍等[6]應(yīng)用吖啶橙染色和Western印跡法觀察了環(huán)孢素A(CsA)聯(lián)合三氧化二砷對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87-MG自噬性死亡的影響。結(jié)果2 μmol/LCsA+2 μmol/L ATO聯(lián)合作用72 h組與CsA、ATO單獨(dú)作用組相比，細(xì)胞內(nèi)酸性自噬泡明顯增加。Western印跡法檢測結(jié)果顯示Beclin-1、LC3-Ⅱ的表達(dá)明顯上調(diào)。 高薇等[7]應(yīng)用MDC熒光染色法等觀察了槲皮素(Que)對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的影響。結(jié)果200 μmol/LQue作用1.5 h后MCF-7細(xì)胞漿內(nèi)散布少許點(diǎn)狀熒光顆粒,3 h后點(diǎn)狀熒光顆粒稍增多，24 h處理組點(diǎn)狀熒光顆粒減少。

2 結(jié)語

研究表明，自噬功能異常在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中均扮演著重要角色。因此深入研究中藥誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生自噬將為惡性腫瘤的治療提供新的途徑。

[1]崔僑,田代真一,小野寺敏,等.冬凌草甲素通過誘導(dǎo)人宮頸癌HeLa細(xì)胞自噬下調(diào)凋亡的機(jī)制[J].藥學(xué)學(xué)報,2007,42(1):35-39.

[2]朱傳升,侯明,王金慎,等.三氧化二砷誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞系HepG-2自噬及其機(jī)制研究[J].中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展,2007,10(4):302-305.

[3]占貞貞,陳思,葉艷,等.自噬及自噬性細(xì)胞死亡抑制紫杉醇誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞凋亡[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2007,42(2):123-127.

[4]付校,潘永成,王建軍,等.自噬在長春瑞濱誘導(dǎo)的肺癌細(xì)胞A549死亡中的作用[J].中國肺癌雜志,2008,11(3):345.

[5]勞鳳學(xué),商迎輝,劉端祺.白藜蘆醇誘導(dǎo)Raji細(xì)胞死亡的自噬途徑[J].中國生物制品學(xué)雜志,2009,22(7):654-658.

[6]張萍,陳菲,卞維鵬,等.環(huán)孢素A增強(qiáng)三氧化二砷誘導(dǎo)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87-MG自噬性死亡[J].腫瘤,2009,29(8):727-730.

[7]高薇,朱茉莉,李君,等.自噬在槲皮素誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞死亡中的作用[J].蘇州大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版,2009,29(5):878-882.