人參等7種吉林省道地藥材中重金屬檢測(cè)方法研究

沈曉君,蔡廣知,齊晉楠,孫全樂(lè),貢濟(jì)宇

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué),吉林長(zhǎng)春130117)

近年來(lái),人們?cè)絹?lái)越關(guān)注中藥的安全性,由于環(huán)境的影響,動(dòng)物及植物可能對(duì)重金屬富集,中藥中重金屬普遍存在。據(jù)報(bào)道,鉛(Pb)、鎘(Cd)、砷(As)、銀(Ag)、汞(Hg)、錫(Sn)等重金屬會(huì)引起身體各部分的病變,神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、皮膚病,甚至引起肺病的發(fā)生,因而嚴(yán)格控制中藥中重金屬的含量已成為中藥走向世界的一個(gè)亟待解決的問(wèn)題[1-3]。人參、細(xì)辛、五味子、黃芪等作為吉林省的主要道地藥材,在國(guó)內(nèi)外都有較大影響,因此測(cè)定其中的重金屬含量,對(duì)于更好地利用吉林省藥材資源,具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。實(shí)驗(yàn)選擇人參、龍膽草等7種吉林省道地藥材,試圖建立一個(gè)簡(jiǎn)單可靠的檢測(cè)方法,為中藥中重金屬的監(jiān)控提供參考[4-7]。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器與藥品 TU-1810紫外分光光度計(jì)(北京普析通用公司);萬(wàn)分之一電子天平(梅特勒-托利多上海公司);ZDJ-4A型自動(dòng)電位滴定儀;箱式馬福爐(上海錦屏儀器儀表有限公司);所用試劑均為優(yōu)級(jí)純(北京化工儀器廠);各種藥材均購(gòu)自長(zhǎng)春市中藥材股份有限公司;硝酸鉛對(duì)照品由天津市福晨化學(xué)試劑廠提供。

1.2 試液的配制 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液:取硝酸鉛0.159 8 g,置1 L容量瓶中,加稀硝酸10 mL溶解后,加水至刻度,搖勻,作為貯備液;臨用前,精密量取貯備液10 mL,加水稀釋至100 mL,搖勻得標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(相當(dāng)于10 μ g/mL)。硫化鈉:取5 g硫化鈉,加水10 mL,再加甘油30 mL,溶解后保存在棕色容量瓶中。pH 3.2溶液:用氨試液和稀鹽酸調(diào)節(jié)。實(shí)驗(yàn)用水為二次蒸餾水,其他試劑的配制均參考《中華人民共和國(guó)藥典》(2005年版一部附錄)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液和樣品溶液的制備

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 取5個(gè)10 mL容量瓶,編號(hào)為1～5號(hào),分別加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液0,0.5,1.0, 1.5,2.0 mL,用pH 3.2溶液稀釋至刻度,使pH 3.0～3.5。

2.1.2 空白溶液的制備 取空坩堝,550℃灰化2 h,冷卻后加王水1 mL,水浴蒸干,加3滴HCl及10 mL沸水,水浴加熱2 min,冷卻后加酚酞指示劑1滴,用氨試液調(diào)至微紅色,加稀醋酸2 mL,調(diào)pH 3.0～3.5,定量轉(zhuǎn)移至已備好的50 mL容量瓶中,并稀釋至刻度。

2.1.3 樣品溶液的制備 將藥材粉碎干燥至恒重后,取0.5 g,精密稱定,加硝酸鎂0.5 g置坩堝內(nèi)先炭化30 min,再550℃灰化至完全,冷卻后各加王水1 mL,水浴蒸干,其后同“空白溶液的制備”制作得樣品溶液。

2.2 最大吸收波長(zhǎng)的選擇 取標(biāo)準(zhǔn)品液1號(hào)和5號(hào)及樣品液各2.5 mL,置3個(gè)瓶中各加入10 μ L硫化5 min后,以1號(hào)作為空白溶液,分別取1號(hào)空白溶液,5號(hào)為標(biāo)準(zhǔn)品及樣品液在紫外分光光度計(jì)上掃描,結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均在220 nm處出現(xiàn)最大吸收峰,故確定220 nm為最大測(cè)定波長(zhǎng)。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 將1～5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品溶液各加入10 μ L硫化鈉溶液,搖勻,在220 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為:A=1.154 6C+ 0.344 3,相關(guān)系數(shù)r=0.999 3,表明檢測(cè)濃度在0.00～2.00 μ g/mL范圍內(nèi)吸收度線性關(guān)系良好。

2.3.2 精密度試驗(yàn) 分別取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液在220 nm處重復(fù)測(cè)定5次,RSD=0.66%。試驗(yàn)表明,儀器的精密度良好。

2.3.3 重現(xiàn)性試驗(yàn) 同一樣品精稱6份,同法制備成樣品溶液進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果RSD=2.09%,表明該方法具有較高的重現(xiàn)性。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 將制備好的標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液經(jīng)顯色后進(jìn)行分析,每隔15 min測(cè)定吸光度,觀察120 min。結(jié)果表明,顯色后120 min內(nèi)吸光度值較為穩(wěn)定。

2.3.5 加樣回收率試驗(yàn) 取已知重金屬含量的樣品6份,加入適量標(biāo)準(zhǔn)鉛,按上述樣品制備方法和條件進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得回收率為100.7%(n=5),RSD為1.92%(見(jiàn)表1)。

表1 加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

樣品中重金屬的測(cè)定:取樣品液0.5 mL用 pH3.2的水溶液稀釋至50 mL,加10 μ L硫化鈉溶液,搖勻靜置5 min,220 nm處測(cè)定吸光度,平行測(cè)定3次計(jì)算重金屬的含量(見(jiàn)表2)。

表2 樣品中重金屬含量測(cè)定結(jié)果(n=3)

4 討論

4.1 硫化鈉最佳用量的影響 硫化鈉的用量直接影響重金屬的測(cè)定,且對(duì)測(cè)定體系的pH也有一定影響。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)硫化鈉的用量在5～15 μ L時(shí),吸光度最大且穩(wěn)定,當(dāng)硫化鈉用量超過(guò)15 μ L時(shí),吸光度基本保持不變,說(shuō)明反應(yīng)進(jìn)行完全。故實(shí)驗(yàn)選用10 μ L。

4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,中藥材中都含有一定量的重金屬,某些藥材中重金屬含量很高,可能和用藥部位和植物對(duì)金屬元素的生物富集能力不同有關(guān),另外,中藥材中的重金屬含量和藥材的種類也相關(guān),如:七味吉林省道地藥材的重金屬含量差異均較大。

4.3 與傳統(tǒng)的比色法判斷重金屬的限度相比,紫外分光光度法具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn),大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在同一實(shí)驗(yàn)室操作條件,不同的被測(cè)樣品,保持相同的溶液pH值,最大吸收峰的位置和吸光度都非常穩(wěn)定,重現(xiàn)性良好。從加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果上看(回收率為100.7%,n=6),RSD為1.92%),方法的準(zhǔn)確性良好,可用于中藥材實(shí)際生產(chǎn)中重金屬的檢測(cè)。

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