Ki-67和nm 23在皮膚惡性黑色素瘤中的表達(dá)及其臨床意義

蘇 賡,梁科慶,溫 偉

(廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)院病理科,廣西南寧530001)

皮膚惡性黑色素瘤(malignantmelanoma,MM)是 一種高度惡性的腫瘤,常原發(fā)于皮膚及黏膜組織,可廣泛浸潤皮膚表皮至皮下組織或黏膜及黏膜深層組織,甚至相鄰器官(或組織),并可通過淋巴結(jié)、血行遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,或廣泛播散。Nm23基因又叫抗腫瘤轉(zhuǎn)移基因,目前,在人類已發(fā)現(xiàn)幾種nm 23基因,研究最多的是nm 23-H1和nm 23-H2[1]。有研究表明,其有抗腫瘤轉(zhuǎn)移的潛能,有關(guān)nm23基因蛋白與惡性黑色素瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系國內(nèi)有一定的研究[2]。Ki-67是一種在細(xì)胞G1、S、M、G2期均會出現(xiàn)的核抗原,表達(dá)的高低反映細(xì)胞增殖的程度[3]。

本研究通過應(yīng)用免疫組化方法對41例皮膚惡性黑色素瘤進(jìn)行研究,以探討Ki-67和nm 23在皮膚惡性黑色素瘤的表達(dá)以及兩者表達(dá)的相關(guān)性對臨床預(yù)后的判斷。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 取廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)院自2000年-2005年經(jīng)手術(shù)切除病理確診、臨床資料較完整的皮膚惡性黑色素瘤41例,進(jìn)行免疫組化研究,并進(jìn)行隨訪。標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林液固定,常規(guī)石蠟包埋,3 μ m連續(xù)切片。男20例,女21例;年齡40～70歲,平均年齡59歲;病程1月～1年。術(shù)前均未經(jīng)放、化療。

1.2 免疫組化染色 Ki-67、nm 23單克隆即用型抗體和S-PKits均購自北京中杉生物技術(shù)公司產(chǎn)品,按S-P法操作,DAB顯色。以已知Ki-67和nm 23陽性組織切片作為陽性對照,以PBS代替一抗作為陰性對照。

1.3 結(jié)果判定 Ki-67陽性定位于細(xì)胞核,nm 23陽性定位于細(xì)胞漿。染色陽性信號呈棕黃色。根據(jù)陽性比例分為,-:無陽性細(xì)胞＜10%;+:陽性細(xì)胞10%～20%;++:陽性細(xì)胞20%～50%;+++:陽性細(xì)胞≥50%。為了便于統(tǒng)計,把(+)、(++)、(+ ++)合并為(+)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 全部資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 Ki-67和nm 23在皮膚惡性黑色素瘤中的表達(dá)

見表1。

表1 Ki-67和nm 23在皮膚惡性黑色素瘤中的表達(dá) 例

2.2 皮膚惡性黑色素瘤中Ki-67和nm 23表達(dá)的相互關(guān)系 見表2。

2.3 隨訪情況 見表3。

表2 皮膚惡性黑色素瘤中Ki-67和nm 23表達(dá)的相互關(guān)系 例

表3 皮膚惡性黑色素瘤中Ki-67和nm 23表達(dá)與5年死亡率的關(guān)系

3 討論

Ki-67是一種與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的核內(nèi)蛋白,因其只表達(dá)于增殖細(xì)胞各期中,靜止期細(xì)胞陰性,并具有半衰期短的特點(diǎn),而被作為評價細(xì)胞生長分?jǐn)?shù)的有效指標(biāo),Rose et al[4]比較數(shù)種增殖標(biāo)志物,認(rèn)為Ki-67抗體較適合作為常規(guī)的免疫組化研究,目前Ki-67廣泛應(yīng)用于臨床及基礎(chǔ)研究。本文通過分析淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性惡性黑色素瘤的Ki-67陽性率顯著高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的惡性黑色素瘤(P＜0.05),并且隨訪觀察的在5年內(nèi)死亡18例病例中,Ki-67蛋白陽性15例,陽性率為83.3%,超過5年生存的23例中,Ki-67蛋白陽性10例,陽性率為43.48%,可以看出Ki-67的高表達(dá)對判斷皮膚惡性黑色素瘤預(yù)后不佳有一定提示作用。

nm 23基因定位于人染色體17q21.3[5],其蛋白質(zhì)產(chǎn)物為核苷二磷酸激酶(NDPK),早期研究顯示其對癌細(xì)胞株的運(yùn)動能力和轉(zhuǎn)移潛能有抑制作用,被認(rèn)為是一種癌轉(zhuǎn)移抑制基因。有人發(fā)現(xiàn)NDPK至少有兩個主要功能在細(xì)胞生長、腫瘤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用:(1)通過催化GTP?GDP的轉(zhuǎn)化,參與微管蛋白的聚合與解聚;(2)通過影響G蛋白來調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的信號傳遞[6]。在人乳腺癌、肝癌、胃癌、惡性黑色素瘤、卵巢癌等惡性腫瘤中,nm 23基因表達(dá)降低與腫瘤轉(zhuǎn)移特性相關(guān)。本研究結(jié)果中,在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的皮膚惡性黑色素瘤組織中,nm 23的陽性表達(dá)率為27.59%;無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的皮膚惡性黑色素瘤組織中,nm 23的陽性表達(dá)率達(dá)到83.33%(P＜0.05)。隨訪病人中,在5年內(nèi)死亡18例中,nm 23陽性3例,陽性率為16.7%,超過5年生存的23例中,nm 23陽性15例,陽性率為65.22%,兩者有統(tǒng)計學(xué)差異,即生存超過5年者其nm 23陽性率顯著高于生存時間少于5年者,結(jié)果表明nm 23蛋白陽性表達(dá)對惡黑的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)具有負(fù)調(diào)控作用,nm 23蛋白低表達(dá)惡性黑色素瘤具有高轉(zhuǎn)移潛能,而高表達(dá)者預(yù)后相對好,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、復(fù)發(fā)率、臟器轉(zhuǎn)移率均低,生存期長。

nm 23和Ki-67蛋白與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系:nm 23是一種抗轉(zhuǎn)移基因,本組結(jié)果說明nm 23與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān),nm 23基因蛋白對皮膚惡性黑色素瘤癌的轉(zhuǎn)移,有一定的抑制作用。Ki-67蛋白表達(dá)陽性比淋巴結(jié)陰性表達(dá)病例高。Ki-67蛋白表達(dá)陽性的病例15例在5年內(nèi)死亡。Ki-67和nm 23在皮膚惡性黑色素瘤中的同時檢測可以為臨床的判斷預(yù)后及治療方面提供一定的幫助。

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