骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療股骨頭壞死研究進(jìn)展

戴雙武，丁 帥，李章華

（1.深圳市寶安區(qū)石巖醫(yī)院骨科，廣東深圳 518108；2.武漢大學(xué)人民醫(yī)院骨科，湖北武漢 430060）

股骨頭壞死（osteonecrosis of femoral head，ONFH）是一種嚴(yán)重危害人類健康、致殘率極高的常見疾病，常累及中青年，呈進(jìn)展性和致殘性發(fā)展，80%的患者在1～4年內(nèi)進(jìn)展為股骨頭塌陷，最終因股骨頭變形、毀損、髖關(guān)節(jié)劇烈疼痛而不得不行人工關(guān)節(jié)置換術(shù)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSCs）具有良好的多向分化潛能、活躍的增殖特性、對(duì)外源基因的高效轉(zhuǎn)染表達(dá)能力以及促進(jìn)造血、在體外較易分離和培養(yǎng)等特性，較多地用于股骨頭壞死的研究，顯示了良好的應(yīng)用前景。

1 股骨頭壞死的機(jī)制

ONFH發(fā)病機(jī)制復(fù)雜多樣，病因主要是創(chuàng)傷、應(yīng)用激素、酗酒及結(jié)締組織病因素等。微循環(huán)障礙是原發(fā)性股骨頭壞死的共同病理機(jī)制，決定其病理演變的因素可概括為3個(gè)方面：病因、破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收與骨的有效重建速度的平衡關(guān)系、生物力學(xué)作用。病因最終造成微循環(huán)損害，骨細(xì)胞、骨髓組織壞死、骨髓間充質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化能力下降，破骨細(xì)胞對(duì)失去保護(hù)的骨小梁吸收增強(qiáng)，骨小梁因而吸收變得稀疏、細(xì)小。另一方面，因骨小梁中的骨細(xì)胞壞死失去了礦物代謝功能，其機(jī)械強(qiáng)度隨之下降。當(dāng)應(yīng)力傳導(dǎo)時(shí)，骨小梁極易骨折，在骨壞死吸收的同時(shí)伴隨修復(fù)，修復(fù)的強(qiáng)弱取決于供血狀態(tài)及骨髓的功能狀態(tài)。骨髓間質(zhì)細(xì)胞分裂增生，在骨壞死區(qū)出現(xiàn)富含成纖維樣細(xì)胞的結(jié)締組織，毛細(xì)血管再生，成骨細(xì)胞及來(lái)自于骨髓間質(zhì)細(xì)胞分化的成骨細(xì)胞合成骨基質(zhì)，重建壞死的骨小梁，骨的吸收速度及新生骨的有效重建速度應(yīng)保持一定的平衡關(guān)系，而這種關(guān)系最終由破骨細(xì)胞的活動(dòng)、骨髓間質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的能力及成骨細(xì)胞的功能狀態(tài)決定[1]?？傊晒穷^壞死的特征是股骨頭缺血、壞死，隨之出現(xiàn)修復(fù)反應(yīng)，進(jìn)而發(fā)生股骨頭塌陷及髖關(guān)節(jié)退行性關(guān)節(jié)炎。

2 BM-MSCs的生物學(xué)特性

BM-MSCs來(lái)源于胚胎發(fā)育期中胚層，存在于骨髓組織中，較多用于ONFH的治療研究中。在光學(xué)顯微鏡下BM-MSCs顯示出類似成纖維細(xì)胞的外觀，體積小，核漿比大；只有少數(shù)正在活躍地復(fù)制，細(xì)胞周期每個(gè)階段的檢控點(diǎn)和時(shí)間跨度均不明確；高比例的G0/G1期細(xì)胞暗示BM-MSCs具有高度的分化潛能；傳代培養(yǎng)多數(shù)樣本于P10代以后開始出現(xiàn)衰老現(xiàn)象。

BM-MSCs的主要生物學(xué)性狀如下：細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子有白細(xì)胞介素-1α、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-7、白細(xì)胞介素-8、白細(xì)胞介素-11、白細(xì)胞介素-12、白細(xì)胞介素-14、白細(xì)胞介素-15、LIF、SCF、Flt23 配體、GM-CSF、G-CSF、M-CSF；細(xì)胞活素及生長(zhǎng)因子受體有：IL-1、RIL-7、RIL-4R、IL-6R、IL-7R、LIFR、SCFR、G-CSFR、IFNR、TNF-ⅠR、TNF-ⅡR、TGF-β1R、TGF-β2R、bFGFR、PDGFR、EGFR。 目前尚未找到 BM-MSCs的特異性標(biāo)志物，通常以其較強(qiáng)的貼壁生長(zhǎng)特性、不表達(dá)造血干細(xì)胞標(biāo)志物（如CD14、CD34、CD45等）、形態(tài)似成纖維樣細(xì)胞、具有多向分化潛能等特征來(lái)辨認(rèn)。由于BM-MSCs可表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞和肌細(xì)胞等其他細(xì)胞的表面抗原，故常用 SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124等來(lái)篩選BM-MSCs[2]。

3 BM-MSCs向骨、軟骨的定向誘導(dǎo)分化

Tamir等[3]用一個(gè)細(xì)胞來(lái)源的BM-MSCs分別進(jìn)行骨、軟骨和脂肪的定向誘導(dǎo)分化，結(jié)果顯示BM-MSCs具有多向分化能力。細(xì)胞因子與骨形成、骨愈合及骨重建有著密切的關(guān)系。這些物質(zhì)有胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGFs）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGFs）、轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）、血小板源生長(zhǎng)因子（PDGF）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMPs）等。胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）可刺激細(xì)胞分化和骨細(xì)胞基質(zhì)合成。PDGF對(duì)骨細(xì)胞分化有著強(qiáng)大的作用。在兔脛骨缺損模型中，缺損處局部單純注射PDGF可以提高傷處膠原的體積和密度。FGFs有多種調(diào)節(jié)作用，如細(xì)胞的有絲分裂、分化、蛋白酶的合成及受體的調(diào)節(jié)。有學(xué)者通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）對(duì)BM-MSCs有促進(jìn)增殖作用[4]。TGF-β可刺激成骨細(xì)胞增殖，也是成骨細(xì)胞化學(xué)誘導(dǎo)因子和成骨細(xì)胞合成的抑制劑。實(shí)驗(yàn)表明，TGF-β可刺激兔顱骨缺損處成骨細(xì)胞的募集和增殖，從而導(dǎo)致骨愈合。BMPs家族由14個(gè)成員組成，它們可促進(jìn)骨形成，而且能促進(jìn)異位成骨[5]。李廣恒等[6]將重組骨形態(tài)發(fā)生蛋白-4（BMP-4）加入體外培養(yǎng)的兔骨髓細(xì)胞內(nèi)，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)骨鈣素和堿性磷酸酶。Lane等[7]做了重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（rhBMP-2）與骨髓修復(fù)鼠股骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究，通過(guò)放射學(xué)和生物力學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其無(wú)論在愈合率還是在生物力學(xué)性能上都比單純自體松質(zhì)骨組和單純骨髓組優(yōu)越。骨形成是多因子、多時(shí)相協(xié)調(diào)作用的結(jié)果，其詳細(xì)調(diào)節(jié)機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。

4 BM-MSCs與ONFH的治療

目前對(duì)于股骨頭缺血性壞死的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。研究表明，股骨頭壞死的發(fā)生與成骨細(xì)胞及骨髓基質(zhì)細(xì)胞的功能下降有關(guān)。如Hernigou發(fā)現(xiàn)股骨頭壞死患者的造血干細(xì)胞和骨髓基質(zhì)細(xì)胞活性較正常人均有明顯降低。Gangji等[8]比較了13例股骨頭壞死，顯示股骨頭壞死患者轉(zhuǎn)子部成骨細(xì)胞的增殖能力下降，結(jié)果提示，股骨頭缺血性壞死可能是在多種因素的作用下，通過(guò)全身途徑致使成骨細(xì)胞和骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的功能下降，進(jìn)而導(dǎo)致股骨頭再生血管和成骨能力降低。而BM-MSCs是具有成骨作用且能夠自我復(fù)制的細(xì)胞，對(duì)促進(jìn)股骨頭壞死重建起到重要作用。Kocher等[9]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，BM-MSCs或內(nèi)皮前體細(xì)胞可以促進(jìn)缺血模型的血流恢復(fù)。Kinnaird等[10]在給鼠缺血性后肢肌肉注射培養(yǎng)的骨源性干細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)其可以促進(jìn)側(cè)支循環(huán)及肢體功能恢復(fù)，并且與血管生成有關(guān)的細(xì)胞因子（如VEGF、FGF-2、IL-6等）基因表達(dá)水平增高。BM-MSCs可誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞也已在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)。可見通過(guò)BM-MSCs移植既有利于股骨頭血液供應(yīng)的恢復(fù)，又能提高局部成骨能力，從而促進(jìn)壞死骨的修復(fù)，目前BM-MSCs的應(yīng)用多與其他療法聯(lián)合應(yīng)用[11]。

4.1 髓芯減壓BM-MSCs移植

髓芯減壓加BM-MSCs移植是臨床治療早期股骨頭壞死的主要手段之一，已經(jīng)有大量動(dòng)物和臨床實(shí)驗(yàn)報(bào)道都取得了良好的效果。劉長(zhǎng)安等[12]在液氮造模后，采用髓芯減壓并植入復(fù)合有自體BM-MSCs的明膠海綿，8周后鉆孔區(qū)形成骨小梁結(jié)構(gòu)，組織學(xué)顯示鉆孔區(qū)內(nèi)充滿新生骨小梁結(jié)構(gòu)并成熟，小梁內(nèi)骨髓組織填充。王江泳等[13]植入含有體外培養(yǎng)的自體BM-MSCs的明膠海綿和異體BM-MSCs的明膠海綿，8周時(shí)兩組的鉆孔區(qū)均出現(xiàn)骨小梁結(jié)構(gòu)；骨小梁趨于成熟，可以看出同種異體和自體BM-MSCs移植均對(duì)兔股骨頭缺血性壞死有良好的修復(fù)作用。

臨床研究結(jié)果顯示，骨髓干細(xì)胞移植治療早期股骨頭壞死，對(duì)緩解疼痛、阻止病變進(jìn)展有較好的作用。Gangji等[14]對(duì)13例股骨頭壞死患者18髖進(jìn)行單純髓芯減壓和聯(lián)合移植BM-MSCs髓芯減壓的隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，60個(gè)月后實(shí)驗(yàn)組10髖中僅1髖行關(guān)節(jié)置換，而對(duì)照組8髖中有4髖不得不進(jìn)行置換，生存分析表明，兩組關(guān)節(jié)塌陷有顯著性差異。Hernigou等[15]共治療116例189髖，隨訪5～10年，平均7年，結(jié)果塌陷前期（Ⅰ、Ⅱ期）145髖中有9髖進(jìn)行髓關(guān)節(jié)置換，塌陷后期（Ⅲ、Ⅳ期）的44髖中有25髖做全髖關(guān)節(jié)置換。結(jié)果顯示，移植的細(xì)胞數(shù)量越多，療效越好。郭小偉等[16]對(duì)Ficat分期為三期的20例患者進(jìn)行自體周圍血BM-MSCs移植，12個(gè)月隨訪顯示，所有患者疼痛、關(guān)節(jié)功能顯著改善、Harris評(píng)分與術(shù)前比較顯著提高，且優(yōu)于單純髓芯減壓術(shù)。汪學(xué)松[17]在病灶搔刮術(shù)后，直接自套管針內(nèi)快速加壓注入BM-MSCs到壞死區(qū)。治療早期股骨頭壞死27例，結(jié)果大部分患者疼痛、關(guān)節(jié)功能、X線片均有不同程度的改善。徐軍等[18]應(yīng)用髖關(guān)節(jié)鏡及自體外周血BM-MSCs移植術(shù)，采用Harris髖關(guān)節(jié)評(píng)分評(píng)價(jià)優(yōu)良率達(dá)94.7%，所有患者疼痛消失，行走正常，髓關(guān)節(jié)活動(dòng)范圍正?；蚪咏＃琗線片示股骨頭輪廓清晰，囊性變消失，為微創(chuàng)治療ONFH提供了思路。上述研究說(shuō)明股骨頭髓芯減壓BM-MSCs移植手術(shù)治療早期ONFH具有損傷小、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、有效的優(yōu)點(diǎn)，可改善關(guān)節(jié)功能。然而大規(guī)模、多中心樣本試驗(yàn)長(zhǎng)期療效尚有待更多的臨床觀察進(jìn)行驗(yàn)證。

4.2 BM-MSCs介入移植

近年來(lái)有學(xué)者采用介入方法移植BM-MSCs治療ONFH，取得了很好的效果。楊曉鳳等[19]分別向動(dòng)物模型兔經(jīng)DSA動(dòng)脈注入BM-MSCs，移植后4周移植組兔右后肢股骨頭區(qū)供血?jiǎng)用}較對(duì)照組股動(dòng)脈明顯增多。移植后12周右側(cè)股骨頭軟骨、板層骨及骨小梁明顯修復(fù)。季衛(wèi)鋒等[20]在DSA介入下向動(dòng)物模型兔旋股內(nèi)、外動(dòng)脈插管分別注射BM-MSCs后，X線表現(xiàn)示骨質(zhì)密度改變明顯好轉(zhuǎn)；病理組織學(xué)表現(xiàn)為空骨陷窩減少，成骨細(xì)胞增多，新骨形成；四環(huán)素?zé)晒鈽?biāo)記顯示壞死修復(fù)區(qū)熒光帶鮮亮，邊界增寬。上述研究證明高選擇性股動(dòng)脈灌注BM-MSCs治療股骨頭壞死能加速兔股骨頭的再血管化和再骨化進(jìn)程，從而達(dá)到治療ONFH的目的。

楊曉鳳等[21]將導(dǎo)管超選擇插入旋股內(nèi)、外動(dòng)脈及閉孔動(dòng)脈，分次緩慢將自體BM-MSCs懸液注入動(dòng)脈內(nèi)。結(jié)果關(guān)節(jié)疼痛緩解85.7%，關(guān)節(jié)功能改善30.2%，旋股內(nèi)、外動(dòng)脈及閉孔動(dòng)脈管徑增粗，新生血管增多，股骨頭區(qū)血液供應(yīng)明顯改善，2例18個(gè)月復(fù)查股骨頭壞死區(qū)縮小，可見新骨形成。史沛等[22]采用介入方法將自體骨髓干細(xì)胞注入5例股骨頭壞死患者治療側(cè)旋股內(nèi)、外動(dòng)脈及閉孔動(dòng)脈內(nèi)，1年隨訪結(jié)果顯示，患者臨床癥狀明顯緩解，髖關(guān)節(jié)臨床癥狀Harris評(píng)分顯著提高，髖關(guān)節(jié)活動(dòng)度無(wú)明顯改變，未發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥。介入移植BM-MSCs治療ONFH是一種安全有效、便捷的方法，還可以免除開放性手術(shù)的痛苦，為治療早期ONFH開辟了新的思路。

4.3 基因轉(zhuǎn)染BM-MSCs移植

將目標(biāo)基因通過(guò)載體轉(zhuǎn)入BM-MSCs內(nèi)再與不同載體材料復(fù)合后植入股骨頭壞死區(qū)治療股骨頭壞死，也是目前的研究方向，取得了許多令人振奮的結(jié)果。BMPs可促進(jìn)骨形成，而且能促進(jìn)異位成骨。陸斌等[23]利用人BMP-2基因轉(zhuǎn)染的自體BM-MSCs復(fù)合多孔β-磷酸三鈣材料治療股骨頭壞死，植入后1、2、3周BMP-2組在股骨頭局部有BMP-2蛋白的高表達(dá)，有明顯成骨；16周時(shí)壞死區(qū)被完全修復(fù)，且新骨體積明顯大于對(duì)照組；BMP-2組股骨頭形態(tài)規(guī)則，無(wú)塌陷，植入?yún)^(qū)松質(zhì)骨標(biāo)本的最大抗壓強(qiáng)度、軟骨下骨的最大抗壓強(qiáng)度參數(shù)均與正常骨接近。Xiao等[24]聯(lián)合rhBMP-2的BM-MSCs培養(yǎng)的支架材料干預(yù)，組織學(xué)也提示有正常骨修復(fù)，提示BMP-2基因轉(zhuǎn)染的BM-MSCs是治療ONFH的有效途徑。張曄等[25]以脂質(zhì)體介導(dǎo)Pcdna-Ang-1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染兔BM-MSCs，與磷酸三鈣（TCP）陶瓷復(fù)合，結(jié)果細(xì)胞與TCP材料復(fù)合生長(zhǎng)良好。組織學(xué)檢查見毛細(xì)血管生長(zhǎng)及新骨形成活躍，電鏡顯示實(shí)驗(yàn)組成骨細(xì)胞和膠原纖維多于對(duì)照組，細(xì)胞器成熟，Ang-1修飾的BMSC預(yù)構(gòu)人工骨也有助于股骨頭壞死的修復(fù)。而陳超等[26]將hVEGF-165質(zhì)粒轉(zhuǎn)染BMSC與凍干松質(zhì)骨作載體回植于兔股骨頭壞死部位，在植入后2、4、8周對(duì)植入物進(jìn)行形態(tài)學(xué)及組織學(xué)觀察，結(jié)果顯示股骨頭壞死情況得到改善。杭棟華等[27]研究hVEGF-165基因轉(zhuǎn)染的犬BM-MSCs移植、BM-MSCs移植對(duì)修復(fù)自體股骨頭壞死的效果實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)第2、4、8周骨小梁定量分析提示轉(zhuǎn)基因的間充質(zhì)干細(xì)胞移植組成骨修復(fù)好于單純干細(xì)胞移植組；12周時(shí)，轉(zhuǎn)基因間充質(zhì)干細(xì)胞移植組中血管數(shù)量最多。余開湖等[28-29]報(bào)道，攜帶血管生成素基因（Ang-1）的BM-MSCs介入治療不僅能促進(jìn)毛細(xì)血管的生成，而且能定向進(jìn)行骨分化，對(duì)ONFH有明顯的修復(fù)作用。此外，溫茜等[30]用重組方法產(chǎn)生重組腺病毒人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Ad-HGF）轉(zhuǎn)染BM-MSCs，轉(zhuǎn)染后的BM-MSCs在mRNA和蛋白水平均有HGF高表達(dá)，為其用于早期ONFH的治療奠定了基礎(chǔ)。利用生物技術(shù)將轉(zhuǎn)染某些基因的BM-MSCs細(xì)胞用于治療ONFH將是我們今后的研究方向之一。

4.4 聯(lián)合填充材料BM-MSCs移植

BM-MSCs聯(lián)合什么樣的載體到目標(biāo)區(qū)域也值得我們探索，并且也有很多學(xué)者做了相關(guān)研究。在支架材料的選擇上，F(xiàn)ialkov等使用聚乳酸/聚羥基乙酸共聚物（polylactic/glycolic acid copolymer，PLGA）作為體內(nèi)研究的支架材料，徐曉良等使用骨形成蛋白/膠原/珊瑚復(fù)合人工骨用于股骨頭缺損模型。由于PLGA降解產(chǎn)物酸性過(guò)強(qiáng)，對(duì)組織有副作用；膠原/珊瑚復(fù)合人工骨很難降解等缺點(diǎn)，限制了它們的使用。孫偉等[31]在兔雙側(cè)股骨頭內(nèi)骨缺損區(qū)填充納米人工骨和BM-MSCs的復(fù)合材料。術(shù)后4周即有明顯的成骨反應(yīng)和新骨形成，填充納米晶膠原基骨（nHAC）和BM-MSCs的復(fù)合材料組骨小梁結(jié)構(gòu)形成，12周基本修復(fù)股骨頭的骨缺損區(qū)，說(shuō)明nHAC有較強(qiáng)的傳導(dǎo)成骨作用，是修復(fù)兔股骨頭骨缺損的良好移植材料，適合MSCs細(xì)胞黏附、生長(zhǎng)、增殖和分化，有較強(qiáng)的組織相容性和適當(dāng)?shù)目山到庑裕茉诮到膺^(guò)程中逐漸被新骨替代；復(fù)合BM-MSCs后能促進(jìn)骨缺損的修復(fù)，對(duì)股骨頭壞死的治療有較大價(jià)值。付松等[32]則證實(shí)牛松質(zhì)骨可以作為一種較好的載體應(yīng)用于骨組織工程學(xué)。黃炎等[33]將小牛脫鈣松質(zhì)骨（DBCB）作為載體聯(lián)合一定量的BMPs與不同濃度的含有BM-MSCs的單核細(xì)胞懸液治療股骨頭兔模型也取得了很好的效果。陳觀華等[34]證實(shí)使用自體松質(zhì)骨及BMP聯(lián)合自體BM-MSCs治療股骨頭壞死實(shí)驗(yàn)兔效果良好。陸驊等表示作為BM-MSCs載體，目前凍干松質(zhì)骨要優(yōu)于羥基磷灰石。陳雙濤等植入復(fù)合同種異體BM-MSCs的膠原蛋白海綿，同時(shí)植入腹壁淺動(dòng)、靜脈束，12周后缺損區(qū)可見成熟的骨小梁組織及新生骨髓。股骨頭冠狀截面的血管密度及新生骨小梁在骨缺損區(qū)所占的面積大，說(shuō)明定向誘導(dǎo)的同種異體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞與腹壁淺動(dòng)、靜脈束相輔相成，聯(lián)合應(yīng)用可以快速、有效地修復(fù)股骨頭壞死骨缺損，防止股骨頭塌陷。目前對(duì)于局部聯(lián)合材料移植BM-MSCs也是治療ONFH的一個(gè)方向，但尋求組織相容性高、副作用少、便捷有效的材料依然值得探索。

5 目前BM-MSCs在治療ONFH中存在的問(wèn)題

BM-MSCs治療早期ONFH是目前骨科研究熱點(diǎn)，有很好的應(yīng)用前景，但是也存在很多問(wèn)題，如：①不同個(gè)體、不同疾病狀態(tài)和不同部位的BM-MSCs數(shù)量和質(zhì)量均可能有差異。因此，必須建立一套高效率的BM-MSCs體外擴(kuò)增或活化技術(shù)，保證有足夠數(shù)量的細(xì)胞滿足臨床需要。②移植治療策略是BM-MSCs臨床應(yīng)用的關(guān)鍵。目前已經(jīng)報(bào)道的治療策略有BM-MSCs動(dòng)員、靜脈輸入、靶器官動(dòng)靜脈血管介入、定位移植等，這些方法各有所長(zhǎng)，針對(duì)不同的疾病采用哪種方法最合適還值得深入探討。③目前有部分研究用不同類型的填充材料作為載體，但究竟哪種更加有利于BM-MSCs發(fā)揮作用且副作用小，值得我們繼續(xù)研究。④臨床療效、體內(nèi)可控性和安全性評(píng)價(jià)問(wèn)題是BM-MSCs特別是轉(zhuǎn)入某些基因后臨床治療需要明確的根本問(wèn)題，雖然沒(méi)有人報(bào)道BM-MSCs移植治療的負(fù)面影響，但體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的BM-MSCs移植到體內(nèi)后是否會(huì)發(fā)生突變和導(dǎo)致腫瘤或者畸胎瘤可能是BM-MSCs臨床治療中最令人擔(dān)憂的問(wèn)題，因此，必須建立可靠的技術(shù)方法和評(píng)價(jià)體系。⑤BM-MSCs治療是一種有別于常規(guī)藥物和手術(shù)治療的新技術(shù)，需要有相應(yīng)的技術(shù)規(guī)范和管理機(jī)制，保證BM-MSCs治療技術(shù)健康發(fā)展。

盡管目前BM-MSCs在治療股骨頭缺血性壞死方面應(yīng)用較少，但我們相信隨著研究的深入，BM-MSCs的應(yīng)用必將為廣大股骨頭壞死患者帶來(lái)巨大的福音。

[1]Suh KT,Kim SW,Roh HL,et al.Decreased osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells in alcohol-induced osteonecrosis[J].Clin Orthop,2005,(431):220.

[2]Johnstone B,Yoo JU.Autologous mesenchymal progenitor cells in articular cartilage repair[J].Clin Orthop Relat Res,1999,(Suppl 367):156-162.

[3]Tamir A,Petrocelli T,Stetler K,et al.Stem cell factor inhibits erythroid differentiation by modulating the activity of G1-cyclin-dependent kinase complexes:a role for p27 in erythroid differentiation coupled G1arrest[J].Cell Growth Differ,2000,11(5):269-277.

[4]Demulder A,Suggs SV,Zsebo KM,et al.Effects of stem cell factor on osteoclast-like cell formation in long term human marrow cultures[J].J Bone Miner Res,2002,7(11):1337-1344.

[5]Urist MR,Silverman BF,Busing K,et al.The bone induction principle[J].Clin Orthop,1967,326(53):243-283.

[6]李廣恒,侯筱魁,吳祥甫.重組BMP-4對(duì)兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[J].中華骨科雜志,2005,22(11):685-689.

[7]Lane Jm,Yasko A,Tomin E,et al.Bone marrow and recombinant human bone morphogenetic protein-2 in osseous repair[J].Clin Orthop,2002,361(1):216-227.

[8]Gangji V,Hauzeur JP.Treatment of osteonecrosis of the femoral head with implantation of autologous bone marrow cells[J].Bone Joint Surg Am,2005,1(1):106-112.

[9]Kocher AA,Schuster MD,Szabolcs MJ,et al.Neovascularization of ischemic myocardium by human bone-marrow-derived angioblasts prevents cardiomyocyte apoptosis,reduces remodelingand improves cardiac function[J].Bat Med,2005,7(4):430-436.

[10]Kinnaird T,Stabile E,Burnet MS,et al.Marrow-derived stromal cells express genes encoding a broad spectrum of arteriogenic cytokines and promote in vitro and in vivo arteriogenesis through paracrine mechanisms[J].Clinc Res,2004,94(5):678-685.

[11]Mont MA,Jones LC,Hungerford DS.Nontraumatic osteonecrosis of the femoral head:ten years later[J].Bone Joint Surg Am,2006,88(5):1117-1132.

[12]劉長(zhǎng)安,王江泳.骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植治療兔股骨頭缺血性壞死的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)矯形外科雜志,2007,15(1):58-60.

[13]王江泳,王保芝,劉長(zhǎng)安,等.同種異體BM-MSCs移植對(duì)家兔股骨頭缺血性壞死的治療作用[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2008,12(3):565-568.

[14]Gangji V,Toungouz M,Lambermont M,et al.Treatment of osteonecrosis of the femoral head with implantation of autologous bone-marrow cells:five-year follow-up[J].Bone,2007,6(1):27-28.

[15]Hernigou P,Beaujean F.Treatment of osteonecrosis with autologous bone marrow grafting[J].Clin Orthop Relat Res,2004,(405):14-23.

[16]郭小偉,吳衛(wèi)新,洪云飛,等.髓芯減壓并自體骨髓干細(xì)胞移植治療股骨頭缺血性壞死[J].醫(yī)藥論壇雜志,2008,29(5):19-21.

[17]汪學(xué)松.經(jīng)皮骨髓移植治療早期股骨頭壞死27例[J].濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,25(6):435-436.

[18]徐軍,田軍,許超蕊.應(yīng)用髖關(guān)節(jié)鏡髓芯減壓并自體外周血干細(xì)胞移植治療早期股骨頭缺血性壞死38例[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2008,12(3):515-517.

[19]楊曉鳳,王紅梅,許憶峰,等.經(jīng)動(dòng)脈骨髓干細(xì)胞移植治療股骨頭壞死63例[J].中國(guó)臨床康復(fù),2006,10(13):3-5.

[20]季衛(wèi)鋒,童培建.骨髓多能干細(xì)胞動(dòng)脈灌注治療股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2004,24(11):999-1002.

[21]楊曉鳳,王紅梅.干細(xì)胞移植改善股骨頭壞死缺血狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)及臨床效應(yīng)：20只模型兔及188例患者資料分析[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2008,12(8):1558-1562.

[22]史沛,茹鳳娟.經(jīng)動(dòng)脈骨髓干細(xì)胞移植結(jié)合介入治療股骨頭缺血性壞死[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2007,11(37):7345-7348.

[23]陸斌,湯亭亭,岳冰,等.BMP-2基因給藥修復(fù)實(shí)驗(yàn)性羊股骨頭壞死[J].中華骨科雜志,2005,25(10):603-607.

[24]Xiao ZM,Jiang H,Zhan XL,et al.Treatment of osteonecrosis of femoral head with BM-MSCs seeded bio-derived bone materials combined with rhBMP-2 in rabbits[J].Chinese Journal of Traumatology,2008,11(3):165-170.

[25]張曄,曾炳芳.BM-MSCs預(yù)構(gòu)人工骨對(duì)兔股骨頭壞死的修復(fù)作用[J].中國(guó)臨床康復(fù),2004,8(20):3960-3962.

[26]陳超,張彥陵.骨髓基質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)基因治療兔股骨頭無(wú)菌性壞死的研究[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2006,22(14):2129-2131.

[27]杭棟華,閻作勤.VEGF-165基因修飾的BM-MSCs移植修復(fù)犬股骨頭壞死[J].復(fù)旦學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2007,34(6):806-811.

[28]余開湖,馮敢生,潘盛信,等.攜帶Ang-1的BM-MSCs雙介入治療ANFH的轉(zhuǎn)染與表達(dá)[J].臨床放射性雜志,2005,24(9):814-817.

[29]余開湖,馮敢生,潘盛信,等.攜帶Ang-1的BM-MSCs對(duì)ANFH模型實(shí)驗(yàn)修復(fù)過(guò)程的影響[J].臨床放射性雜志,2006,25(1):79-82.

[30]溫茜,馬驪,金丹,等.重組腺病毒Ad-HGF轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細(xì)胞及其表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2007,27(11):1627-1631.

[31]孫偉,李子榮,史振才,等.納米晶膠原基骨和BM-MSCs復(fù)合修復(fù)兔股骨頭壞死缺損的研究[J].中國(guó)重建修復(fù)外科雜志,2005,19(9):703-706.

[32]付松,張?jiān)?牛松質(zhì)骨復(fù)合骨髓基質(zhì)干細(xì)胞植入治療兔股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用診斷與治療雜志,2007,12(2):101-103.

[33]黃炎,孔榮,尚希福,等.濃集自體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合物成骨的實(shí)驗(yàn)研究[J].解剖與臨床,2005,10(3):192-194.

[34]陳觀華,李裕標(biāo).自體骨移植及BMP聯(lián)合自體間充質(zhì)干細(xì)胞治療兔股骨頭壞死[J].廣東醫(yī)學(xué),2007,28(9):1426-1428.