尿液白細(xì)胞檢查干化學(xué)法與鏡檢分析探討

苑瑞琴，王志剛

（鶴壁市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南鶴壁 458030）

干化學(xué)篩選簡單易行、檢驗(yàn)成本低、便于推廣，可評(píng)估健康、疾病狀態(tài)，尤其對(duì)判斷泌尿系統(tǒng)疾病有不可替代的價(jià)值。干化學(xué)分析法的檢測結(jié)果受到很多因素的影響，檢測紅細(xì)胞及白細(xì)胞存在假陽性和假陰性現(xiàn)象，必須結(jié)合尿液沉渣的顯微鏡檢查結(jié)果進(jìn)行綜合判斷。現(xiàn)將筆者在工作中的幾點(diǎn)體會(huì)總結(jié)如下：

1 干化學(xué)法檢查尿液白細(xì)胞的原理

粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有酯酶，這種酶能水解一種3-羥基吡咯酯類底物，釋放出酚，從而與重氮試劑反應(yīng)生成紫紅色化合物，其顏色深淺與細(xì)胞的多少成正比。此法只能測定粒細(xì)胞，不與淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞反應(yīng)。

2 尿液白細(xì)胞顯微鏡檢查

標(biāo)準(zhǔn)化操作：取尿液10 ml離心，采用水平式離心機(jī)，1 500 r/min，離心5 min。棄除上層尿液，保留0.2 ml尿沉渣，輕輕混勻，取1滴置載玻片上，用18 mm×18 mm或22 mm×22 mm蓋玻片覆蓋后鏡檢。先用低倍鏡（10×10）觀察全片，高倍鏡（10×40）仔細(xì)觀察 10 個(gè)高倍視野（HP），報(bào)告方式：××個(gè)細(xì)胞/HP。尿液白細(xì)胞顯微鏡分析報(bào)告方式中視野平均值與定性結(jié)果的對(duì)應(yīng)關(guān)系：0～4 個(gè)為（-），10～20 個(gè)為（+），21～50 個(gè)為（++），＞50 個(gè)為（+++），滿布視野為（++++）[1]。

3 干化學(xué)法檢測尿液白細(xì)胞的影響因素

3.1 溫度

尿液干化學(xué)檢測在環(huán)境溫度較低的情況下，尿液白細(xì)胞檢測會(huì)出現(xiàn)假陰性或假陽性現(xiàn)象[2]。因?yàn)楦苫瘜W(xué)法的原理是用試條上的試劑與尿液中相關(guān)成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，而化學(xué)反應(yīng)又必須在一定溫度條件下才能進(jìn)行。因此，化驗(yàn)室室溫必須保持在20～25℃，如果是冷藏尿標(biāo)本，取出后應(yīng)恢復(fù)至室溫再進(jìn)行檢測。

3.2 維生素C

根據(jù)Tillman's Reagent原理，維生素C將染料由藍(lán)色還原成紅色，可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

3.3 藥物

尿中四環(huán)素濃度高可出現(xiàn)假陰性結(jié)果[3]。呋喃妥因、慶大霉素、頭孢氨芐和高濃度清蛋白（＞5 g/L）可干擾白細(xì)胞檢驗(yàn)。尿液中污染甲醛或高濃度膽紅素可產(chǎn)生假陽性結(jié)果[4]。

3.4 淋巴細(xì)胞

當(dāng)尿液中以淋巴細(xì)胞為主時(shí)會(huì)產(chǎn)生干化學(xué)法的假陰性結(jié)果[5]。

3.5 標(biāo)本放置時(shí)間

尿液需新鮮，標(biāo)本放置2.5 h后測定原先陰性的結(jié)果變?yōu)殛栃浴?/p>

3.6 紙片暴露時(shí)間

干燥的紙片在空氣中放置3 h無影響，但紙片用蒸餾水濕潤后3～5 min出現(xiàn)假陽性結(jié)果，浸入紙片時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格按照說明書上的規(guī)定。

3.7 其他因素

高比重尿、高糖尿（＞30 g/L）和草酸濃度增高造成白細(xì)胞測定結(jié)果偏低，大量尿蛋白（清蛋白＞5 g/L）及檢測白細(xì)胞的試紙酯酶反應(yīng)減低或抑制，可使白細(xì)胞呈假陰性結(jié)果。

4 尿液干化學(xué)分析與顯微鏡檢查的關(guān)系

檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與規(guī)范的尿沉渣鏡檢是分不開的，在工作中，每一份標(biāo)本都應(yīng)采用這種方法檢查。干化學(xué)與鏡檢的關(guān)系判定可按照以下標(biāo)準(zhǔn)：如果一個(gè)標(biāo)本經(jīng)過兩種方法檢查，干化學(xué)結(jié)果與鏡檢結(jié)果都在正?；虍惓７秶?，說明過篩是正確的；干化學(xué)法異常而鏡檢結(jié)果正常視為假陽性；干化學(xué)結(jié)果正常而鏡檢結(jié)果異常視為假陰性。但實(shí)際工作中很難達(dá)到這一要求，我科根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)1995年制訂的尿液干化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：尿液干化學(xué)檢查結(jié)果白細(xì)胞、紅細(xì)胞、亞硝酸鹽及尿蛋白四項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)陰性（腎病除外），可視為尿內(nèi)有形成分大致在正常范圍內(nèi)，可免除鏡檢[6]，但要注意：①泌尿外科疾病除外；②結(jié)石、腫瘤除外；③干化學(xué)試帶的質(zhì)量、原理及操作有關(guān)事項(xiàng)與過篩的準(zhǔn)確性有關(guān)。通常是在試帶、儀器確定、檢驗(yàn)人員相對(duì)固定的條件下，達(dá)到以上標(biāo)準(zhǔn)可視為尿沉渣成分在正常范圍內(nèi)，可免除進(jìn)一步顯微鏡檢查。通過日常工作總結(jié)，筆者分析了造成兩者結(jié)果不一致的原因，分析儀法（+）而鏡檢法（-）：①由于尿液在膀胱貯存時(shí)間過長或其他原因?qū)е掳准?xì)胞破壞，中性粒細(xì)胞酯酶釋放到尿液中；②尿液中污染甲醛或高濃度膽紅素或使用某些藥物（如呋喃妥因）；③尿液被女性分泌物污染，含有大量扁平上皮細(xì)胞、小圓上皮細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞污染。分析儀法（-）而鏡檢法（+）：①腎移植患者發(fā)生排異反應(yīng)時(shí)，尿中以淋巴細(xì)胞為主，另外尿液中以單核細(xì)胞為主時(shí)也會(huì)出現(xiàn)此結(jié)果；②溫度偏低；③高比重尿、高糖尿；④尿液中含有某些大劑量藥物；⑤大量尿蛋白（清蛋白＞5 g/L）和膽紅素；⑥尿液含大量膿細(xì)胞時(shí)。由于過篩的目的是檢出正常、鏡檢病理性標(biāo)本。因此，過篩的原則是不能出現(xiàn)假陰性結(jié)果，否則就會(huì)漏診。由于干化學(xué)分析易受多種藥物、其他外源性物質(zhì)或人為因素的干擾，且不可避免地有一定的假陰性率。因此，不應(yīng)只看干化學(xué)分析而忽視鏡檢。

[1]王宏.尿液干化學(xué)分析與顯微鏡檢查對(duì)比分析[J].廣東醫(yī)學(xué),2002,23(S1):158.

[2]陳津,王德春,朱忠勇.低溫對(duì)干化學(xué)法測定尿白細(xì)胞的影響[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2006,24(1):33.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:294.

[4]叢玉隆,馬駿龍.尿液干化學(xué)分析與顯微鏡檢查[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1997,20(3):135-137.

[5]杜忠斌,李林青.藥物對(duì)尿液分析儀檢測白細(xì)胞的影響[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2003,18(3):5.

[6]叢玉隆,馬駿龍,李云蓮,等.尿沉渣測定四種方法的參考值的范圍調(diào)查[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1997,20(4):229-231.