白菜類蔬菜轉(zhuǎn)基因研究進(jìn)展

高 麗 崔崇士 屈淑平

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150030）

白菜類蔬菜是十字花科蕓薹屬中最重要的蔬菜作物，全國各地普遍栽培。長(zhǎng)期以來，我國大白菜〔Brassica campestris L.ssp.pekinensis（Lour）Olsson〕主要是通過常規(guī)育種進(jìn)行品種改良，隨著組織培養(yǎng)和DNA重組技術(shù)的建立和不斷完善，現(xiàn)代生物技術(shù)在許多作物的種質(zhì)創(chuàng)新和新品種選育中日益得到廣泛應(yīng)用。自O(shè)oms等（1985）利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法在甘藍(lán)型油菜上獲得了第1株蕓薹屬的轉(zhuǎn)基因作物以來，蕓薹屬作物的遺傳轉(zhuǎn)化獲得了很大成功。白菜類蔬菜由于攜帶不易再生的 AA基因組型（Palmer，1992），因此是蕓薹屬作物中最難轉(zhuǎn)化的種，但是隨著轉(zhuǎn)化技術(shù)的發(fā)展，白菜類蔬菜的遺傳轉(zhuǎn)化也獲得了較大進(jìn)步。筆者主要對(duì)大白菜、普通白菜（Brassica campestris L.var.communis Tsen et Lee）和菜薹（Brassica campestris L.var.utilis Tsen et Lee）3個(gè)種的轉(zhuǎn)基因研究進(jìn)展進(jìn)行了概述。

1 導(dǎo)入的外源基因和轉(zhuǎn)基因植株的獲得

目前，在白菜類蔬菜上轉(zhuǎn)化的目的基因種類越來越多，導(dǎo)入白菜類蔬菜的基因按功能來分主要有抗蟲基因、抗病基因、抗逆基因、抗除草劑基因、雄性不育基因、篩選基因和品質(zhì)改良基因等。

1.1 抗蟲基因

白菜類蔬菜的害蟲主要有鱗翅目的菜青蟲、小菜蛾。目前，對(duì)抗蟲基因的克隆和轉(zhuǎn)化的研究最多。已用于和正用于抗蟲白菜類蔬菜培育的基因主要有外源凝集素基因（Leetin，Lee）、蛋白酶抑制劑基因（Proteinase inhibitor，Pin）和外源毒素基因。

外源凝集素存在于植物中，它是能夠與多糖類復(fù)合物上的糖基結(jié)合的蛋白質(zhì)。其抗蟲原理是與昆蟲消化道中腸道周圍細(xì)胞膜上的糖蛋白結(jié)合，從而影響營養(yǎng)的吸收，達(dá)到殺蟲目的。楊廣東等（2003）將雪花蓮凝集素基因gna轉(zhuǎn)入大白菜，抗蚜性試驗(yàn)表明，與對(duì)照相比，轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)出明顯的對(duì)蚜蟲生長(zhǎng)的抑制作用，平均能抑制蚜蟲密度達(dá) 20%。張揚(yáng)勇等（2003）將gna基因轉(zhuǎn)入菜薹45天油青菜心，經(jīng)檢測(cè)表明外源基因已經(jīng)整合到菜薹基因組中。鄧智年等（2007）將帶有核基質(zhì)結(jié)合區(qū)（Matrix Attachment Region，MAR）序列的野莧菜凝集素（Amaranthus viridis L.agglutinin，AVA）基因轉(zhuǎn)入大白菜豐順，結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因大白菜對(duì)桃蚜的平均抑制率達(dá)到55.8 %。

蛋白酶抑制劑是一類廣泛存在于植物中的天然抗蟲蛋白質(zhì)。最常用的蛋白酶抑制劑有豇豆胰蛋白酶抑制劑（Cowpea trypsin inhibitor，CpTI）、馬鈴薯蛋白酶抑制劑（Potato inhitor，Pin）和慈姑蛋白酶抑制劑（Arrowhead Proteinase inhibitor，API）。

豇豆胰蛋白酶抑制劑是一類由80個(gè)左右的氨基酸殘基構(gòu)成的小分子多肽，屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑類。它的抗蟲譜廣泛，對(duì)包括鱗翅目、鞘翅目以及直翅目的許多昆蟲都有毒性。佘健明等（2000）將cpti基因轉(zhuǎn)入普通白菜中腳黑葉和矮腳黑葉，通過分子檢測(cè)證實(shí)抗蟲基因已被整合到轉(zhuǎn)化植株的基因組，并能在自交后代植株中遺傳傳遞。為了提高CpTI蛋白的含量，楊廣東等（2002）在 cpti基因上添加內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留信號(hào) KEDL編碼序列，構(gòu)成了修飾的 cpti基因（Signal-CpTI-KEDL，即sck）并將其轉(zhuǎn)入大白菜自交系GP-11和一代雜種中白4號(hào)?？瓜x性鑒定證明，轉(zhuǎn)基因植株對(duì)菜青蟲具有一定抗性。

馬鈴薯蛋白酶抑制劑屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑類，抗蟲譜與CpTI相似。Pin可以分為2種：PinⅠ和 PinⅡ。PinⅠ的成熟肽只能抑制胰凝乳蛋白酶；PinⅡ成熟肽可分別抑制胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶，PinⅡ基因是一類損傷誘導(dǎo)表達(dá)型基因，可以利用它來調(diào)控其他外源基因，達(dá)到定時(shí)表達(dá)的目的（張軍杰，2002）。所以 PinⅡ比 PinⅠ更有應(yīng)用價(jià)值。張軍杰（2002）將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑（PinⅡ）基因分別轉(zhuǎn)入大白菜北京80號(hào)、福山大包頭、97-9（2）、小雜66號(hào)、小雜3號(hào)、小雜5號(hào)、小雜8號(hào)、小雜12號(hào)、小雜13號(hào)和菜薹49菜心，最終獲得了5株轉(zhuǎn)基因大白菜和41株抗性菜薹，大白菜表現(xiàn)出抑蟲效應(yīng)。

慈姑蛋白酶抑制劑是一種可抑制多種蛋白酶的抑制劑，具有比活力高、穩(wěn)定、抗蟲譜廣泛的特點(diǎn)，也是抗蟲基因工程中常用的材料。張智奇等（1999）首次將慈姑蛋白酶抑制劑基因轉(zhuǎn)入普通白菜浦東矮箕菜和矮抗青，獲得了轉(zhuǎn)基因植株。飼蟲試驗(yàn)表明，轉(zhuǎn)基因植株對(duì)鱗翅目害蟲菜青蟲的生長(zhǎng)發(fā)育有一定的抑制作用。

蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringicnsis）的毒蛋白基因是目前植物基因工程應(yīng)用最為廣泛的抗蟲基因。因?yàn)榕c其他抗蟲基因相比，在同等表達(dá)量之下，Bt類基因產(chǎn)物的抗蟲能力最強(qiáng)。Cho等（2001）將人工合成的蘇云金芽孢桿菌殺蟲晶體蛋白基因 cry1C轉(zhuǎn)入大白菜，結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因植株對(duì)小菜蛾的抗性增強(qiáng)。

蜘蛛殺蟲肽（SIP）屬于一種昆蟲毒素，具有專一性和毒性大的特點(diǎn)。自 1995年開始，陳章良先生領(lǐng)導(dǎo)的研究人員人工合成了能編碼具有37個(gè)氨基酸殘基的蜘蛛殺蟲肽的基因，并將其成功導(dǎo)入煙草（蔣紅 等，1995），獲得的3株轉(zhuǎn)基因煙草對(duì)棉鈴蟲的殺蟲率可達(dá)30%～45 %，并能顯著抑制昆蟲蛻皮和生長(zhǎng)發(fā)育，表現(xiàn)出明顯的抗蟲作用（蔣紅 等，1996）。

有研究表明，以轉(zhuǎn)抗蟲基因植物為食的害蟲有可能逐步對(duì)抗蟲蛋白產(chǎn)生抗性（李洪山，2007；丁如賢，2007）。由此，研究者提出了通過導(dǎo)入2種以上具不同抗性機(jī)制基因來延緩害蟲產(chǎn)生抗性的策略，其效果在棉花（郭三堆和崔洪志，1998）及煙草（王志斌和郭三堆，1999）轉(zhuǎn)基因作物上已得到驗(yàn)證。曹傳增（2003）、徐恒戩（2004）分別將蜘蛛殺蟲蛋白SIP和馬鈴薯蛋白酶抑制劑PinⅡ基因同時(shí)轉(zhuǎn)入菜薹49菜心，經(jīng)檢測(cè)證實(shí)，2種基因已全部整合到了轉(zhuǎn)基因白菜的基因組中。

1.2 抗病基因

在植物抗病毒基因工程中，外殼蛋白（CP）基因策略是最早獲得成功，也是至今應(yīng)用最為廣泛的一種策略。這一策略已在10個(gè)屬逾30種病毒上獲得成功（朱常香 等，2001）。白菜類蔬菜最早見報(bào)道的轉(zhuǎn)入基因就是此類基因。Jun等（1995）將番茄花葉病毒 L基因衣殼蛋白（TMV-L-CP）基因轉(zhuǎn)入Brassica campestris ssp.ekinensis cv.Spring Flavor，獲得了6株轉(zhuǎn)基因植株，該基因得到了表達(dá)并在后代中穩(wěn)定遺傳。蕪菁花葉病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）是馬鈴薯Y病毒組的一個(gè)成員，是引起白菜病毒病的主要病原。朱常香等（2001）將蕪菁花葉病毒的 CP（TuMV-CP）基因?qū)氪蟀撞烁Ｉ桨^，獲得轉(zhuǎn)化植株，抗病性測(cè)定結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因植株具有明顯的抗病毒侵染能力。馬偉（2002）將 TuMV-CP基因轉(zhuǎn)入大白菜二牛心，經(jīng)病毒接種試驗(yàn)表明：轉(zhuǎn)基因Tl植株發(fā)病率和病情指數(shù)明顯低于對(duì)照品種，但各個(gè)單株病情指數(shù)差別較大，且隨著時(shí)間的增加，抗病性有所減弱。萵苣花葉病毒（Lettuce mosaic potyvirus，LMV）也屬于馬鈴薯Y病毒組的一個(gè)種，研究表明，LMV-CP基因具有廣譜抗性，且異源抗性比同源抗性更有效。成細(xì)華（2000）將 LMV-CP基因轉(zhuǎn)入到結(jié)球白菜中，獲得了 3株轉(zhuǎn)基因植株。此外，張廣輝等（1998）將花椰菜花葉病毒（CaMV）基因轉(zhuǎn)入大白菜豐抗70，經(jīng)抗病性鑒定表明：48.08 %的轉(zhuǎn)基因植株對(duì)CaMV強(qiáng)株系Cabb B-JI具有較強(qiáng)的抗性，51.92 %的轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)為敏感（鞏振輝等，2001）。

在植物抗病毒基因工程路線上，利用植物病毒復(fù)制酶基因也是一個(gè)很有前途的方法。于占東等（2006）將蕪菁花葉病毒復(fù)制酶（TuMV-Nib）反義基因轉(zhuǎn)入大白菜福山包頭，經(jīng)檢測(cè)表明，TuMV-Nib反義基因不僅整合到大白菜基因組中，而且獲得表達(dá)，轉(zhuǎn)基因植株的接種測(cè)試結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因植株具有明顯的抗病特性。

Wang等（2002）將抗菌肽基因?qū)氪蟀撞耍@得轉(zhuǎn)基因植株，抗病性測(cè)試表明轉(zhuǎn)基因植株對(duì)軟腐病表現(xiàn)出明顯的抗性。

為了獲得廣譜抗性，也有研究者將多價(jià)基因轉(zhuǎn)到白菜類蔬菜中。陳敏敏（2007）將融合基因InBING（由AFP2、TAP、Metch和BuforinⅡ 4個(gè)基因構(gòu)成）轉(zhuǎn)入普通白菜蘇州青。其中AFP2是蘿卜的抗真菌基因，TAP亦為抗真菌基因，Metch為來自果蠅的富含Pro的小肽基因，它同時(shí)抗真菌和細(xì)菌，BuforinⅡ?yàn)闅W洲蟾蜍的抗菌肽基因。經(jīng)檢測(cè)該融合基因已經(jīng)整合到植物基因組中。

此外，Zhao等（2006）將抗蟲的豇豆胰蛋白酶抑制劑基因和抗病的抗菌肽基因構(gòu)成雙價(jià)基因轉(zhuǎn)入大白菜，從而獲得同時(shí)具有抗病性和抗蟲性的轉(zhuǎn)基因大白菜。

1.3 抗逆基因

白菜類蔬菜生長(zhǎng)經(jīng)常面臨低溫、高鹽和缺水等環(huán)境脅迫，因此逆境也成為影響白菜類蔬菜產(chǎn)量的一大因素。近年來，一些研究者開始考慮將抗脅迫基因轉(zhuǎn)入白菜類蔬菜。有研究表明，植物在受到環(huán)境脅迫時(shí)，晚期胚胎發(fā)生富集（LEA）基因，會(huì)表達(dá)并增強(qiáng)植株的抗逆性。Park等（2005）將 LEA基因轉(zhuǎn)入大白菜，增強(qiáng)了大白菜對(duì)鹽和干旱的抗性。Tseng等（2007）將玉米Cu/Zn超氧化物歧化酶基因和過氧化氫酶基因轉(zhuǎn)入大白菜Tropical Pride的葉綠體，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因植株的抗鹽和抗SO2脅迫的能力增強(qiáng)。

1.4 雄性不育基因

雄性不育系是雜種優(yōu)勢(shì)利用的最理想方式，雄性不育系的選育一直深受重視。而雄性不育與花粉發(fā)育相關(guān)。余沛濤等（2000）將雄性不育基因Barnase（一種嵌合的細(xì)胞核編碼RNA酶基因）與 TA29啟動(dòng)子連鎖，轉(zhuǎn)入大白菜，獲得轉(zhuǎn)基因植株。對(duì)轉(zhuǎn)化苗進(jìn)行解剖鏡觀察發(fā)現(xiàn)花的發(fā)育較正常，但弱小，有時(shí)不能展開，雄蕊個(gè)別發(fā)育較差，花藥中花粉發(fā)育不完全，有些花藥中沒有花粉。劉樂承（2006）將花粉發(fā)育相關(guān)基因轉(zhuǎn)入菜薹油青45菜心，獲得了148株轉(zhuǎn)基因植株株系，利用RNA干涉基因沉默技術(shù)可導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因植株的部分花粉敗育。范愛麗等（2008）將胞質(zhì)雄性不育系相關(guān)線粒體基因CMS7311-orf 224導(dǎo)入大白菜，獲得2株大白菜轉(zhuǎn)基因植株。

1.5 抗除草劑基因

bar基因編碼草丁膦（phosphinotricin，PPT）乙酰基轉(zhuǎn)移酶的基因，它能將PPT轉(zhuǎn)化為無毒的乙?；问?，從而解除PPT的毒害。目前，已有很多成功獲得轉(zhuǎn)bar基因的例子。例如，劉凡等（1998）將 bar基因轉(zhuǎn)入大白菜小孢子胚狀體，獲得 4株抗除草劑植株；張軍杰（2002）將 bar基因轉(zhuǎn)入菜薹49菜心，獲得了9株轉(zhuǎn)基因植株；曹傳增（2003）將bar基因轉(zhuǎn)入菜薹49菜心，獲得5株轉(zhuǎn)基因植株。

1.6 篩選基因

篩選基因的表達(dá)產(chǎn)物容易檢測(cè)，便于追蹤基因的表達(dá)過程和篩選被轉(zhuǎn)化細(xì)胞。從一定意義上來講，bar基因也屬于一種篩選基因。目前在植物表達(dá)載體中使用最多的篩選基因除了bar基因外，還有抗生素抗性基因和 GUS基因。Christey等（1997）將新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶（neomycin phosphotransferase Ⅱ，NOS-NPTⅡ-NOS）基因轉(zhuǎn)入大白菜，獲得了卡那抗性的大白菜植株。GUS基因編碼β-葡萄糖苷酸酶（β-glucuronidase，GUS），該酶是一種水解酶，能催化許多編碼β-葡萄糖苷酯類物質(zhì)的水解。當(dāng)?shù)孜?X-Gluc進(jìn)入被測(cè)組織，若該組織發(fā)生了 GUS基因轉(zhuǎn)化，表達(dá)生成GUS酶，在適宜條件下，該酶可將X-Gluc水解成藍(lán)色物質(zhì)，后經(jīng)氧化形成一種肉眼可見的靛藍(lán)色物質(zhì)，沉積在葉片具有GUS活性的部位或位點(diǎn)。Zhang等（2000）用根癌農(nóng)桿菌EHA101介導(dǎo)GUS基因轉(zhuǎn)入大白菜。方斌（2001）將GUS基因轉(zhuǎn)入大白菜浙江早熟和50天快菜，分別獲得5株和4株轉(zhuǎn)基因植株，并通過鑒定。王火旭等（2001）將gusA基因轉(zhuǎn)入大白菜自交系A(chǔ)B-81，獲得了轉(zhuǎn)基因植株。

另外，Min等（2007）將編碼磷酸甘露糖異構(gòu)酶的 pmi基因轉(zhuǎn)入大白菜作為篩選基因，從而為大白菜轉(zhuǎn)基因提供了一條新的篩選方法。

1.7 改良品質(zhì)

轉(zhuǎn)化改良白菜類蔬菜品質(zhì)的基因報(bào)道得很少。目前，轉(zhuǎn)入白菜類蔬菜的品質(zhì)改良基因有葉球發(fā)育相關(guān)基因（BcpLH）。薛萬新（2001）將BcpLH正義基因和BcpLH反義基因分別轉(zhuǎn)入普通白菜上海黑葉四月慢和大白菜Da508，有4株被確定有外源基因的導(dǎo)入。轉(zhuǎn)BcpLH反義基因大白菜出現(xiàn)先期抽薹變異，轉(zhuǎn)BcpLH正義基因普通白菜無明顯表型變化。

2 轉(zhuǎn)化方法

2.1 借助組織培養(yǎng)的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是最成熟、最理想的雙子葉植株轉(zhuǎn)基因方法，目前已獲得成功的轉(zhuǎn)化植物中有80%是采用這種方法。利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化白菜類蔬菜的例子已有很多，利用得最多的是章魚堿型根癌農(nóng)桿菌 LBA4404，但是農(nóng)桿菌侵染外植體后，會(huì)大大降低外植體的分化能力，從而影響轉(zhuǎn)化頻率。

2.2 其他轉(zhuǎn)化方法

針對(duì)白菜類蔬菜難分化這一特點(diǎn)，人們開始將研究轉(zhuǎn)向那些不借助組織培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化方法。近年來，許多非組織培養(yǎng)途徑的遺傳轉(zhuǎn)化方法在白菜類蔬菜上進(jìn)行了嘗試并取得了成功。薛萬新（2001）分別采用原位真空抽濾法、子房注射法、種子共培養(yǎng)法、花粉管通道法、蘸花法、噴花法、種子抽濾法、滴涂法將目的基因轉(zhuǎn)入大白菜和普通白菜。其中，在普通白菜的轉(zhuǎn)化中，只有原位真空抽濾法和子房注射法得到了抗性苗，比率分別為0.77 %和1.8 %；而在大白菜的轉(zhuǎn)化中，只有原位真空抽濾法和花粉管通道法得到了抗性苗，兩者的比率分別為0.63 %和0.067 %，從而可以看出真空抽濾法是對(duì)大白菜和普通白菜都有效的方法。而真空滲入法是迄今為止所用得最多的不依賴于組織培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化方法。劉凡（2004）用真空滲入法將目的基因轉(zhuǎn)入菜薹49菜心，不同處理得到的種子轉(zhuǎn)化率為0.032 %～0.267 %，植株轉(zhuǎn)化率為3.45 %～80.00%，明顯高于種子轉(zhuǎn)化率，影響這些轉(zhuǎn)化率的因素主要是處理的季節(jié)和農(nóng)桿菌的類型。徐恒戩（2004）用真空滲入法轉(zhuǎn)化大白菜，得到的種子轉(zhuǎn)化率為0～0.0065 %，植株轉(zhuǎn)化率為0～4.6 %，而其影響轉(zhuǎn)化率的因素為大白菜的品種和植株的生長(zhǎng)狀態(tài)。曹傳增（2003）采用真空滲入和花序浸漬兩種方法轉(zhuǎn)化菜薹49菜心，其中真空滲入法的種子轉(zhuǎn)化率為0～0.236 %，植株轉(zhuǎn)化率為0～13.64 %。花序浸漬法得到的種子轉(zhuǎn)化率為0.179 %，植株轉(zhuǎn)化率為3.45 %。目前，這些非組織培養(yǎng)途徑的遺傳轉(zhuǎn)化方法的轉(zhuǎn)化條件尚不成熟，還沒有得到大規(guī)模的應(yīng)用。

3 存在問題

3.1 轉(zhuǎn)基因技術(shù)問題

白菜類蔬菜的遺傳轉(zhuǎn)化雖取得了一些進(jìn)展，但還存在著很多問題。由于白菜類蔬菜再生率低，受基因型影響大，使得白菜類蔬菜的轉(zhuǎn)化效率很低。因此建立高頻再生體系一直是研究者探索的重要課題。

3.2 轉(zhuǎn)基因檢測(cè)問題

轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜目的基因的檢測(cè)系統(tǒng)不健全且檢測(cè)內(nèi)容不完全。目前所做的檢測(cè)基本上都停留在基因整合階段，絕大多數(shù)都進(jìn)行了 PCR檢測(cè)，PCR-Southern和 Southern檢測(cè)比率分別為37.93 %和55.17 %。PCR檢測(cè)的假陽性率較高，不能有效說明目的基因已整合到植物基因組中，相應(yīng)的PCR-Southern檢測(cè)也只能作為一個(gè)佐證，不能像核基因組DNA的Southern雜交那樣成為直接證據(jù)。由于在轉(zhuǎn)基因研究中，基因沉默是一個(gè)重要問題，因此對(duì)基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的檢測(cè)是至關(guān)重要的。但是使用了檢測(cè)基因轉(zhuǎn)錄水平的RT-PCR和Northern的比率只有20.69 %和27.59 %，國內(nèi)研究基本使用RT-PCR檢測(cè)，而絕大多數(shù)國外發(fā)表的文獻(xiàn)中均采用Northern方法。對(duì)基因翻譯的檢測(cè)就更少了，其中Western雜交僅見一例（Jun et al.，1995），采用ELISA的有兩篇（朱常香 等，2001；于占東 等，2006）。由此可見轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜的檢測(cè)還存在著很多問題，相當(dāng)一部分轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜還需進(jìn)一步確定。

3.3 轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜安全性問題

隨著轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜研究的進(jìn)一步深入發(fā)展，轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜的安全性問題也日益得到人們的關(guān)注。轉(zhuǎn)基因的安全性包含了食用安全性和環(huán)境安全性。

3.3.1 食用安全性 大多數(shù)轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜轉(zhuǎn)入的都是抗蟲和抗病等有毒基因，這些轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜中會(huì)包含有毒物質(zhì)。這些物質(zhì)會(huì)不會(huì)通過長(zhǎng)時(shí)間量的積累對(duì)人體的健康造成影響，目前還無法判斷。但是，目前在轉(zhuǎn)基因油菜籽中已發(fā)現(xiàn)對(duì)人體有害的成分（Witt et al.，1991）。轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜的毒性雖未見報(bào)導(dǎo)，但其食用安全性還有待進(jìn)一步研究。

3.3.2 環(huán)境安全性 植物容易與它的近緣種甚至其他種之間發(fā)生基因漂移現(xiàn)象。如果所轉(zhuǎn)入的抗病蟲或抗除草劑基因向其他的近緣種雜草或者是其他物種發(fā)生漂移，將會(huì)產(chǎn)生超級(jí)雜草、超級(jí)病菌。因此研究轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜的基因漂移現(xiàn)象是非常必要的。劉凡（2004）將轉(zhuǎn) bar基因大白菜分別與諸葛菜、芝麻菜、野芥菜、黑芥、埃塞俄比亞芥等9種十字花科常見雜草及大白菜、蕪菁、白菜型油菜、芥菜、甘藍(lán)型油菜、蘿卜、結(jié)球甘藍(lán)等7個(gè)栽培種進(jìn)行人工授粉雜交試驗(yàn)，結(jié)果表明，bar基因只侵入了雜草的黑芥，對(duì)于蕓薹屬中的幾種蔬菜，如白菜型油菜、大白菜、蕪菁，入侵率達(dá)100%；甘藍(lán)型油菜和芥菜入侵率分別為9 %和0.03 %～6.70%；bar基因向結(jié)球甘藍(lán)和蘿卜中的入侵率為0。由此可見，轉(zhuǎn)基因大白菜還是有向其他近緣種間發(fā)生基因漂移的可能。

4 展望

綜上所述，轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜的研究近十年來雖取得一定成就，但目前尚不成熟。再生困難是制約轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜發(fā)展的重要因素，相信未來一段時(shí)間對(duì)白菜類蔬菜轉(zhuǎn)基因的研究重點(diǎn)仍會(huì)停留在建立高頻再生體系和摸索其他有效方法上。此外，轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜的基因漂移和對(duì)其他非靶生物的影響以及對(duì)人類健康有無影響也會(huì)是熱點(diǎn)研究問題。而這些問題將會(huì)成為轉(zhuǎn)基因白菜類蔬菜研究的動(dòng)力，推動(dòng)其向更成熟更完善的方向發(fā)展。

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