人腦膠質(zhì)瘤中PTEN、MMP9蛋白的表達(dá)及意義

吳紅芳

南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校病理教研室（473000）

膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)最常見的腫瘤,占顱內(nèi)腫瘤的40%～50 %[1]。膠質(zhì)瘤的病因尚不十分清楚，有報道稱膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展與多種基因異常有關(guān)。本文通過免疫組織化學(xué)方法檢測PTEN和MMP9蛋白在正常腦組織和膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，探討PTEN和MMP9基因異常與腦膠質(zhì)瘤的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集南陽醫(yī)專第一附屬醫(yī)院病理科2003年7月～2010年5月手術(shù)切除膠質(zhì)瘤石蠟標(biāo)本53例,其中男34例、女19例,患者年齡8～65歲,平均年齡（42.3±16.4）歲。根據(jù)2000年 WHO神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的分類標(biāo)準(zhǔn)對膠質(zhì)瘤進(jìn)行組織學(xué)的分類和分級： Ⅰ級 9例，Ⅱ級19例，Ⅲ 級 18例，Ⅳ級 7例。將Ⅰ～Ⅱ級歸為低度惡性，Ⅲ～Ⅳ級歸為高度惡性，另取 12例腦外傷內(nèi)減壓術(shù)中切除的腦組織標(biāo)本作為正常對照。

1.2 免疫組化染色

鼠抗人PTEN單克隆抗體及鼠抗人MMP9單克隆抗體均為Santa Cruz公司產(chǎn)品。S-P試劑盒及DAB顯色劑由北京中杉金橋公司提供,染色過程按試劑盒操作。陰性對照用PBS代替Ⅰ抗。

1.3 結(jié)果判定

PTEN和 MMP9蛋白染色陽性反應(yīng)信號呈棕黃色細(xì)小顆粒,定位于胞質(zhì)。每例隨機(jī)選 10個高倍視野，計數(shù) 1000個細(xì)胞,計算陽性細(xì)胞數(shù)的百分比。陽性細(xì)胞 ≥10%者為陽性病例；陽性細(xì)胞 ＜10%者均按陰性病例處理。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行χ2檢驗及相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 PTEN蛋白在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)

正常腦組織中均有PTEN蛋白表達(dá)，腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為63.3%，表達(dá)有顯著性差異（P＜0.01）；低度惡性組的陽性表達(dá)率為85.7%，高度惡性組的陽性表達(dá)率為36.0%,兩組間的表達(dá)有顯著性差異（P＜0.01）。

2.2 MMP9蛋白在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)

正常腦組織中均無MMP9蛋白表達(dá)，腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為49.1%，表達(dá)有顯著性差異（P＜0.01）；高分化組的陽性表達(dá)率為46.4%，低分化組的陽性表達(dá)率為52.0%,兩組間的表達(dá)無顯著性差異（P＞0.05）。

2.3 PTEN、MMP9蛋白在膠質(zhì)瘤中表達(dá)的相關(guān)性

膠質(zhì)瘤中PTEN和MMP9蛋白均不表達(dá)的1例，均表達(dá)的7例，PTEN蛋白表達(dá)而MMP9蛋白不表達(dá)的26例，PTEN蛋白不表達(dá)而MMP9蛋白表達(dá)的19例；膠質(zhì)瘤中PTEN和MMP9蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（ r= - 0.483,P＜0.01）。

3 討 論

PTEN基因被認(rèn)為是繼p53基因之后發(fā)現(xiàn)的又一重要抑癌基因[2]。PTEN基因的失活突變可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，惡性程度及侵襲性密切相關(guān)。本研究中膠質(zhì)細(xì)胞瘤PTEN蛋白陽性表達(dá)率顯著降低，低度惡性組陽性率顯著高于高度惡性組有顯著性差異。結(jié)果提示人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤中存在PTEN蛋白表達(dá)缺失，惡性程度越高缺失越明顯，PTEN蛋白的表達(dá)情況可做為腦膠質(zhì)瘤惡性程度的判定指標(biāo)之一?；|(zhì)金屬蛋白酶MMPs是一種與腫瘤的惡性行為和浸潤性生長密切相關(guān)的物質(zhì)。MMP9是基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員之一，可降解細(xì)胞外多種基質(zhì)成分,在腫瘤浸潤、 轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮極其重要的作用[3-4]。發(fā)現(xiàn)MMP9蛋白在正常腦組織和腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)有顯著性差異；低度惡性組組與高度惡性組中的陽性表達(dá)無顯著性差異。提示人腦膠質(zhì)瘤中存在MMPs的過度激活，可能與腦膠質(zhì)瘤的易復(fù)發(fā)及浸潤性生長有關(guān)，與膠質(zhì)瘤的惡性程度無關(guān)。

此外，抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤、轉(zhuǎn)移是 PTEN基因的重要生物學(xué)功能之一 。本研究顯示，膠質(zhì)瘤中PTEN和MMP9蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，說明PTEN基因表達(dá)的減少或缺失，可能會誘導(dǎo)MMP9的過度激活，從而導(dǎo)致腦膠質(zhì)瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。因此，通過免疫組化方法檢測人腦膠質(zhì)瘤中PTEN蛋白的表達(dá)情況，可作為判斷膠質(zhì)瘤的惡性程度及是否易轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的重要參考指標(biāo)之一。

[1]吳在德,吳肇漢.外科學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2004：281-283.

[2]刁紅宇,吳永剛.PTEN蛋白在人腦星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2006,35(5)：532-533.

[3]孫榮輝,徐國政.VEGF、MMP9在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其意義[J].中國臨床神經(jīng)外科雜志,2010,15(5)：273-277.

[4]李寶月,劉政操,姚琦等.神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對血管新生作用及其血管生成素-2表達(dá)的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2008,5(13)：14-16.