深裂竹根七化學(xué)成分研究

王冠元， 聶鳳禔

(1.天津市腫瘤醫(yī)院/天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院 藥劑科，天津300060;2.河北醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，石家莊050017)

深裂竹根七Disporopsis pernyi(Hua)Diels為百合科竹根七屬植物，于我國云南，貴州，四川，廣西等大多數(shù)地區(qū)均有分布，是一種民間常用中藥，具有養(yǎng)陰潤肺、生津止渴、祛風(fēng)除濕、清熱解毒功效，多用于虛汗多咳、產(chǎn)后虛弱、月經(jīng)不調(diào)等癥，有的還用于治療感冒扁桃體炎、眼結(jié)膜炎等癥。《貴州草藥》中記載該藥也可治療勞傷風(fēng)濕骨痛、夜間多尿或遺精腰痛等。該屬植物化學(xué)成分研究報(bào)道較少，有文獻(xiàn)報(bào)道該植物根莖中分離并鑒定了多個(gè)新的甾體皂苷類成分［1－2］。

筆者從深裂竹根七的乙醇提取物中運(yùn)用各種色譜技術(shù)和化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定手段，分離并鑒定了10個(gè)化合物結(jié)構(gòu)，分別為槲皮素(Ⅰ)，槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖苷(Ⅱ)，木犀草素(Ⅲ)，蘆丁(Ⅳ)，β－谷甾醇(Ⅴ)，白樺脂酸(Ⅵ)，水楊酸(Ⅶ)，香草酸(Ⅷ)，胡蘿卜苷(Ⅸ)，腺嘌呤核苷(Ⅹ)，除化合物Ⅸ以外其它化合物均是首次從該植物中得到。

1 儀器與材料

Bruker Avance DRX和Varian INOVA 500 FT核磁共振儀;熔點(diǎn)測(cè)定儀XT4A數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀(溫度未校正);柱色譜用硅膠及薄層色譜用硅膠GF254均為青島海洋化工廠產(chǎn)品;D101型大孔吸附樹脂為天津市海光化工有限公司產(chǎn)品;柱層析用聚酰胺及薄層色譜用聚酰胺為浙江臺(tái)州路橋四甲生化塑料廠產(chǎn)品;葡聚糖凝膠Sephadex LH－20為Pharmacia產(chǎn)品;所用試劑均為分析純和色譜純。深裂竹根七于2007年8月采自云南省蒙自縣，經(jīng)中國科學(xué)院昆明植物研究所雷立公研究員鑒定為Disporopsis pernyi干燥地上部分。

2 提取與分離

深裂竹根七干燥的地上部分共5.7 kg，粉碎后用95%乙醇浸泡，之后再分別用95%乙醇回流提取2次，60%乙醇回流提取1次。乙醇提取液濃縮至無醇味后，加適量水混懸，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。石油醚萃取物(10.7 g)經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚－乙酸乙酯梯度洗脫，再經(jīng)重結(jié)晶純化，得到化合物Ⅴ;氯仿萃取物(17.0 g)通過硅膠柱層析，二氯甲烷－丙酮梯度洗脫，繼而運(yùn)用重結(jié)晶和再次硅膠柱層析得到化合物Ⅵ;乙酸乙酯萃取物(210.6 g)首先采用硅膠柱層析，氯仿－甲醇－水系統(tǒng)梯度洗脫，得到72個(gè)流份:流份4～27經(jīng)硅膠柱層析以氯仿－乙酸乙酯(85∶15)洗脫，再經(jīng)過Sephadex LH－20柱色譜和重結(jié)晶純化得到化合物Ⅰ和Ⅱ，流份31～50經(jīng)硅膠柱層析以氯仿－甲醇梯度洗脫，再用聚酰胺柱層析以氯仿－甲醇(87∶13)洗脫，最后經(jīng)過Sephadex LH－20柱色譜純化得到化合物Ⅲ和Ⅸ，流份54～66經(jīng)硅膠柱層析以氯仿－甲醇(8∶2)洗脫，再經(jīng)過重結(jié)晶得到化合物Ⅶ和Ⅷ;正丁醇萃取物(103.4 g)經(jīng)D101大孔吸附樹脂柱，依次用水、30%乙醇、50%乙醇、70%和95%乙醇洗脫，50%乙醇洗脫物(11.8 g)經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，得到24個(gè)流份，流份9～11經(jīng)過Sephadex LH－20柱色譜和重結(jié)晶分離純化，得到化合物Ⅹ，流份14～20經(jīng)過聚酰胺柱層析以氯仿－甲醇(85∶15)洗脫，得到化合物Ⅳ。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物Ⅰ:黃色針晶(二氯甲烷)，mp＞300℃。1H－NMR(DMSO－d6，500MHz)δ:12.22(1H，s，5－OH)，10.37(1H，s，7－OH)，7.51(1H，d，J=2.0 Hz，2′－H)，7.48(1H，dd，J=2.0，8.4 Hz，6′－H)，6.79(1H，d，J=8.4 Hz，5′－H)，6.32(1H，d，J=2.0 Hz，8－H)，6.08(1H，d，J=2.0 Hz，6－H);13C－NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:147.7(C－2)，135.6(C－3)，175.9(C－4)，156.3(C－5)，98.1(C－6)，163.8(C－7)，93.3(C－8)，160.6(C－9)，102.9(C－10)，121.9(C－1′)，115.0(C－2′)，145.0(C－3′)，147.6(C－4′)，115.5(C－5′)，119.9(C－6′)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［3］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅰ為槲皮素(quercetin)。

化合物Ⅱ:黃色短蔟狀針晶(甲醇)，mp 170～171 ℃。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:7.55(1H，dd，J=1.8，8.5 Hz，6′－H)，7.53(1H，d，J=1.8 Hz，2′－H)，6.82(1H，d，J=8.5 Hz，5′－H)，6.32(1H，d，J=2.0 Hz，8－H)，6.11(1H，d，J=2.0 Hz，6－H)，5.27(1H，d，J=7.5 Hz，Glc H－1);13C－NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:155.7(C－2)，133.0(C－3)，176.1(C－4)，160.8(C－5)，98.1(C－6)，163.8(C－7)，93.5(C－8)，155.9(C－9)，103.2(C－10)，121.3(C－1′)，115.7(C－2′)，145.1(C－3′)，148.0(C－4′)，115.8(C－5′)，120.6(C－6′)，101.7(C－1″)，74.0(C－2″)，75.8(C－3″)，69.9(C－4″)，77.4(C－5″)，60.6(C－6″)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅱ?yàn)殚纹に兀?－O－β－D－吡喃葡萄糖苷 (quercetin 3－O－β－D－glucopyranoside)。

化合物Ⅲ:黃色粉末(氯仿)，mp＞300℃。1HNMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:12.90(1H，s，5－OH)，7.49(1H，d，J=2.0 Hz，2′－H)，7.38(1H，m，6′－H)，6.87(1H，d，J=8.5 Hz，5′－H)，6.61(1H，s，3－H)，6.35(1H，d，J=2.3 Hz，8－H)，6.17(1H，d，J=2.3 Hz，6－H)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅲ為木犀草素(luteolin)。

化合物Ⅳ:黃色粉末(甲醇)，mp 176～178℃。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:7.58(overlapped，6′－H)，7.46(1H，br s，2′－H)，6.80(1H，d，J=8.5 Hz，5′－H)，6.33(1H，br s，8－H)，6.15(1H，br s，6－H)，5.29(1H，d，J=6.5 Hz，Glc H－1)，4.31(1H，s，Rha H－1)，0.98(3H，d，J=6.0 Hz，Rha－CH3);13C－NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:156.5(C－2)，135.0(C－3)，177.9(C－4)，162.7(C－5)，98.9(C－6)，165.2(C－7)，94.4(C－8)，159.0(C－9)，105.5(C－10)，122.4(C－1′)，115.8(C－2′)，149.0(C－3′)，114.9(C－4′)，117.1(C－5′)，122.9(C－6′)，101.6(C－1″)，75.5(C－2″)，77.7(C－3″)，71.8(C－4″)，76.3(C－5″)，68.1(C－6″)，104.7(C－1?)，71.0(C－2?)，72.1(C－3?)，73.6(C－4?)，69.5(C－5?)，17.6(C－6?)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅳ為蘆丁(rutin)。

化合物Ⅴ:白色針晶(丙酮)，mp 136～137℃。與對(duì)照品混合熔點(diǎn)不下降。TLC檢查，5%硫酸乙醇溶液顯紅色，與對(duì)照品所呈斑點(diǎn)Rf值、顏色一致，混合點(diǎn)樣采用多種展開劑展開均呈單一斑點(diǎn)，鑒定化合物Ⅴ為 β－谷甾醇(β－sitosterol)。

化合物Ⅵ:無色針晶(甲醇)，mp 289～291℃。Liebermann－Burchard 反應(yīng)陽性。1H－NMR(CDCl4，500 MHz)δ:4.68(1H，br s，29－Ha)，4.55(1H，br s，29－Hb)，3.11(1H，m，3－H)，1.65(3H，s，30－CH3)，1.23(3H，s)，0.95(3H，s)，0.93(3H，s)，0.79(3H，s)，0.72(3H，s);13C－NMR(DMSO－d6，125MHz)δ:39.3(C－1)，28.2(C－2)，79.0(C－3)，40.4(C－4)，55.1(C－5)，18.9(C－6)，33.8(C－7)，40.9(C－8)，49.2(C－9)，37.3(C－10)，20.7(C－11)，25.2(C－12)，38.0(C－13)，42.9(C－14)，29.9(C－15)，32.7(C－16)，55.0(C－17)，48.6(C－18)，48.4(C－19)，150.9(C－20)，29.9(C－21)，36.5(C－22)，28.8(C－23)，16.0(C－24)，15.1(C－25)，15.9(C－26)，14.4(C－27)，179.0(C－28)，109.5(C－29)，19.9(C－30)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅵ為白樺脂酸(betulinic acid)。

化合物Ⅶ:白色針晶(氯仿)，mp 161～162℃。1H－NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.81(1H，dd，J=8.0 1.5 Hz，3－H)，7.44(1H，ddd，J=7.0，7.0，1.5 Hz，5－H)，6.84(1H，dd，J=8.0，1.3 Hz，6－H)，6.79(1H，ddd，J=7.0，7.0，1.3 Hz，4－H);13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:113.1(C－1)，162.2(C－2)，116.9(C－3)，135.0(C－4)，118.9(C－5)，131.1(C－6)，171.5(C－7)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅶ為水楊酸(salicylic acid)。

化合物Ⅷ:無色針晶(氯仿)，mp 177～180℃。1H－NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.56(1H，d，J=1.8 Hz，2－H)，7.55(1H，dd，J=1.8，8.5 Hz，6－H)，6.83(1H，d，J=8.5 Hz，5－H)，3.59(3H，s，－OCH3);13C NMR(CD3OD，125MHz)δ:121.9(C－1)，113.5(C－2)，147.5(C－3)，151.5(C－4)，114.6(C－5)，124.1(C－6)，168.8(C－7)，55.2(－OCH3)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅷ為香草酸(vanillic acid)。

化合物Ⅸ:白色粉末(甲醇)，mp 287～289℃。與對(duì)照品混合熔點(diǎn)不下降。TLC檢查，5%硫酸乙醇溶液顯紫紅色，與對(duì)照品所呈斑點(diǎn)Rf值、顏色一致，混合點(diǎn)樣采用多種展開劑展開均呈單一斑點(diǎn)，鑒定化合物Ⅸ為胡蘿卜苷(daucosterol)。

化合物Ⅹ:白色粉末(甲醇)，mp 238～239℃。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:8.39(s，8－H)，8.10(s，2－H)，7.35(s，－NH2)，5.88(d，J=6.0 Hz，1′－H)，4.60(dd，J=11.5，6.0 Hz，2′－H)，4.11(dd，J=6.8，4.8 Hz，3′－H)，3.89(dd，J=6.8，3.3 Hz，4′－H)，3.55 ～ 3.67(m，5′－H);13C NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:153.1(C－2)，149.7(C－4)，156.8(C－5)，120.0(C－6)，140.7(C－8)，88.9(C－1′)，74.2(C－2′)，71.4(C－3′)，86.5(C－4′)，62.4(C－5′)，以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］報(bào)道一致，鑒定化合物Ⅹ為腺嘌呤核苷(adenosine)。

致謝:核磁共振波譜數(shù)據(jù)由北京微量化學(xué)研究所和天津大學(xué)分析與測(cè)試中心提供，感謝涂光忠老師和周維義老師給予的大力支持。

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