九子連環(huán)草的化學(xué)成分研究

苑鵬飛， 許啟泰， 康文藝，2*

(1.河南大學(xué)天然藥物研究所，河南開封475004;2.河南大學(xué)中藥研究所，河南開封475004)

九子連環(huán)草為蘭科蝦脊蘭屬植物蝦脊蘭Calanthe discolor Lindl.的全草或根莖，廣泛分布在南非、馬達(dá)加斯、中國、朝鮮半島、日本、喜馬拉雅到印度尼西亞、澳大利亞和南太平洋的某些島嶼，我國有50多種，長江流域及南部各省區(qū)均有分布［1］。九子連環(huán)草在西南民間傳統(tǒng)用藥中具有散結(jié)，解毒，活血，舒筋功效，用于治療瘰疬，扁桃體炎，痔瘡，跌打損傷等。到目前為止，該植物的研究報道絕大多數(shù)局限于栽培技術(shù)、育種、觀賞價值等方面［2-5］;系統(tǒng)化學(xué)分離及藥理活性成分研究少見報道，已報道的化學(xué)成分為二氫菲及生物堿類化合物［6，7］。

作者對九子連環(huán)草進(jìn)行系統(tǒng)化學(xué)研究，從甲醇提取物醋酸乙酯部位首次發(fā)現(xiàn)3個三萜和3個甾醇及苷類化合物，皆為首次從該屬植物中分離得到。

1 儀器和材料

Bruker Avance-400 M型核磁共振譜儀;Agilent 6890-5975 GC-MS聯(lián)用儀;上海利穗公司EZ-中壓制備液相色譜儀;柱色譜材料為煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司生產(chǎn)的200～300目及硅膠H;薄層色譜材料為煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司生產(chǎn)的GF254硅膠板，Sephadex LH-20(瑞典Pharmacia公司)，C-18(德國Merk公司)。

九子連環(huán)草于2007年7月采集于貴州省都勻地區(qū)，經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院劉凡副教授鑒定為蘭科蝦脊蘭屬蝦脊蘭Calanthe discolor Lindl.，標(biāo)本現(xiàn)存于河南大學(xué)天然藥物研究所。

2 提取和分離

九子連環(huán)草干燥全草410 g粉碎后，用甲醇室溫下冷浸3次，每次7 d?；厥占状?，將浸膏懸浮于水中，依次用醋酸乙酯和甲醇萃取，分別得到醋酸乙酯部分7.6 g，甲醇部分33 g。醋酸乙酯部分7.6 g經(jīng)過200～300目硅膠柱色譜，氯仿-甲醇梯度洗脫(100 ∶1～8∶2)，以TLC檢測合并，各組分再經(jīng)過反復(fù)硅膠H、RP-18和Sephadex LH-20柱色譜和中壓制備柱色譜分離得到化合物1(35.0 mg)，2(29.6 mg)，3(59.4 mg)，4(42.3 mg)，5(7.5 mg)，6(7.0 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色粉末，EI-MS m/z:398［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0.55(3H，s，H-18)，0.81(3H，s，H-19)，0.82(3H，d，J=6.8 Hz，H-26)，0.84(3H，d，J=6.8 Hz，H-28)，0.90(3H，d，J=6.8 Hz，H-27)，1.02(3H，d，J=6.4Hz，H-21)，4.71(1H，br，H-3)，5.18(3H，m，H-7，H-22，H-23)。13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:37.0(C-1)，30.7(C-2)，76.7(C-3)，39.0(C-4)，40.2(C-5)，31.5(C-6)，117.5(C-7)，139.1(C-8)，49.6(C-9)，34.8(C-10)，21.3(C-11)，39.4(C-12)，43.2(C-13)，55.0(C-14)，22.9(C-15)，28.1(C-16)，55.9(C-17)，12.1(C-18)，14.1(C-19)，40.5(C-20)，21.1(C-21)，135.6(C-22)，131.8(C-23)，42.8(C-24)，33.1(C-25)，17.6(C-26)，19.6(C-27)，19.9(C-28)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］一致，確定該化合物為麥角甾-7，22-二烯-3-醇。

化合物2 白色粉末，EI-MS m/z:426［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0.80(3H，d，J=6.8Hz，H-29)，0.84(6H，s，H-24，H-28)，0.91(3H，d，J=6.4 Hz，H-30)，0.93(3H，s，H-25)，1.01(3H，s，H-23)，1.03(3H，s，H-26)，1.11(3H，s，H-27)，2.27(2H，m，H-2)，3.52(1H，m，H-3)，5.34(1H，brs，J=6.4 Hz，H-12)。13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:39.7(C-1)，28.9(C-2)，77.0(C-3)，39.7(C-4)，56.0(C-5)，19.0(C-6)，31.7(C-7)，39.1(C-8)，50.2(C-9)，36.2(C-10)，24.3(C-11)，129.3(C-12)，138.3(C-13)，42.2(C-14)，28.9(C-15)，25.4(C-16)，34.0(C-17)，56.8(C-18)，39.7(C-19)，39.8(C-20)，31.7(C-21)，42.2(C-22)，28.9(C-23)，19.0(C-24)，19.0(C-25)，19.8(C-26)，24.3(C-27)，28.9(C-28)，18.8(C-29)，21.2(C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9-10］一致，確定該化合物為α-香樹酯醇。

化合物3 白色粉末，EI-MS m/z:426［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0.86(3H，d，J=6.8Hz，H-29)，0.85(3H，s，H-28)，0.91(3H，d，J=6.4 Hz，H-30)，0.93(3H，s，H-25)，1.01(3H，s，H-23)，0.78(3H，s，H-24)，1.03(3H，s，H-26)，1.16(3H，s，H-27)，2.27(2H，m，H-2)，3.52(1H，m，H-3)，5.34(1H，brs，J=6.4 Hz，H-12)。13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:39.8(C-1)，29.2(C-2)，77.3(C-3)，39.8(C-4)，56.1(C-5)，19.1(C-6)，31.9(C-7)，39.8(C-8)，50.2(C-9)，36.5(C-10)，24.4(C-11)，121.7(C-12)，140.7(C-13)，42.3(C-14)，29.2(C-15)，26.1(C-16)，34.0(C-17)，45.9(C-18)，45.9(C-19)，31.7(C-20)，34.0(C-21)，37.3(C-22)，28.3(C-23)，19.1(C-24)，19.1(C-25)，19.4(C-26)，24.4(C-27)，29.2(C-28)，34.0(C-29)，23.1(C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］一致，確定該化合物為β-香樹酯醇。

化合物4 白色粉末，EI-MS m/z:412［M］+。1H-NMR(Pyr-d5，400 MHz)δ:0.65(3H，s，H-18)，0.83(3H，s，H-19)，0.85(3H，t，J=6.8Hz，H-29)，0.87(3H，d，J=7.2 Hz，H-26)，0.91(3H，s，H-27)，1.06(1H，t，J=6.2Hz，H-24)，1.25(3H，d，J=8Hz，H-21)，5.05(1H，dd，J=15.2Hz，8.8 Hz，H-22)，5.33(1H，dd，J=15.1Hz，8.7 Hz，H-23)，6.20(1H， s， H-6)。13C-NMR(Pyr-d5，100MHz)δ:37.5(C-1)，32.2(C-2)，71.7(C-3)，42.5(C-4)，140.9(C-5)，122.0(C-6)，32.2(C-7)，32.1(C-8)，50.3(C-9)，36.4(C-10)，21.4(C-11)，39.4(C-12)，42.4(C-13)，56.8(C-14)，24.6(C-15)，29.4(C-16)，56.2(C-17)，12.0(C-18)，19.5(C-19)，40.9(C-20)，19.3(C-21)，138.9(C-22)，129.4(C-23)，51.5(C-24)，32.2(C-25)，21.4(C-26)，21.3(C-27)，25.8(C-28)，12.6(C-29)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］一致，確定該化合物為豆甾-5，22(E)-二烯-3β 醇。

化合物5 白色粉末，EI-MS m/z:576［M］+。1H-NMR(Pyr-d5，400 MHz)δ:0.66(3H，s，H-29)，0.95(3H，s，H-26)，0.86(3H，t，J=8.4 Hz，H-27)，0.98(3H，d，J=8.4 Hz，H-18)，0.95(3H，s，H-21)，1.27(3H，t，J=6.8 Hz，H-19)，3.59(1H，s，H-3)，5.37(1H，m，H-6)，5.02(1H，d，J=8.8Hz，glcH-1)。13C-NMR(Pyr-d5，100 MHz)δ:37.7(C-1)，30.1(C-2)，78.5(C-3)，39.4(C-4)，141.0(C-5)，122.0(C-6)，32.2(C-7)，32.1(C-8)，50.4(C-9)，37.0(C-10)，21.4(C-11)，40.0(C-12)，42.5(C-13)，56.9(C-14)，24.6(C-15)，28.6(C-16)，56.3(C-17)，12.0(C-18)，19.2(C-19)，37.0(C-20)，19.2(C-21)，34.6(C-22)，26.6(C-23)，46.1(C-24)，29.5(C-25)，19.5(C-26)，20.0(C-27)，23.4(C-28)，12.0(C-29);Glu:102.9(1′)，75.2(2′)，78.5(3′)，71.7(4′)，78.8(5′)，62.1(6′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］一致，確定該化合物為胡蘿卜苷。

化合物6 白色粉末，EI-MS m/z:410［M］+。1H-NMR(Pyr-d5，400 MHz)δ:1.01(3H，s，H-29)，0.88(3H，s，H-28)，0.88(3H，s，H-19)，0.66(3H，s，H-18)，1.27(3H，s，H-30)，1.98(3H，s，H-27)，2.38(3H，s，H-26)，4.61(1H，dd，J=10.7 Hz，H-3)，5.86(1H，t，J=5.5 Hz，H-6)，5.13(1H，s，H-7)，5.10(1H，t，J=7.1 Hz，H-24)。13C-NMR(Pyr-d5，100 MHz)δ:36.4(C-1)，23.4(C-2)，79.2(C-3)，39.8(C-4)，150.0(C-5)，119.2(C-6)，113.5(C-7)，149.8(C-8)，46.0(C-9)，36.4(C-10)，17.1(C-11)，32.8(C-12)，42.5(C-13)，49.6(C-14)，32.8(C-15)，28.5(C-16)，51.4(C-17)，21.1(C-18)，17.1(C-19)，35.8(C-20)，18.9(C-21)，36.4(C-22)，24.3(C-23)，124.5(C-24)，130.1(C-25)，26.3(C-26)，17.1(C-27)，28.5(C-28)，26.3(C-29)，24.3(C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］一致，確定該化合物為甘遂烷-5，7，24-三烯-3β-醇。

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