常見的風(fēng)濕性疾病患者血中黏膜相關(guān)上皮趨化性細(xì)胞因子水平的變化及意義

張艷莉，蔣莉，張曉莉，郭韻，孫玥，張燕，王曉非

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，沈陽 110004）

常見的風(fēng)濕性疾病患者血中黏膜相關(guān)上皮趨化性細(xì)胞因子水平的變化及意義

張艷莉，蔣莉，張曉莉，郭韻，孫玥，張燕，王曉非

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，沈陽 110004）

目的 通過檢測幾種常見的風(fēng)濕性疾病患者血中黏膜相關(guān)上皮趨化性細(xì)胞因子（CCL28）的水平變化，探討其水平變化在風(fēng)濕性疾病中的作用及其與臨床相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征、強(qiáng)直性脊柱炎患者及健康對照者血中的CCL28進(jìn)行測定。結(jié)果 風(fēng)濕性疾病患者血中的CCL28明顯高于健康對照者；風(fēng)濕性疾病患者血中CCL28的水平變化與各種疾病活動(dòng)性指標(biāo)明顯相關(guān)。結(jié)論 CCL28可能參與了風(fēng)濕性疾病的發(fā)病過程，且在一定程度上反映疾病的嚴(yán)重程度，阻斷CCL28及其受體的相互作用，可能成為風(fēng)濕性疾病治療的有效方法之一。

風(fēng)濕性疾??；黏膜相關(guān)上皮趨化性細(xì)胞因子；自身免疫性疾病

風(fēng)濕性疾病發(fā)病機(jī)制的研究一直是一個(gè)重要的課題，T、B淋巴細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的作用日益成為該研究的重要目標(biāo)之一。近年來趨化因子及其受體在自身免疫病中的作用逐漸受到人們的重視，而黏膜相關(guān)上皮趨化性細(xì)胞因子（mucosa-associated epithelial chemokine，MEC/CCL28）是新近發(fā)現(xiàn)的趨化性細(xì)胞因子家族CC類中的成員之一。有研究表明，在黏膜免疫及某些腫瘤的免疫中CCL28發(fā)揮著重要作用［1］，因而推測其可能在風(fēng)濕性疾病的發(fā)病中起到一定的作用。本研究檢測了幾種常見的風(fēng)濕性疾病患者及正常人血清中CCL28水平的變化，同時(shí)分析了風(fēng)濕性疾病患者中CCL28與相關(guān)臨床指標(biāo)的關(guān)系，從而探討其在風(fēng)濕性疾病發(fā)病過程中的作用。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選擇于2009年7月至2010年2月在中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院的未經(jīng)治療的風(fēng)濕性疾病患者66例，其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）22例，符合 1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）18例，符合 1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)分類標(biāo)準(zhǔn)；干燥綜合征（Sjgren’s syndrome，SS）16例，符合2002年SS國際分類診斷標(biāo)準(zhǔn)；強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）10例，符合1984年修訂的紐約標(biāo)準(zhǔn)；男11例，女55例，平均年齡（43±17）歲。全部患者入院前4周均未應(yīng)用糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑，并排除其他免疫性疾病及感染性疾病。選擇健康對照者15例，為來自我院體檢中心的健康體檢者，其中男3例，女12例，平均年齡（46±17）歲。兩組在年齡及性別構(gòu)成上無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 方法

清晨空腹采血3ml，離心后取上清，置PC管中-20℃保存，全部標(biāo)本一次性檢測。CCL28的測定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，試劑盒由美國RayBiotech公司提供，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行操作。各種風(fēng)濕性疾病活動(dòng)指標(biāo)的檢測由我院檢驗(yàn)科協(xié)助完成，異常判定均參考同期該項(xiàng)檢查的正常值。同時(shí)收集整理患者其他臨床資料。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 各組風(fēng)濕性疾病患者及健康對照者血中CCL28水平

SLE、RA、SS、AS患者及健康對照者血中CCL28水平分別為（342.44±107.36）ng/ml、（423.22±156.22）ng/ml、（402.98±243.19）ng/ml、（314.09±99.28）ng/ml、（222.83±69.77）ng/ml，各組風(fēng)濕性疾病患者與健康對照者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 各組風(fēng)濕性疾病患者血中CCL28水平及相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性分析

SLE組CCL28水平與C3呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.505，P<0.05），與 IgG、SLEDAI評分呈明顯正相關(guān)（r=0.425，P<0.05；r=0.703，P<0.01），與紅細(xì)胞沉降率、IgA、γ球蛋白、類風(fēng)濕因子無明顯相關(guān)。RA組CCL28水平與紅細(xì)胞沉降率、類風(fēng)濕因子呈明顯正相關(guān) （r=0.518，P<0.05；r=0.475，P<0.05），與IgG、IgA、γ球蛋白無明顯相關(guān)。SS組CCL28水平與IgA、γ球蛋白呈顯著正相關(guān)（r=0.63，P<0.01；r=0.725，P<0.01），與紅細(xì)胞沉降率、IgG、類風(fēng)濕因子無明顯相關(guān)。AS組CCL28水平與紅細(xì)胞沉降率、IgA水平呈明顯正相關(guān)（r=0.79，P<0.01；r=0.622，P<0.05），與IgG、γ球蛋白、類風(fēng)濕因子無明顯相關(guān)。

3 討論

MEC/CCL28是2000年研究人員發(fā)現(xiàn)的一種新的趨化性細(xì)胞因子，按照新提出的趨化性細(xì)胞因子配體，將其定名為CCL28［2］。其受體為CCR10和CCR3［3］，CCL28通過結(jié)合CCR10吸引皮膚淋巴細(xì)胞抗原陽性的記憶T細(xì)胞和IgA抗體分泌細(xì)胞［4］；通過結(jié)合CCR3吸引人外周血中的嗜酸性粒細(xì)胞［5］。CCL28與相應(yīng)受體結(jié)合后，可介導(dǎo)血循環(huán)中的CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、IgA抗體分泌細(xì)胞等免疫活性細(xì)胞歸巢遷徙至相關(guān)組織［1］，因而推測其可能參與了風(fēng)濕性疾病的發(fā)病過程，但在國內(nèi)風(fēng)濕性疾病研究中報(bào)告甚少。

本研究以患有不同類型風(fēng)濕性疾病的患者作為研究對象，發(fā)現(xiàn)在幾種常見的風(fēng)濕性疾病患者血中CCL28水平明顯升高，并且分別與各疾病活動(dòng)指標(biāo)相關(guān)，證明CCL28在風(fēng)濕性疾病中具有重要作用。SLE為多系統(tǒng)、多臟器受累的自身免疫性疾病，患者體內(nèi)T、B淋巴細(xì)胞數(shù)量及功能異常，導(dǎo)致多種自身抗體形成，相應(yīng)細(xì)胞因子釋放增加［6］，進(jìn)一步引起免疫細(xì)胞功能紊亂。已有研究表明CCL28可吸引血液循環(huán)中的CD4+T細(xì)胞［2］，進(jìn)而導(dǎo)致T細(xì)胞的功能異常以致新抗原不斷出現(xiàn)，使自身免疫持續(xù)存在，CCL28可能通過上述機(jī)制參與SLE的發(fā)病。本研究證明SLE患者體內(nèi)CCL28增加，并與反映SLE病情活動(dòng)的指標(biāo)C3、IgG、SLEDAI評分具有相關(guān)性，這表明了CCL28在SLE的發(fā)病中具有一定的作用，且與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。RA是以關(guān)節(jié)滑膜炎為主要特征的慢性進(jìn)行性的自身免疫性疾病，在RA慢性滑膜炎的發(fā)生過程中，大量炎性細(xì)胞從外周血遷移、聚集在關(guān)節(jié)滑膜組織，從而造成滑膜組織破壞，趨化因子在炎性細(xì)胞遷移、浸潤過程中則起了重要作用。有研究發(fā)現(xiàn)RA患者的外周血及滑膜液中均可表達(dá)CCR3［7］，CCL28可通過與其受體CCR3結(jié)合參與RA的滑膜破壞。在檢測中我們發(fā)現(xiàn)RA患者血中CCL28水平明顯高于健康對照者，并與該組患者病情活動(dòng)指標(biāo)紅細(xì)胞沉降率、類風(fēng)濕因子的變化相關(guān)。因此認(rèn)為CCL28在關(guān)節(jié)滑膜損傷中具有重要意義，且在一定程度上反映了疾病的嚴(yán)重程度。SS是一種主要累及外分泌腺體的慢性炎性自身免疫病，其典型病理特征是外分泌腺如唇腺、淚腺導(dǎo)管周圍淋巴細(xì)胞為主的單個(gè)核細(xì)胞浸潤灶。研究表明，浸潤的單個(gè)核細(xì)胞多為CD4+T淋巴細(xì)胞，尤其以CD4+的激活的記憶型T淋巴細(xì)胞為主［8］，SS患者唇腺浸潤的淋巴細(xì)胞表達(dá)趨化因子，提示移行而來的淋巴細(xì)胞被激活并表達(dá)趨化因子，從而起到促進(jìn)病情發(fā)展的作用［9］。本研究檢測結(jié)果同樣證明了SS患者體內(nèi)高CCL28水平的存在，且與IgA、γ球蛋白的變化密切相關(guān)，因而推測其可能參與了本病的發(fā)病且與黏膜受損有關(guān)。AS是以累及脊柱和骶髂關(guān)節(jié)為特征的慢性炎癥性風(fēng)濕性疾病。近年來研究發(fā)現(xiàn)TNF-α及CD4+T細(xì)胞在AS發(fā)病機(jī)制中起重要作用［10，11］，TNF-α 并不是單獨(dú)在風(fēng)濕性疾病中發(fā)揮作用，而是與其他細(xì)胞因子/趨化因子一起共同組成一個(gè)復(fù)雜的免疫網(wǎng)絡(luò)，通過網(wǎng)絡(luò)中分子的相互作用，在AS等風(fēng)濕性疾病的發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用。CCL28可能通過上述機(jī)制參與發(fā)病，本研究證明了AS患者血中CCL28增加并與患者血中紅細(xì)胞沉降率、IgA呈正相關(guān)關(guān)系，提示疾病活動(dòng)期患者體內(nèi)淋巴細(xì)胞激活后免疫應(yīng)答反應(yīng)的存在，從而促進(jìn)了關(guān)節(jié)炎的發(fā)生。

風(fēng)濕性疾病患者的發(fā)病多與淋巴細(xì)胞活化有關(guān)，活化后的T細(xì)胞可以分泌大量致炎性細(xì)胞因子造成組織損傷，同時(shí)又激活B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生大量抗體。而趨化性細(xì)胞因子及受體相互作用可能是風(fēng)濕性疾病發(fā)病的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，因而阻斷這一環(huán)節(jié)就有可能控制病情發(fā)展，為風(fēng)濕性疾病的治療尋找新的途徑。

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（編輯 陳 姜，英文編輯 陳 姜）

Serum Level of Mucosa-associated Epithelial Chemokine in Patients with Common Types of Rheumatic Diseases

ZHANGYan-li，JIANGLi，ZHANGXiao-li，GUOYun，SUNYue，ZHANGYan，WANGXiao-fei
（Department of Rheumatism and Immunology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

ObjectiveTo investigate the serum level of mucosa-associated epithelial chemokine （MEC/CCL28） in common types of rheumatic diseases，and to explore its relationship with clinical features.MethodsThe serum level of CCL28was determined by ELISAin patients with rheumatic diseases including systematic lupus erythematosus，rheumatoid arthritis，Sjgren’s syndrome，and ankylosing spondylitis，and normal controls.ResultsThe serum level of CCL28was significantly higher in patients with rheumatic diseases than in normal controls.In patients with rheumatic diseases，the serum level of CCL28was obviously correlated with disease activity index.ConclusionCCL28may be involved in the pathogenesis of rheumatic diseases and reflect the degree of the diseases to a certain extent.Thus，blocking the interaction between CCL28and its receptor may be one of the available therapies for rheumatic diseases.

rheumatic disease；mucosa-associated epithelial chemokine；autoimmune disease

R593.2

A

0258-4646（2010）11-0950-03

張艷莉（1983-），女，碩士研究生.

王曉非，E-mail：cpd1986@sina.com

2010-05-19