柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利對腎性高血壓大鼠血壓的影響

高永峰 焦 賀 陳 強 李 冬

(1．泰山醫(yī)學院藥學院，山東 泰安 271016； 2.泰山醫(yī)學院公共衛(wèi)生學院，山東 泰安 271016)

柿葉黃酮(flavonoids from persimmon leaf, PLF)是從柿樹科(Ebenaceae)柿樹屬(Diospyros)植物柿(Diospyroskaki L.f.)的新鮮或干燥葉中分離而得?，F(xiàn)代藥理研究表明，柿葉具有廣泛的藥理作用，包括擴張血管、降血脂、降血壓、抗氧化、止血等多種功效[1]。在上世紀70年代，中國人民解放軍第58醫(yī)院制藥廠[2]曾用柿葉注射劑治療高血壓12例，對改善頭昏、頭痛等癥狀效果良好。2009年覃斐章等[3]觀察到柿葉黃酮對一氧化氮合酶抑制劑N G-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine- methlester，L-NAM E)誘導的高血壓大鼠的降壓作用及其作用機制。本實驗建立腎血管性高血壓大鼠模型(renovascular hypertensive rat, RHR)，觀察柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利對RHR的降壓作用。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1藥品與試劑 柿葉于2009年10月～11月份采自泰山山麓，經(jīng)過烘干粉碎、提取分離、冷凍干燥得黃酮提取物。以蘆丁為標準測定黃酮含量為33.37%。卡托普利(captopril，CAP)，中美上海施貴寶制藥有限公司，批號：0601031。

1.1.2動物 雄性Wistar大鼠，體重280～320 g，清潔級，由山東省魯抗醫(yī)藥股份有限公司實驗動物中心提供，魯動質字：SCXK 魯20080002。

1.1.3儀器 ZH-HX-Z無創(chuàng)血壓測定儀(淮北正華生物儀器設備有限公司)； Medlab生物信號采集處理系統(tǒng)(南京美易科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1腎血管性高血壓大鼠模型的建立

應用二腎一夾方法制作RHR模型[4]：取雄性Wistar大鼠，戊巴比妥鈉45 mg·kg-1麻醉，分離左側腎動脈，放置特制銀夾(0.2 mm)，使腎動脈狹窄。術后靜脈滴注青霉素預防感染。術前1 d及術后每周同一時間段測定大鼠尾動脈收縮壓，術后3周內(nèi)收縮壓≥20 kPa者納入實驗。

1.2.2動物分組及處理 術后第4周，將RHR隨機分為模型組(model )、卡托普利10 mg·kg-1組(CAP )、柿葉黃酮100 mg·kg-1組(PLF )、柿葉黃酮100 mg·kg-1+卡托普利10 mg·kg-1組(PLF+CAP)，每組10只。給藥組每天灌胃給藥一次，模型組和假手術組(sham-operation group)每天灌胃生理鹽水1次，連續(xù)4周。每周固定時間段測定大鼠尾動脈收縮壓，觀察給藥前后和停藥1周后血壓的變化情況。

2 結 果

2.1 PLF及其聯(lián)合卡托普利對RHR血壓的影響

給藥前與假手術組相比，所有造模大鼠血壓均明顯升高(P<0.05)，表明模型制備成功。在給藥第3天后，PLF+CAP組大鼠血壓與模型組相比，出現(xiàn)明顯降低(P<0.05)；給藥第7天后，與模型組相比CAP組大鼠血壓出現(xiàn)明顯降低(P<0.05)，PLF+CAP組大鼠血壓進一步降低(P<0.01)；在給藥21天后，PLF組大鼠血壓出現(xiàn)下降(P<0.05)。停藥7后，CAP組、PLT組、PLF+CAP組大鼠血壓均有回升，其中PLF+CAP組大鼠血壓回升幅度最小，與CAP組和PLT組相比，有顯著性差異(P<0.05)。見表1。

表1 柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利對RHR血壓的影響±s，n=10)

注：與假手術組相比，aP﹤0.05；與模型組相比，bP﹤0.05；cP﹤0.01；與PLF+CAP組相比，dP﹤0.05。

2.2 PLF及其聯(lián)合卡托普利對RHR心率的影響

模型制備成功后，與假手術組相比，模型大鼠心率明顯加快(P﹤0.05)；給藥3天后，與模型組相比，CAP組和PLF+CAP組大鼠心率出現(xiàn)顯著下降(P﹤0.05)；在給藥21天后，與模型組相比，PLF組大鼠心率也出現(xiàn)明顯降低(P﹤0.05)。停藥7天后，各給藥組大鼠心率出現(xiàn)增高，但低于模型組大鼠心率(P﹤0.05)。見表2。

表2 柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利對RHR心率的影響±s，n=10)

注：與假手術組相比，aP﹤0.05；與模型組相比，bP﹤0.05。

3 討 論

目前柿葉黃酮降壓作用的研究報道較少，國內(nèi)外未見柿葉黃酮對腎性高血壓大鼠的降壓作用。本實驗結果表明，柿葉黃酮對腎性高血壓大鼠具有一定的降壓作用，給藥1周后大鼠血壓開始緩慢下降，到給藥3周后，出現(xiàn)明顯降壓效果；對柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利組大鼠觀察發(fā)現(xiàn)，兩者聯(lián)合后降壓效果尤為顯著，給藥3天后，即可出現(xiàn)明顯降壓效果。隨著給藥時間的增加，血壓持續(xù)下降；停藥7天后，卡托普利組、柿葉黃酮組、柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利組大鼠血壓均有一定回升，其中柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利組大鼠血壓回升緩慢，表明其對RHR降壓作用維持時間較長。實驗同時觀察到在柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利在降壓的過程中，可降低RHR心率。

腎血管性高血壓是由腎血管狹窄引起腎缺血，導致腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system，SAS)的激活，從而引發(fā)血壓的升高。在RAS系統(tǒng)中，血管緊張素(angiotensin，Ang)是強的血管收縮劑，適量的Ang可維持血管張力，有利于調節(jié)體液平衡和血壓穩(wěn)定，過量的Ang分泌可促進內(nèi)皮素分泌，使交感神經(jīng)張力增高，腎臟水鈉潴留，從而誘發(fā)和加重高血壓[5]?？ㄍ衅绽茄芫o張素轉化酶抑制藥，抑制AngⅡ生成，具有明顯的降壓作用。賈斐章等[3]在L-NAME制備高血壓大鼠模型中，觀察到柿葉黃酮可以降低L-NAME模型大鼠體內(nèi)的AngⅡ的含量。由此推測，柿葉黃酮對RHR的降壓作用，柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利具有的顯著降壓作用，以及在降壓過程中伴隨的心率減慢，其機制可能與降低大鼠體內(nèi)AngⅡ的含量有關。對于柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利降壓作用的具體機制，有待進一步研究。

[1] 張秋燕，王亮，肖峰，等．柿葉藥理作用研究進展[J]．河北職工醫(yī)學院學報，2004，21(3)：39-40．

[2] 中國人民解放軍第58醫(yī)院制藥廠．柿樹葉的實驗研究及初步療效觀察[J]．中草藥通訊，1973，(3)：9．

[3] 賈斐章，林興，張緒東，等． 柿葉黃酮的降壓作用及其作用機制研究[J]．廣西科學，2009，16(3)：310-313.

[4] [德]H．G． 沃格爾，[美]W．H．沃格爾編著，杜冠華等譯. 藥理學實驗指南[M]．北京：科學出版社，2001：102．

[5] 張朝霞．蓮椹湯對腎性高血壓大鼠血壓的療效觀察[J]．實用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2008，22(7)：56-57．