補(bǔ)充精氨酸對(duì)過(guò)度訓(xùn)練大鼠肌糖原、AMPK及GLUT-4的影響

劉無(wú)逸，陸愛(ài)云

●研究報(bào)道Short Communications

補(bǔ)充精氨酸對(duì)過(guò)度訓(xùn)練大鼠肌糖原、AMPK及GLUT-4的影響

劉無(wú)逸，陸愛(ài)云

目的：觀察體外補(bǔ)充L－精氨酸對(duì)過(guò)度訓(xùn)練大鼠的作用。方法：9周齡SD雌性大鼠40只，隨機(jī)分為安靜對(duì)照組（A組）、大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組（B組）、大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)服L-精氨酸組（C組）、過(guò)度訓(xùn)練組（D組），其中D1組為過(guò)度訓(xùn)練組，D2組為過(guò)度訓(xùn)練加服L-精氨酸組。上坡跑訓(xùn)練9周后測(cè)各組白腓腸肌和比目魚(yú)肌的肌糖原含量、AMPK活性和肌膜GLUT-4含量。結(jié)果：B組和D1組糖原含量較A組有升高趨勢(shì)，但無(wú)顯著性；C組顯著高于A組（P＜0.01）；D2組大鼠比目魚(yú)肌糖原含量較A組顯著升高（P＜0.01）；D2組較D1組升高，但未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。B組、C組和D2組AMPK活性顯著高于A組（P＜0.01）；D2組較D1組有明顯增加，差異顯著（P＜0.05）。B組、C組和D2組GLUT-4含量分別較A組增加100%左右，D1組增加11%；D2組較D1組增加57%。結(jié)論：體外補(bǔ)充L-精氨酸可能有利于延緩或治療過(guò)度訓(xùn)練。

大鼠；過(guò)度訓(xùn)練；L-精氨酸；肌糖原；AMP-活化的蛋白激酶；葡萄糖載體蛋白-4

目前，過(guò)度訓(xùn)練在運(yùn)動(dòng)員中仍是較為常見(jiàn)的運(yùn)動(dòng)性疾病之一。研究認(rèn)為，高水平運(yùn)動(dòng)員常在他們的職業(yè)生涯中發(fā)生過(guò)度訓(xùn)練，如徑賽運(yùn)動(dòng)員發(fā)生率達(dá)60%，澳大利亞國(guó)家游泳隊(duì)在半年的賽季中發(fā)生率是21%，印度國(guó)家藍(lán)球隊(duì)在6周集訓(xùn)期間發(fā)生率是33%，半職業(yè)的足球運(yùn)動(dòng)員在5個(gè)月的賽季以后發(fā)生率在50%以上。盡管過(guò)度訓(xùn)練的發(fā)病率較高，但產(chǎn)生的機(jī)制目前尚未完全明了，許多研究認(rèn)為與代謝紊亂關(guān)系密切，Petibois等[1]將其稱(chēng)為代謝紊亂綜合癥（a metabolism alteration process syndrome）。

左旋精氨酸（L-arginine，L-Arg）是體內(nèi)合成一氧化氮（NO）的天然底物，即L-Arg和O2在一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）的作用下，生成NO和瓜氨酸（L-Cit）。NO在體內(nèi)具有廣泛的生理作用，其中對(duì)骨骼肌葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)具有促進(jìn)作用。近年來(lái)在對(duì)心、肺、肝等臟器缺血/再灌注的研究中發(fā)現(xiàn)，L-Arg可明顯減輕再灌注損傷[2]，同時(shí)，L-Arg也被用于燒傷、心力衰竭等多種臨床疾病。本實(shí)驗(yàn)的目的是觀察體外補(bǔ)充（口服）L-Arg對(duì)過(guò)度訓(xùn)練大鼠骨骼肌糖原含量及部分調(diào)節(jié)因素的影響，探討過(guò)度訓(xùn)練發(fā)生的可能機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

1.1.1 大鼠分組9周齡Sprague-Dawley（SD）雌性大鼠40只，由中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，以國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類(lèi)動(dòng)物飼料（由上海海軍醫(yī)學(xué)研究所動(dòng)物中心提供）每籠5只（鼠籠體積40 cm×27 cm×22 cm）飼養(yǎng)，自由進(jìn)食、飲水，室溫20℃～25℃，相對(duì)濕度45%～55%，每天光照時(shí)間12 h。大鼠隨機(jī)分4個(gè)大組：對(duì)照組（A組），7只；大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組（B組），7只；大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)服L-精氨酸組（C組），8只；過(guò)度訓(xùn)練組（D組），18只；再分D1組9只；D2組（服L-精氨酸組），9只。

1.2 主要試劑和測(cè)試方法

1.2.1 主要試劑與材料肌糖原測(cè)定試劑盒由南京建成生物研究所提供；SAMSPeptide為UPSTATE產(chǎn)品；[γ-32P]ATP，福瑞生物工程公司核酸研究室提供；兔抗鼠GLUT-4，Chemicon產(chǎn)品；辣根酶標(biāo)記山羊抗兔IgG，北京中山生物技術(shù)有限公司；三磷酸腺苷（ATP），Sigma產(chǎn)品；Whatman P81濾紙，Whatman公司產(chǎn)品；L-精氨酸，上海醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司提供；一氧化氮測(cè)定試劑盒和一氧化氮合酶測(cè)定試劑盒，南京建成生物研究所提供。1.2.2測(cè)試方法稱(chēng)取肌肉組織120mg用眼科剪剪碎后，加緩沖液A（210mM蔗糖，2mMEGTA，40mM NaCl，30mM HEPES，pH 7．4，蛋白酶抑制劑）3 mL，置試管內(nèi)冰水浴中用MICCRA D-8型勻漿器15 s×2次勻漿。取1 mL勻漿上清液置-78℃冰箱保存?zhèn)溆茫溆鄤驖{液經(jīng)超速離心提取肌膜。

肌糖原含量、肌NO含量、肌NOS活性均按南京建成生物研究所提供的試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，蛋白定量采用BCA法；肌AMP-活化的蛋白激酶（AMPK）活性的測(cè)試根據(jù)Derave等[5]方法進(jìn)行；肌膜葡萄糖載體蛋白-4葡萄糖載體蛋白-4（GLUT-4）蛋白測(cè)定按Dubouchaud等[6]的方法進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 9．0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（D）表示，計(jì)數(shù)資料用百分率表示，組間比較分別采用單因素方差分析。顯著性標(biāo)準(zhǔn)為P＜0．05，P＜0．01為差異具有高度顯著性。

2 結(jié)果

2.1 訓(xùn)練期間大鼠的體重變化

9周訓(xùn)練后，D1和D2組大鼠毛發(fā)聳立無(wú)光澤，活動(dòng)減少，反應(yīng)遲緩，后期不能完成120min的運(yùn)動(dòng)時(shí)間；但體重與其他各組比較差異均無(wú)顯著性（P＞0．05）（見(jiàn)圖1）。

圖1 大鼠訓(xùn)練期間體重變化Figure 1 Changes in rats body weightduring breeding

2.2 各組大鼠肌糖原含量

大鼠在9周運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后比目魚(yú)肌安靜肌糖原含量有明顯的升高（見(jiàn)表2），與A組比較C組和D2組達(dá)到顯著和非常顯著水平（P＜0．05；P＜0．01）；D2組與D1組比較糖原含量雖有升高，但尚未達(dá)到顯著水平。

9周訓(xùn)練后白腓腸肌糖原含量有增加趨勢(shì)，其中C組與A組比較有非常顯著的差異，P＜0．01（見(jiàn)表2）；D2組與D1組比較糖原含量雖有升高，但未達(dá)到顯著水平。

表2 各組大鼠肌糖原含量（m g/g肌組織）Table 2 Themusc le glycogen contents in various groups（mg/g wetm uscle）

2.3 各組大鼠肌AMPK活性

9周耐力訓(xùn)練后，大鼠比目魚(yú)肌AMPK活性有升高的趨勢(shì)，B組與A組比較差異具有顯著性（P＜0．05）。D1組肌AMPK活性與B組比較肌AMPK活性下降的差異非常顯著（P＜0．01）。D2組肌AMPK活性較D1組提高，差異顯著（P＜0．05）（見(jiàn)表3）。

在大鼠白腓腸肌，AMPK活性B組、C組和D2組均較A組增加，差異均非常顯著（P＜0．01）。D1組與B組比較，活性下降具有非常顯著意義（P＜0．01）；D2組與D1組比較，活性明顯增加，差異非常顯著（P＜0．01）。腓腸肌AMPK活性D2組較D1組提高，具有非常顯著的差異（P＜0．01）（見(jiàn)表3）。

2.4 各組大鼠比目魚(yú)肌肌膜GLUT-4蛋白含量

各組比目魚(yú)肌肌膜GLUT-4蛋白質(zhì)印跡試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖2（S為參照樣本的膜蛋白）。用Image-pro plus分析軟件對(duì)各條帶的分析結(jié)果見(jiàn)表4。

9周耐力訓(xùn)練使B組、C組、D1組和D2組大鼠比目魚(yú)肌肌膜GLUT-4蛋白積分光密度分別較A組增加115%、92%、11%和75%；D1組GLUT-4蛋白積分光密度較B組下降48%，D2組下降19%；D2組與D1組比較GLUT-4蛋白積分光密度增加了57%。

表3 各組AMPK活性（nm ol·m in-1·mg-1 prot）Table 3 Muscle AMPKactivity in variousg loups（nmol·m in-1·mg-1 pro）

圖2 各組比目魚(yú)肌GLUT-4蛋白含量（S為參照）Figure 2 sarcolemma GLUT4 protein contens in soleus

表4 各組比目魚(yú)肌GLUT-4蛋白含量比較Table 4 sa rcolemma GLUT4 protein contens in soleus

2.5 各組大鼠肌NOS活性

經(jīng)9周耐力訓(xùn)練，B組和C組比目魚(yú)肌和白腓腸肌NOS活性較A組有一定提高（見(jiàn)表5），但均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；D1組和D2組較B組降低，具有顯著性（P＜0．05）；D2組與D1組之間無(wú)顯著性差異（P＞0．05）。

表5 各組肌NOS活性（U/mg prot）Table 5 Musc le NOS activity in various gloups（U／mg prot）

2.6 各組大鼠肌NO含量

9周耐力訓(xùn)練后B組和C組大鼠比目魚(yú)肌NO含量略有升高，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見(jiàn)表6）；D1組和D2組比目魚(yú)肌NO含量基本維持在A組水平。在白腓腸肌，B組和C組肌NO含量較A組升高，差異均非常顯著，P＜0．01；D1組和D2組肌NO含量分別較B組和C組降低，D1組差異具有顯著性，P＜0．05。

3 討論

L-Arg被認(rèn)為是免疫營(yíng)養(yǎng)成分之一，在體內(nèi)可通過(guò)NO合成途徑和誘導(dǎo)生長(zhǎng)激素、胰島素及高血糖素等作用于免疫系統(tǒng)的途徑發(fā)揮生理作用[7]，被用于嚴(yán)重的創(chuàng)傷、感染和應(yīng)激等。

過(guò)度訓(xùn)練是運(yùn)動(dòng)員在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中較容易出現(xiàn)的一種運(yùn)動(dòng)性疾病，是長(zhǎng)期應(yīng)激狀態(tài)下的一種病理狀態(tài)，主要表現(xiàn)為身體機(jī)能低下，其產(chǎn)生的機(jī)制較為復(fù)雜，Petibois等[1]將其稱(chēng)之謂代謝紊亂綜合癥，其依據(jù)之一認(rèn)為過(guò)度訓(xùn)練與肌糖原耗竭有關(guān)[8]。我們將L-Arg用于過(guò)度訓(xùn)練大鼠，觀察對(duì)肌糖原含量及部分調(diào)節(jié)因素可能產(chǎn)生的影響。

表6 各組肌NO含量（um ol/g pro t）Table 6 Musc le NO contents in various gloups（umol/g p rot）

實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充L-Arg可提高正常訓(xùn)練大鼠和過(guò)度訓(xùn)練大鼠肌糖原的含量，比目魚(yú)肌的表現(xiàn)尤為明顯，機(jī)制可能與NO可促進(jìn)骨骼肌葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。肌細(xì)胞對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)有兩條途徑，即胰島素依賴(lài)途徑和非胰島素依賴(lài)途徑。據(jù)Balon和Nadler[9]的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，L-Arg可引起趾長(zhǎng)伸肌NO濃度升高，增加大鼠骨骼肌基礎(chǔ)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)。L-Arg的這種作用可被L-NG-甲基精氨酸（L-NMMA，NOS的阻斷劑）抑制，且不受胰島素濃度的影響，表明NOS/NO參與骨骼肌葡萄糖代謝是通過(guò)非胰島素依賴(lài)的途徑進(jìn)行的[10-11]。

長(zhǎng)期耐力運(yùn)動(dòng)可促進(jìn)NOS活性的提高[12]，增加NO的合成，但我們發(fā)現(xiàn)在過(guò)度訓(xùn)練狀態(tài)下，大鼠肌NOS活性較正常訓(xùn)練組顯著下降，其值甚至低于安靜對(duì)照組的水平。補(bǔ)充L-Arg對(duì)其活性無(wú)激活作用，顯示在過(guò)度訓(xùn)練狀態(tài)下，NOS的活性受到抑制。

正常情況下，NOS的活性受AMP-活化的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）的調(diào)節(jié)。近年來(lái)的研究表明，AMPK能感知細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的改變，并通過(guò)影響細(xì)胞物質(zhì)代謝的多個(gè)環(huán)節(jié)維持細(xì)胞能量供求平衡。當(dāng)細(xì)胞ATP減少時(shí)，AMPK一方面抑制糖原、脂肪和膽固醇合成，減少能量消耗；另一方面促進(jìn)脂肪酸氧化、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，增加能量的產(chǎn)生。因此，被認(rèn)為是調(diào)節(jié)細(xì)胞能量代謝的開(kāi)關(guān)[13]。

實(shí)驗(yàn)顯示過(guò)度訓(xùn)練大鼠肌AMPK活性與正常訓(xùn)練組比較受到明顯抑制，補(bǔ)充L-Arg可顯著提高肌AMPK的活性，顯示L-Arg對(duì)肌AMPK活性具有一定的保護(hù)作用，但這一現(xiàn)象從肌收縮促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)增加的信號(hào)鏈角度很難解釋。

Fryer等學(xué)者認(rèn)為[14]AMPK可通過(guò)NOS依賴(lài)的途徑促進(jìn)骨骼肌的葡萄糖攝取。他們發(fā)現(xiàn)NOS活性隨著葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)而增加，NOS抑制劑可阻斷AMPK活化引起的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)作用。在體外，nNOS和eNOS能被AMPK磷酸化，其產(chǎn)物NO可激活鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶，然后催化cGMP的合成。用鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶抑制劑可防止這些細(xì)胞由AICAR（5-Am inoim idazole-4-carboxam ide 1-β-D-ribofuranoside，為AMPK刺激劑）刺激引起的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)。這些結(jié)果表明AMPK在誘導(dǎo)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)方面，NOS是重要因素之一。目前認(rèn)為這一信號(hào)鏈由肌收縮發(fā)動(dòng)，隨著肌組織中AMP含量增加使AMPK活化，后者可引起NOS磷酸化（活化），增加NO的合成，NO進(jìn)一步活化鳥(niǎo)氨酸環(huán)化酶，加快cGMP形成，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)GLUT-4向肌膜轉(zhuǎn)位，提高葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)[15]?？梢?jiàn)，NO位于AMPK的下游，對(duì)AMPK不產(chǎn)生直接的作用，最大的可能是通過(guò)間接的途徑減輕AMPK抑制因子對(duì)AMPK活性的抑制，提高AMPK的活性。如通過(guò)cGMP對(duì)AMPK產(chǎn)生一定的調(diào)節(jié)作用。

盡管長(zhǎng)期耐力訓(xùn)練可提高NOS活性，過(guò)度訓(xùn)練狀態(tài)下，NOS活性受到抑制，但實(shí)驗(yàn)中補(bǔ)充L-Arg對(duì)正常訓(xùn)練大鼠或過(guò)度訓(xùn)練大鼠比目魚(yú)肌和白腓腸肌的NO含量無(wú)顯著性的改變。這可能與NO分子在體內(nèi)半衰期短（約5 s左右）、作用迅速，我們采用的分析方法不夠靈敏有關(guān)。

肌細(xì)胞攝取葡萄糖需葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（GLUT）作為載體，其中載體蛋白4（Glucose transporter type 4，GLUT-4）是骨骼肌葡萄糖跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的主要載體，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)被認(rèn)為是肌細(xì)胞葡萄糖代謝的限速步驟。安靜時(shí)，GLUT-4主要分布在細(xì)胞內(nèi)的管泡狀結(jié)構(gòu)（TGN區(qū)）內(nèi)，當(dāng)受到胰島素或肌收縮刺激時(shí)，可向胞膜和T管轉(zhuǎn)移，增加肌膜表面GLTU-4的含量。

我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)過(guò)度訓(xùn)練大鼠肌膜GLUT-4含量較正常訓(xùn)練組減少48%，補(bǔ)充L-Arg可使過(guò)度訓(xùn)練大鼠肌膜GLUT-4含量增加57%，但在正常訓(xùn)練組大鼠這一作用不明顯。前者可能因?yàn)檫^(guò)度訓(xùn)練時(shí)，AMPK的活性受到抑制，對(duì)NOS的活化作用減弱。補(bǔ)充外源性L(fǎng)-Arg，增加了NOS的作用底物，有利于NO的產(chǎn)生，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)GLUT-4向肌膜轉(zhuǎn)位，提高胞膜的GLUT-4含量。后者可能由于肌AMPK、NOS活性正常，增加底物對(duì)進(jìn)一步提高NO的意義不大。因此，在正常訓(xùn)練狀態(tài)下，補(bǔ)充外源性L(fǎng)-Arg對(duì)提高肌膜GLUT-4含量的作用不明顯。

過(guò)度訓(xùn)練產(chǎn)生的機(jī)制復(fù)雜，肌細(xì)胞能量代謝障礙可能是重要因素之一。從肌細(xì)胞對(duì)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)角度出發(fā)，過(guò)度訓(xùn)練狀態(tài)下雖然肌AMPK活性、NOS活性受到抑制，肌膜GLUT-4含量降低，但糖原含量基本正常。補(bǔ)充L-Arg可在一定程度上改善AMPK的活性，提高肌膜GLUT-4含量，增加肌糖原的含量，可能有利于延緩或治療過(guò)度訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)顯示過(guò)度訓(xùn)練在肌糖原含量基本正常情況下仍可發(fā)生，可能提示肌細(xì)胞對(duì)糖利用的障礙，值得進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

體外補(bǔ)充L-精氨酸可增加過(guò)度訓(xùn)練大鼠肌糖原的含量，并可提高肌AMPK活性，增加肌膜GLUT-4含量，可能有利于延緩或治療過(guò)度訓(xùn)練。

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Effect of Supp lying L-arginine on Skeletal M uscle G lycogen,AMPK Activity and Sarcolemm a GLUT4 Protein Contentsin Overtraining Rats

LIUWuyi,LU Aiyun
（School of Sport＆Exercise Science,ShanghaiUniversity of Sport,Shanghai200438,China）

Objective:The purpose of the present study was to observe effect of supplying L-arginine on skeletalmuscle glycogen contents,AMP-activated protein kinase(AMPK)activity and sarcolemma Glucose transporter type 4(GLUT4)protein contents in overtraining rats．Methods:Forty SD ratswere randomly divided into group A(sedentary),group B(underwentendurance exercise 60minutes/day),group C(underwentendurance exercise 60minutes/day, supplying L-arginine)and group D(underwentendurance exercise 120minutes/day),group D subdivided group D1(without L-arginine)and group D2(with L-arginine)．All exercise groups were trained 6 days/wk for 9 weeks．Muscle glycogen,sarcolemma GLUT4 contents and muscle AMPK activity were determined after the 9-week training．Results:Muscle glycogen contents in group B and group D1 exist a trend of increase compared with that in group A,but not significantly(P＞0．05)．Muscle glycogen contents in soleus showed a significant higher level in group C and group D2 compared with that in group A(P＜0．01), and itshowed a trend of increase in group D2 compared with that in group D1,but not significantly(P＞0．05)．Muscle AMPK activity in group B,group C and group D2 increased significantly compared with that in group A,and it showed a significanthigher level in group D2 compared with that in group D1(P＜0．01)．Sarcolemma GLUT4 contents in group B,group C and group D2 increased about 100%compared with that in group A,but it only increased 11%in group D1．And that increased by 57%in group D2 as compared with that in group D1．Conclusion:Supplying with L-Arg could increase muscle glycogen cotents, muscle AMPK activity,and sarcolemma GLUT4 content in overtraining rats,whichmightbe helpful in staying or treating overtraining．

rat;overtraining;L-arginine;muscle glycogen;GLUT4;AMPK

G 804．7

A

1005-0000（2010）04-0340-04

2010-04-20；

2010-05-12；錄用日期：2010-05-15

上海市教委課題（項(xiàng)目編號(hào)：06IZ004）；上海市重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：S30802）

劉無(wú)逸（1955-），男，浙江寧波人，上海體育學(xué)院副教授。

上海體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)科學(xué)學(xué)院，上海200438。

從第7周開(kāi)始，配制濃度為1%的L-精氨酸溶液供C組和D2組大鼠每晚飲用（溶液量略多于給藥前3個(gè)晚上的最大飲水量），連續(xù)3周。

1.1.2 大鼠訓(xùn)練方案購(gòu)入大鼠經(jīng)一周適應(yīng)后，參照Bedford等的大鼠運(yùn)動(dòng)負(fù)荷標(biāo)準(zhǔn)[3]，采用BCPF-98型生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物跑臺(tái)（由杭州立泰科技有限公司提供）進(jìn)行上坡跑訓(xùn)練。訓(xùn)練時(shí)間為9周，其中前4周為遞增負(fù)荷，后5周維持大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)，每周訓(xùn)練6天。

大鼠過(guò)度訓(xùn)練模型根據(jù)葉劍飛等[4]采用的方法適當(dāng)改進(jìn)后進(jìn)行，具體方案見(jiàn)表1。

表1 9周大鼠訓(xùn)練方案
Table 1 9-week train ing pro tocol for rats

訓(xùn)練周次/（m·min-1）坡度/%時(shí)間/（m·min-1）速度/（m·min-1）坡度/%時(shí)間/（m·min-1）1 15 0 30 15 0 30 2 20 5 45 20 5 60 3 25 10 45 25 10 90 4 30 15 45 30 15 90 5 30 15 60 30 15 120 6 31 15 60 31 15 120 7 32 15 60 32 15 120 8 33 15 60 33 15 120 9 35 15 60 35 15 120 B組和C組D組速度

1.1.3 大鼠處死和取材9周訓(xùn)練結(jié)束后36 h，各組大鼠于安靜狀態(tài)下斷頭處死，均取比目魚(yú)肌和腓腸肌白肌部分，液氮速凍后置-78℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>