楊梅水提液鎮(zhèn)痛抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

【摘要】:目的:探討楊梅水提液的鎮(zhèn)痛與抗炎作用。方法:提取楊梅水提液;每個實(shí)驗(yàn)均分為阿司匹林組，楊梅水提液組和空白對照組。鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)通過應(yīng)用熱板刺激法和用冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)法;抗炎實(shí)驗(yàn)采用二甲苯引起小鼠耳廓腫脹致炎造模方法，觀察并記錄小鼠耳廓腫脹程度。結(jié)果:在鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)中楊梅水提液能非常明顯地提高小鼠的痛閾，并對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)有明顯抑制作用(與生理鹽水組相比:P<0.01，P<0.05);在抗炎實(shí)驗(yàn)中楊梅水提液能抑制二甲苯對小鼠所致的耳廓腫脹(與生理鹽水組相比:P<0.05);結(jié)論:楊梅水提液具有明顯的鎮(zhèn)痛和抗炎作用。

【關(guān)鍵詞】:楊梅水提液;鎮(zhèn)痛作用;抗炎作用

【中圖分類號】R29【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1007-8517(2010)06-047-2

楊梅(Myrica.rubra Sieb.et Zucc)為楊梅科楊梅屬植物，為我國特產(chǎn)，主要分布于長江流域以南，以浙江、江蘇、福建等省為主要產(chǎn)區(qū)[1]。楊梅水提液中含多種酚類化合物，主要由黃酮類化合物及原花色素類化合物組成，這兩類化合物均有顯著的生物活性。近代醫(yī)學(xué)進(jìn)一步證明，楊梅除具有抗菌、防止便秘、提高食欲、止瀉等功效外，同時對高血壓、心血管病等也有一定的療效，還有防癌、治癌的功效[2]。然而目前還很少發(fā)現(xiàn)有關(guān)楊梅水提液的抗炎鎮(zhèn)痛作用的文獻(xiàn)報(bào)道，為此，我們提取了楊梅水提液進(jìn)行鎮(zhèn)痛和抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究。

1材料

1.1楊梅為楊梅科楊梅屬植物楊梅的成熟果實(shí)，購于廣東潮汕地區(qū)的楊梅果園。

1.2動物昆明種小鼠90只，體重(20.0±2.1)g，雌雄兼用，由湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院提供。

1.3試藥楊梅水提液的制備[1]:楊梅→常溫解凍→打漿→壓榨→離心→取上清液，然后用蒸餾水稀釋至1g/ml，即得;二甲苯為武漢市江北化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品(批號:20040806);1%醋酸溶液(CH3COOH)的配制:取2.8ml 36%乙酸(武漢市江北化學(xué)試劑廠，批號:20020425)，加蒸餾水至100ml，即得;阿司匹林溶液(Aspirin)的配制:取復(fù)方乙酰水楊酸片(山東新華制藥股份有限公司產(chǎn)品，批號:0903252)一片，含阿司匹林0.22g，研磨后溶于110ml蒸餾水，得0.002g/ml阿司匹林溶液(即用0.002g/ml的阿司匹林溶液按2ml/10g灌胃給藥就相當(dāng)于用阿司匹林制劑按0.2g/kg ig給藥)。

1.4儀器BS224S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);80-2型電動離心機(jī)(金壇市富華儀器有限公司);GJ-8402型熱板測痛儀(寧海白石電子醫(yī)藥儀器廠)。

2方法和結(jié)果

2.1楊梅水提液對熱板致小鼠痛閾的影響選用雌性健康小鼠，在熱板測痛儀(55±0.5)℃上，以秒表記錄小鼠放入到出現(xiàn)舔足的時間段為痛閾指標(biāo)(以秒記)。將每只小鼠進(jìn)行預(yù)選，對痛閾小于5s，或大于30s及喜跳的小鼠剔除，選合格的小鼠30只，隨機(jī)分成3組，每組10只。給藥組、陽性組和空白組均以100ml/kg的劑量分別灌胃楊梅水提液、阿司匹林溶液和生理鹽水。給藥前先測定各小鼠痛閾值2次，求平均值為其正常痛閾值。測定給藥后30min，60min和90min出現(xiàn)舔足的潛伏期，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果見表1。

由表1可以看出:楊梅水提液組小鼠在給藥后30min到90min平均痛閾值均高于生理鹽水組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.05)。所以可以看出楊梅水提液對物理性疼痛模型有明顯鎮(zhèn)痛作用。

2.2楊梅水提液對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響取健康小鼠30只，雌雄各半，隨機(jī)分成3組，分組和給藥同熱板法，給藥30min后，各組均ip 1%醋酸溶液0.2ml/10g，觀察10min內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)次數(shù)，按下式求得扭體反應(yīng)抑制率，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果見表2。

抑制率(%)=(1—給藥組扭體反應(yīng)次數(shù)/空白組扭體反應(yīng)次數(shù))×100%

表2 楊梅水提液對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響()

組別動物/只扭體次數(shù)抑制率(%)

生理鹽水1022.1±3.67——

阿司匹林105.50±1.31**75.11%

楊梅水提液109.40±1.46**54.47%

與生理鹽水比較:**P<0.01

由表2可以知道:楊梅水提液組對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的抑制率為54.47%，其小鼠對醋酸致扭體反應(yīng)次數(shù)明顯低于生理鹽水組(P<0.01)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此看出楊梅水提液對化學(xué)性疼痛模型有明顯鎮(zhèn)痛作用，且其作用發(fā)揮迅速明顯。

2.3楊梅水提液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響選用昆明小鼠30只，隨機(jī)分成3組，每組10只。給藥組、陽性組和空白組均以100ml/kg的劑量分別灌胃楊梅水提液、阿司匹林溶液和生理鹽水。給藥1h后以50μl二甲苯涂于小鼠的右耳廓兩面致炎，左耳廓為對照，4h后剪下兩耳，用直徑6mm的打孔器打下兩耳耳片，于BS224S型電子天平分別稱兩耳的重量，以兩耳差表示炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度[3]。按下式求得炎癥反應(yīng)抑制率，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果見表3。

抑制率(%)=空白組與給藥組平均腫脹率之差/空白組平均腫脹度×100%

由表3可以知道:楊梅水提液組對二甲苯致小鼠耳廓腫脹炎癥的抑制率為59.83%，其小鼠對兩耳的重量差低于生理鹽水組(P<0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此看出楊梅水提液具有抗炎作用，但其抗炎作用沒有阿司匹林作用明顯。

3討論

實(shí)驗(yàn)中我們采用了經(jīng)典的急性動物模型，其病理反應(yīng)主要表現(xiàn)為局部充血、水腫及滲出等，是研究藥物抗炎作用的主要模型之一。醋酸致小鼠扭體模型主要是間接通過產(chǎn)生腹腔急性炎癥反應(yīng)所致，是篩選非甾體抗炎藥鎮(zhèn)痛作用的一種敏感而簡便的方法。而楊梅中含有黃酮類、甾醇類、多糖類等化合物，且黃酮類化合物含量較高，很多文獻(xiàn)報(bào)道[4-5]黃酮類化合物是其抗炎鎮(zhèn)痛作用的主要有效成分。

物理和化學(xué)性致痛實(shí)驗(yàn)證實(shí):楊梅水提液能明顯提高小鼠熱板所致痛閾值，對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)有明顯對抗作用，看出楊梅水提液具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其機(jī)制可能是與楊梅水提液中含豐富的生物活性的物質(zhì)，如花色苷、黃酮、甾醇類等化合物等[6]有關(guān)，其鎮(zhèn)痛作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

楊梅水提液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響的實(shí)驗(yàn)中，楊梅的抗炎作用明顯，其抗炎作用機(jī)制可能與楊梅水提液中含有豐富的抗炎成分有關(guān)，如楊梅素、有機(jī)酸等，其抗炎作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

楊梅為我國特產(chǎn)，其不僅具有較高的營養(yǎng)價值，而且有著潛在的藥理研究價值，有報(bào)道[7]楊梅核仁成分對胃癌細(xì)胞具有殺傷抑制作用，這是由于楊梅核含有豐富的維生素B17，是一種抗癌物質(zhì)。所以說楊梅是一類值得關(guān)注的天然藥物資源，有待于進(jìn)一步開發(fā)研究。

參考文獻(xiàn)

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