牛病毒性腹瀉/黏膜病診斷技術(shù)

（云南省彌渡縣彌城鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心彌城畜牧獸醫(yī)工作站，云南彌渡 675600）

1 前言

牛病毒性腹瀉/黏膜病簡(jiǎn)稱為牛病毒腹瀉或者是牛黏膜病，也就是BVD或者是BMD，患病后，其本質(zhì)就是一種傳染病，在患病之后，最為典型的特征就是發(fā)熱、潰瘍以及白細(xì)胞數(shù)量迅速減少，如果是懷孕母牛的話，流產(chǎn)率大大增加，而且胎兒的畸形率也大大提升。關(guān)于這種疾病的病原，主要就是牛腹瀉病毒，也就是BVDV，系黃病毒科。根據(jù)病原體在細(xì)胞培養(yǎng)物上特性的差異，可以分為兩種類型，分別是致細(xì)胞病變型和非致細(xì)胞病變型。這兩種生物型的血清型是相同的，但是與宿主細(xì)胞發(fā)生的作用卻是不同的。

大量的研究表明，對(duì)于這種病毒，雖然結(jié)合流行病學(xué)的相關(guān)資料以及臨床的癥狀等可以進(jìn)行初步的診斷，但是在實(shí)際的臨床診斷中，與口蹄疫以及水泡性口炎和藍(lán)舌病等是比較難以區(qū)別開來的。從目前的報(bào)道情況來看，雖然在國(guó)內(nèi)外都有了很多病毒的檢測(cè)方法，但是從推廣和應(yīng)用的實(shí)際效果來看，還是抗體診斷方法和抗原診斷方法的效果是比較理想的。

2 關(guān)于牛病毒性腹瀉/黏膜病診斷技術(shù)的研究與分析

2.1 牛病毒性腹瀉/黏膜病概述

這種疾病的主要傳染源就是患病的畜禽，無(wú)論是分泌物，還是排泄物，抑或是血液，脾臟等，都含有病毒，傳播的方式既可以是直接的，也可以是間接的，患病之后，通常會(huì)有不規(guī)則的病斑出現(xiàn)，部位多事在消化道、淋巴組織，以及口腔和咽部等。這種疾病的潛伏期通常是在一個(gè)周到十天，可以分為急性型的和慢性型的。

2.2 抗體的診斷方法

提及抗體的診斷方法，主要有以下幾種方法：

第一種方法就是血清中和試驗(yàn)

血清中和試驗(yàn)是進(jìn)行致病病毒流行病學(xué)調(diào)查的有效手段之一，最為顯著的特征就是可以多次進(jìn)行血清滴度的檢測(cè)，使用起來也是便捷靈活的。但是有一點(diǎn)需要注意的是，制作病毒的感染過程是非常復(fù)雜的，如果僅僅是依靠血清中和抗體的檢測(cè)方式作為診斷的依據(jù)是非常難以達(dá)成的。

第二種方法就是瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)

這種實(shí)驗(yàn)就是對(duì)于已經(jīng)選定的發(fā)炎了或者是糜爛、潰瘍的黏膜在不經(jīng)過任何處理的情況下，就可以直接和陽(yáng)性的血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。從相關(guān)資料的統(tǒng)計(jì)情況來看，大約有半數(shù)以上的患病牛出現(xiàn)陽(yáng)性的反應(yīng)。但是這種實(shí)驗(yàn)是群特異性的，對(duì)于毒株是不能進(jìn)行鑒別的。

從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果來看，在對(duì)CP株進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，探針的檢出率是非常高的，但是在對(duì)NCP株進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，探針的檢測(cè)率就是比較低的，這樣的話，就需要再研究出一種探針，這種探針是適用于NCP序列的。

總體來說，核酸探針技術(shù)的操作是比較簡(jiǎn)單的，而且特異性表現(xiàn)也是非常理想的，便于進(jìn)行長(zhǎng)期保存，另外也是回收利用，尤其是在制作成了試劑盒之后，更加便于進(jìn)行臨床使用的應(yīng)用和推廣，快捷、高效、安全。

第三種方法就是反轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，也就是PCR，可以說其本質(zhì)就是一種分子生物學(xué)技術(shù)，應(yīng)用也是非常廣泛的，其主要的原理就是依托于病毒的基因組序列，可以進(jìn)行特異性引物的合成，可以是一對(duì)，也可以是幾對(duì)，這種方法不僅僅特異性強(qiáng)，而且也比較敏感，檢測(cè)效果是非常理想的，尤其是通過這種檢測(cè)進(jìn)食，可以實(shí)現(xiàn)和類似病，主要是豬瘟病毒和邊界病病毒的區(qū)別。

這種檢測(cè)技術(shù)的顯著特征就在于方便快捷，既可以進(jìn)行單個(gè)樣品的檢測(cè)，也可以進(jìn)行整體的檢測(cè)，無(wú)論是牛乳，還是血清，抑或是血塊等都可以作為檢測(cè)本病的樣品，檢測(cè)的過程也非常簡(jiǎn)單，基本上兩天到三天就能夠出結(jié)果。還有一點(diǎn)就是隨著技術(shù)的發(fā)展，一步法的技術(shù)已經(jīng)趨于成熟，檢驗(yàn)的步驟得以簡(jiǎn)化，而且時(shí)間縮短了，成本大大降低，在臨床上的應(yīng)有效果是非常理想的。

事實(shí)上，檢測(cè)的方法并不僅僅局限于這幾種，只是從整體情況上來看，無(wú)論是國(guó)內(nèi)，還是在國(guó)外，在病毒的檢測(cè)方法方面，都是更加傾向于病原檢測(cè)的，這樣的話就能夠在患病的初期就能夠?qū)Σ∨＿M(jìn)行檢測(cè)，即使牛群中有PI牛，沒有中和抗體存在德華，依托病毒抗原技術(shù)和核酸檢測(cè)技術(shù)也能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)這種疾病的檢測(cè)，有效降低漏檢的現(xiàn)象，從而為盡快實(shí)現(xiàn)牛群的凈化奠定堅(jiān)實(shí)、有力的基礎(chǔ)。另外，如果是抗原檢測(cè)的話，還有一個(gè)特點(diǎn)就是可以有效避免病毒成員之間的血清學(xué)交叉反應(yīng)，從而保證檢測(cè)的特異性和準(zhǔn)確性。

3 結(jié)語(yǔ)

從上文的論述中，我們對(duì)于牛病毒性腹瀉/黏膜病診斷技術(shù)有了更加深入、細(xì)致的了解和認(rèn)識(shí)，可以說目前的診斷方法是多樣化的，但是每一種診斷方法都既有優(yōu)勢(shì)，又有不足，因此在選擇和使用的時(shí)候，可以根據(jù)實(shí)際情況，選擇一種或者幾種聯(lián)合使用。當(dāng)然，隨著畜牧養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展進(jìn)程的不斷加快，尤其是隨著生物技術(shù)和相關(guān)學(xué)科的發(fā)展，對(duì)于這種疾病的研究也在不斷深入，也會(huì)出現(xiàn)更多的檢測(cè)方法，從而為從根本上控制和消除這種疾病提供更加有效的診斷手段。

[1] 陳茂盛，寇改霞.陜西省牛病毒性腹瀉/黏膜病血清學(xué)調(diào)查[J].畜牧獸醫(yī)雜志，1994，（2）：23-24.

[2] 韓鵬，劉亞剛，華莎，等.我國(guó)牛病毒性腹瀉-黏膜病的流行及防治狀況[J].畜禽業(yè)，2003，（11）：8-10.

[3] 洛桑列措，張茲鈞.西藏牦牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒的分離和鑒定[J].中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)，1991，（1）：3-7.