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    復(fù)合防腐劑對發(fā)酵火腿抑菌效果的研究

    2012-04-13 12:30:32李欣蔚遲原龍賈冬英
    中國釀造 2012年12期
    關(guān)鍵詞:聚賴氨酸火腿防腐劑

    李欣蔚,遲原龍,賈冬英,繆 婷,黃 灝,姚 開*

    (1.四川大學(xué) 輕紡與食品學(xué)院,四川 成都 610065;2.成都大學(xué) 師范學(xué)院,四川 成都 610106)

    發(fā)酵火腿是以豬后腿為原料,在微生物和酶的作用下蛋白質(zhì)和脂肪發(fā)生降解和轉(zhuǎn)化,進而形成的具有特殊風(fēng)味和色澤的一類傳統(tǒng)肉制品。然而,發(fā)酵成熟后的火腿在貯藏過程中,其中的微生物會繼續(xù)生長繁殖,從而導(dǎo)致火腿的腐敗變質(zhì)。研究表明,葡萄球菌、乳酸菌、霉菌等是導(dǎo)致火腿腐敗的主要微生物[1-2]。不同種類食品防腐劑的抑菌譜不同,因此利用復(fù)合防腐劑的協(xié)同效應(yīng),可以有效抑制食品中多種微生物[3]。試驗在考察了乳酸鏈球菌素、乳酸鈉和聚賴氨酸等防腐劑對發(fā)酵火腿抑菌效果的基礎(chǔ)上,研究了復(fù)合防腐劑對火腿的抑菌效果,確定了不同防腐劑復(fù)合的最佳配比,可為延長發(fā)酵火腿的保質(zhì)期提供有效的防腐方法。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    發(fā)酵火腿由四川省劍閣縣某火腿廠提供;乳酸鏈球菌素、聚賴氨酸和納他霉素均由浙江銀象生物工程有限公司提供;乳酸鈉由河南金丹乳酸科技有限公司提供;脫氫醋酸鈉由哈爾濱康源食品原料公司提供;其他均為國產(chǎn)分析純或生化試劑。

    1.2 儀器與設(shè)備

    高壓蒸汽滅菌器,恒溫培養(yǎng)箱,無菌操作臺等。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 火腿的防腐處理

    (1)防腐液的配制:定量稱取各防腐劑,分別用1.0%(v/v)乳酸溶液配制成不同濃度的防腐液。

    (2)火腿的防腐處理:剔除火腿表面氧化層,取火腿的肌肉組織,分割成重約100g塊狀,分別將不同的防腐液定量(4.0mL)均勻噴灑于火腿肉塊表面,真空包裝后于37℃貯藏5d,采用平板菌落計數(shù)法檢測樣品的菌落總數(shù)(N),平行重復(fù)3次,取其平均值,以1.0%(v/v)乳酸溶液替代防腐液作為空白對照(N0),計算其抑菌率(IR)。

    IR(%)=(N0-N)/N0×100

    1.3.2 復(fù)合防腐劑配比的優(yōu)選

    采用3因子二次通用旋轉(zhuǎn)設(shè)計試驗,以復(fù)合防腐液中的乳酸鏈球菌素(A)、聚賴氨酸(B)和乳酸鈉(C)的濃度作為自變量,以火腿的菌落總數(shù)作為響應(yīng)值(Y),利用SAS 9.1軟件建立復(fù)合防腐劑對火腿抑菌效果的響應(yīng)面模型,并對其進行方差分析,經(jīng)典型相關(guān)分析確定復(fù)合防腐劑的最佳配比。

    采用MATLAB 7.0軟件,繪制防腐劑交互作用的等高線圖和響應(yīng)面圖,考查3種防腐劑之間的交互作用。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 防腐劑對火腿的抑菌效果影響

    不同濃度的防腐劑對火腿抑菌效果的影響如圖1所示??梢钥闯?,5種防腐劑的抑菌效果均隨著其濃度的增加而增強,其中乳酸鏈球菌素、聚賴氨酸和乳酸鈉的抑菌作用較強。究其原因,乳酸鏈球菌素對葡萄球菌、乳桿菌等革蘭氏陽性菌具有很強的抑制作用;而聚賴氨酸具有更廣的抑菌譜,對細(xì)菌、霉菌和酵母都有不同程度的抑制或殺滅作用[4-5];乳酸鈉通過降低肉制品的水分活度和阻礙微生物的代謝,可以抑制某些微生物的生長,對革蘭氏陰性菌有較強的抑制作用[6];脫氫醋酸鈉和納他霉素主要抑制霉菌和酵母菌的生長,由于火腿樣品已剔除表面氧化層,霉菌數(shù)量已大為減少,故表現(xiàn)出其總的抑菌效果相對較差。

    圖1 不同防腐劑對火腿的抑菌效果影響Fig.1 Antibacterial effect of different preservatives on ham

    2.2 復(fù)合防腐劑對火腿的抑菌效果影響

    2.2.1 復(fù)合防腐劑最佳配比的確定

    采用3因子二次通用旋轉(zhuǎn)設(shè)計試驗,考察不同配比復(fù)合防腐劑對火腿中微生物數(shù)量影響的結(jié)果見表1。可以看出,經(jīng)復(fù)合防腐劑處理后,火腿中的微生物數(shù)量明顯減少,且不同配比復(fù)合防腐劑的作用效果也存在一定差異。據(jù)此,利用SAS軟件建立的復(fù)合防腐劑對火腿中微生物抑制效果的響應(yīng)面模型為:

    表1 3因子二次通用旋轉(zhuǎn)設(shè)計及試驗結(jié)果Table 1 Three-factor quadratic general rotary design and results

    表2 響應(yīng)面模型的方差分析結(jié)果Table 2 Analysis of variance for response surface model

    所建立響應(yīng)面模型的方差分析結(jié)果見表2。可以看出,二次項對火腿中微生物數(shù)量的影響極顯著,一次項和交互項對火腿中微生物的數(shù)量的影響顯著,失擬項不顯著性,模型擬合達(dá)到極顯著水平。偏回歸系數(shù)的顯著性檢驗結(jié)果表明,乳酸鏈球菌素與聚賴氨酸(p=0.026)、乳酸鏈球菌素與乳酸鈉(p=0.011)之間存在顯著的交互效應(yīng),而聚賴氨酸與乳酸鈉之間的交互效應(yīng)(p=0.13)不顯著。由SAS軟件RSREG過程可知,當(dāng)乳酸鏈球菌素、聚賴氨酸和乳酸鈉的濃度分別為0.495%、0.354%、2.17%(w/v)時,火腿的菌落總數(shù)有最小值(75cfu/g),表明該配比復(fù)合防腐劑的抑菌效果最佳。驗證試驗結(jié)果顯示,采用最佳配比的復(fù)合防腐劑處理后火腿中的菌落總數(shù)為73cfu/g,模型誤差為2.7%,說明該模型能較好地預(yù)測復(fù)合防腐劑對火腿的抑菌效果。

    2.2.2 不同防腐劑交互作用對火腿中微生物數(shù)量的影響

    為了觀察兩種防腐劑同時對火腿的抑菌作用的影響,可以對回歸方程進行降維分析。固定一種防腐劑的濃度,得到另外2種防腐劑濃度對火腿中菌落總數(shù)Y值影響的交互效應(yīng)方程:

    用MATLAB7.0對以上方程繪圖得到圖2和圖3。對乳酸鏈球菌素和聚賴氨酸交互效應(yīng)方程進行計算可知,當(dāng)乳酸鏈球菌素的濃度為0.382%(w/v)、聚賴氨酸的濃度為0.311%(w/v)時,火腿中的菌落總數(shù)達(dá)到最小值(78cfu/g)。從圖2可以看出,當(dāng)乳酸鏈球菌素的濃度小于0.382%(w/v)、聚賴氨酸的濃度小于0.311%(w/v)時,火腿中微生物的數(shù)量隨著防腐劑濃度的增大而減少,這是由于兩種防腐劑存在協(xié)同作用[8];當(dāng)乳酸鏈球菌素的濃度大于0.382%(w/v)、聚賴氨酸的濃度大于0.311%(w/v)時,微生物的數(shù)量隨著防腐劑濃度的增大而增大。該結(jié)果與徐世明等[8]、張德權(quán)等[9]的研究結(jié)果基本一致。

    對乳酸鏈球菌素和乳酸鈉的交互效應(yīng)方程進行計算可知,當(dāng)乳酸鏈球菌素的濃度為0.404%(w/v)、乳酸鈉的濃度為1.712%(w/v)時,火腿中的菌落總數(shù)達(dá)到最小值(78cfu/g)。從圖3可以看出,當(dāng)乳酸鏈球菌素的濃度小于0.404%(w/v)、乳酸鈉的濃度小于1.712%(w/v)時,火腿中微生物的數(shù)量隨著防腐劑濃度的增大而減少,這是由于兩種防腐劑存在協(xié)同作用[10];當(dāng)乳酸鏈球菌素的濃度大于0.404%(w/v)、乳酸鈉的濃度大于1.712%(w/v)時,火腿中微生物的數(shù)量隨著防腐劑的濃度的增大而增大,產(chǎn)生該現(xiàn)象的原因還有待進一步研究。

    圖2 乳酸鏈球菌素與聚賴氨酸交互作用的等高線圖和響應(yīng)面圖Fig.2 Response surface and contour plots of the interaction between nisin and polylysine

    圖3 乳酸鏈球菌素與乳酸鈉交互作用的等高線圖和響應(yīng)面圖Fig.3 Response surface and contour plots of the interaction between nisin and sodium lactate

    3 結(jié)論

    乳酸鏈球菌素、聚賴氨酸、乳酸鈉、脫氫醋酸鈉和納他霉素均對發(fā)酵火腿中微生物具有一定的抑制作用,其中乳酸鏈球菌素、聚賴氨酸和乳酸鈉的抑菌作用較強。復(fù)合防腐劑對發(fā)酵火腿具有更好的抑菌效果,當(dāng)復(fù)合防腐液中乳酸鏈球菌素、聚賴氨酸、乳酸鈉的濃度分別為0.495%(w/v)、0.354%(w/v)、2.17%(w/v)時,其抑菌效果達(dá)到最佳,火腿中的菌落總數(shù)由初始時的3960cfu/g降為73cfu/g,模型的誤差為2.7%,表明所建立的響應(yīng)面模型能較為準(zhǔn)確地預(yù)測復(fù)合防腐劑對發(fā)酵火腿的抑菌效果。

    [1]甄宗圓.金華火腿微生物區(qū)系研究[D].重慶:西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文,2004.

    [2]李平蘭,沈清武,呂燕妮,等.宣威火腿成熟產(chǎn)品中主要微生物菌相構(gòu)成分析[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,2003,15(5):262-263.

    [3]徐幸蓮,呂鳳霞,馮東岳.Nisin、乳酸鈉和微波對鹽水鴨貨架期的影響[J].食品工業(yè)科技,2000,21(6):39-41.

    [4]李有起.Nisin 在食品防腐作用中的進展[J].食品研究與開發(fā),2012,33(4):233-235.

    [5]倪清艷,李 燕,張海濤.ε-聚賴氨酸的抑菌作用及在防腐中的應(yīng)用[J].食品科學(xué),2008,29(9):102-105.

    [6]王光華.乳酸和乳酸鈉在肉及制品中的抑菌作用[J].肉類工業(yè),1994(1):29-31.

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    [8]徐世明,趙瑞連,郭光平,等.Nisin、乳酸鈉、山梨酸鉀復(fù)合延長燒雞貨架期的研究[J].食品科技,2012,37(6):160-167.

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    [10]TAKAHASHI H,KASHIMURA M,MIYA S,et al.Effect of paired antimicrobial combinations onListeria monocytogenesgrowth inhibition in ready-to-eat seafood products[J].Food Control,2012,26:397-400.

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