高效液相色譜法測(cè)定補(bǔ)心顆粒中阿魏酸的含量

葉　芳

【摘要】 目的 采用反相高效液相色譜法測(cè)定補(bǔ)心顆粒中阿魏酸的含量。方法 以乙腈-0.1%磷酸(25:75)為流動(dòng)相，流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為325 nm。結(jié)果 阿魏酸在0.119~1.071 μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，回收率為98.14%，RSD為1.17%(n=6)。結(jié)論 方法簡(jiǎn)單、靈敏度高，可用于補(bǔ)心顆粒中阿魏酸的含量測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】補(bǔ)心顆粒；阿魏酸；HPLC

Determination of ferulic acid in Buxin granule by HPLC

YE Fang.The 1st Affiliated Hospital of Zhongshan University,Guangzhou 510080,China

【Abstract】 Objective To develop RP-HPLC method for the assay of Ferulic acid in Buxin Granule.Methods The mobile phase consist of acetonitrile-0.1%H3 PO4(255C∶C75).The flow rate was 1.0 ml/min.The UV detection was set at 325nm.Results Ferulic acid had a good linear in the range of 0.119~1.071 μg.The average recovery of Ferulic acid was 98.14%with RSD 1.17%(n=6).Conclusion The method was simple，sensitive and rapid and it can be applied to the content determination of Buxin Granule.

【Key words】Buxin granule; Ferulic acid; HPLC

補(bǔ)心顆粒主要由當(dāng)歸、黨參、地黃、麥冬等藥物組成，具有調(diào)補(bǔ)陰陽(yáng)、益氣養(yǎng)血的作用，主要用于陰陽(yáng)兩虛、氣血不足患者，陣發(fā)性心動(dòng)過(guò)速，心血管官能癥，心肌勞損等疾患。制劑中成分較復(fù)雜，本文采用高效液相色譜法測(cè)定當(dāng)歸中阿魏酸的含量，探討該方的質(zhì)量控制方

法，為保證制劑的質(zhì)量奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1100高效液相色譜儀，DAD檢測(cè)器，四元梯度泵，G2170AA數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

1.2 試藥 乙腈為色譜純?cè)噭?一級(jí))，水為雙蒸水，其他試劑均為分析純。阿魏酸對(duì)照品(批號(hào)：110773-200611，由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供)。

2 實(shí)驗(yàn)條件

2.1 色譜條件 色譜柱：Kromasil (4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸(25:75)；檢測(cè)波長(zhǎng)：325 nm；流速：1.0 ml/min；柱溫：35℃。

2.2 線性范圍的考察 精密吸取對(duì)照品溶液(阿魏酸0.119 mg/ml)1、3、5、7、9 μl進(jìn)行色譜測(cè)定，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，并以峰面積(Y)對(duì)進(jìn)樣量(X)進(jìn)行回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

阿魏酸：Y=4751.303 48X-13.222 42，r=0.999 97。

表明阿魏酸在0.119~1.071 μg范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3 精密度試驗(yàn) 精密吸取上述對(duì)照品溶液5 μl重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)得峰面積積分值RSD<2%，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一阿魏酸對(duì)照品溶液5 μl按上述色譜條件測(cè)定5次，每次間隔2 h，結(jié)果表明8 h內(nèi)穩(wěn)定，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 按擬定的含量測(cè)定方法，對(duì)同一批樣品(批號(hào)：080311)分別制備供試液，測(cè)得峰面積并計(jì)算含量，RSD<2%，結(jié)果見(jiàn)表4。

2.6 回收率試驗(yàn) 取已知含量的樣品(批號(hào)080311)，分別精密加入一定量的阿魏酸對(duì)照品，按供試品制備與測(cè)定方法，在上述色譜條件下，平行做6組，結(jié)果見(jiàn)表5。

2.7 樣品測(cè)定 取本品適量，研細(xì)，精密稱取約6 g，置50 ml錐形瓶中，加5%碳酸鈉水溶液50 ml，超聲提取30 min，放冷，用乙醚洗滌2次，每次50 ml，棄取乙醚液，水液用鹽酸調(diào)pH至1~2后，再用乙醚萃取3次，每次50 ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ萦?0 ml棕色量瓶中，搖勻，即得。

測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液5 μl、供試品溶液10 μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按峰面積用外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表6。

3 討論

本品為一多種中藥配制而成的中藥復(fù)方制劑，成分較為復(fù)雜，方中當(dāng)歸為君藥，采用高效液相色譜法測(cè)定方中當(dāng)歸所含阿魏酸的含量，采用酸堿法處理樣品，可以較好地去除雜質(zhì)，結(jié)果表明方法簡(jiǎn)單、靈敏度高、重現(xiàn)性好，可用于本制劑的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)

［1］ 中華人民共和國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典.化學(xué)工業(yè)出版社,2005.

［2］ 王健,范文成,葉曉紅，等.HPLC測(cè)定婦康片中阿魏酸的含量.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2008,14(8):16.

［3］ 朱順?lè)?HPLC測(cè)定胃康散中阿魏酸的含量.中國(guó)中藥雜志,2008，33(14):1758.